单细胞凝胶电泳在放射医学中的应用进展

单细胞凝胶电泳技术(Single Cell Gel Electrophoresis Assay,SCGE),又称彗星试验(Comet Assay)或微凝胶电泳(Microgel Electrophoresis,MGE),它是在核酸沉淀法(Nucleoid Sedimentation)和晕圈分析(Holo Assay)及弱碱性条件下的单细胞凝胶电泳等检测技术基础上逐步发展起来的一种在单细胞水平检测哺乳类有核细胞DNA断裂的新技术.它主要包括Olive等(1984)建立的测定DNA双链断裂(dsb)的中性微凝胶电泳技术和Singh等(1988)建立的测定DNA单链断裂(ssb)的碱性微胶电泳技术.     

亚砷酸钠对人支气管上皮细胞的氧化损伤作用

目的 探讨不同浓度亚砷酸钠对永生化人支气管上皮细胞氧化损伤的影响.方法 体外培养永生化人支气管上皮(HBE)细胞,加入终浓度为0～50000 μmol/L的亚砷酸钠溶液暴露24h,测定细胞活性;加入终浓度为0～6μmol/L的亚砷酸钠溶液暴露24h,测定活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力及细胞DNA链断裂情况.结果 与对照组比较,各浓度亚砷酸钠染毒组HBE细胞内ROS、MDA含量和Olive尾矩均显著升高,细胞存活率和SOD活力均显著下降,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,HBE细胞内MDA、ROS含量和Olive尾矩均呈明显的上升趋势(P＜0.05),细胞存活率和SOD活力均呈明显的下降趋势(P＜0.05).结论 亚砷酸钠可以诱导HBE细胞氧化损伤增加,提示氧化应激可能是亚砷酸钠致HBE细胞毒作用机制之一.     

微波与γ射线联合照射对细胞生长增殖的影响

目的 观察900 MHz微波和γ射线联合辐射对人神经胶质瘤细胞(SHG44)的克隆形成率及细胞增殖活性的影响,探讨两者是否存在交互作用.方法 SHG44细胞按微波强度随机分为对照组(0 W/m2)、微波低剂量组(20 W/m2)、中剂量组(40 W/m2)和高剂量组(60 W/m2),联合组同时给予5 Gy的γ射线照射,用2×4析因设计研究两者的交互作用.结果 与对照组该细胞增殖活性相比,单纯微波处理的中剂量和高剂量的显著下降,分别为92 6%(P<0.05)和88 9% (P<0.01),γ射线与高剂量微波联合组为30.6%(P<0.01)显著低于各单纯微波组;克隆形成率结果与之相似.结论 本实验条件下,微波和γ辐射单独或联合均能抑制细胞的生长,且两种辐射联合能产生协同抑制作用.     

辐射致癌危险预测模型的改进

对辐射致癌危险度的计算,是基于特定肿瘤的危险预测模型。最近,对原有模型中使用的一些参数进行了改进,包括采用两种危险系数即死亡率危险系数和发病率危险系数、提出年龄和性别特异性的致癌危险系数等。应用这些改进的危险系数,计算并给出了不同核素和不同暴露方式下组织和器官的辐射致癌危险度估计值。     

微波辐射对γ射线致小鼠骨髓损伤的拮抗效应

目的 研究900 MHz微波辐射对γ射线致小鼠骨髓造血损伤的拮抗作用及其机制.方法 60Co γ射线一次性全身照射雄性健康昆明种小鼠,建立放射性造血损伤模型,观察不同剂量微波对小鼠γ射线照射后30d存活率及存活时间、体重、外周血象和脏器系数的影响,不同时相点小鼠骨髓粒-巨噬细胞系集落形成单位(CFU-GM)形成及骨髓有核细胞(BMNCs)增殖活性的变化,同时采用ELISA法检测血清中集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-3(IL-3)分泌水平.结果 60Co γ射线照射前给予120 μW/cm2的900 MHz微波辐射能明显提高受照射小鼠的存活率,促进外周血白细胞恢复,提高受照射小鼠的脾脏和胸腺系数,增强γ射线照射后,小鼠骨髓BMNCs增殖活性下降程度减小,并可促进CFU-GM集落形成,刺激GM-CSF、IL-3的表达.结论 特定强度的微波辐射具有一定的辐射防护作用,其作用机制可能与刺激GM-CSF表达、促进BMNCs增殖分化、降低射线导致的造血干细胞/祖细胞(HSCs/HPCs)增殖抑制,加快造血系统的重建有关.     

900MHz微波辐射对小鼠头部表面温度及神经行为的影响

[目的]观察手机频段（900MHz）微波辐射对小鼠头部表面温度、非空间学习记忆能力和对外界环境兴奋性的影响。[方法]采用900MHz、90μW／cm^2微波辐照小鼠2h,于辐照前、辐照中不同时间点和辐照后20min测量小鼠头部表面温度。避暗反应和开放场实验中,将小鼠随机分为3组：对照组,一次微波辐射组（功率密度90μW／cm^2、辐照1h）,持续微波辐射组（功率密度90μW／cm^2、1h／d、持续辐照10d）;比较微波辐射不同时间后小鼠学习记忆能力和对外界环境兴奋性的不同。[结果]辐射组小鼠随着辐照时间的延长,头部表面温度逐渐升高;在辐照100min时达最高点,与辐照前相比升高（2.95±0.48）℃;此后温度有所下降,但仍明显高于对照组（P〈0.01）。避暗实验中,一次微波辐射组与持续微波辐射组接受不同时间辐照后的潜伏期、错误次数差异均无统计学意义。开放场实验中,一次微波辐射组,辐照30min后较辐照前活动时间减少（P〈0.05）,停止辐照后30min的活动时间仍减少（P〈0.05）;持续微波辐射组,辐照6d后较辐照前小鼠总路程增加（P〈0.05）,平均速度增加（P〈0.01）,休息时间减少（P〈0.05）。[结论]900MHz、90μW／cm^2微波辐射对小鼠可能存在热效应;一次微波辐射和持续微波辐射,一定程度上影响了小鼠对外界环境的兴奋性,但对小鼠非空间学习记忆能力无明显影响。     

900MHz微波辐射对雄性大鼠血浆激素水平昼夜节律的影响

[目的]观察900 MHz微波辐射对雄性大鼠血浆褪黑素、睾酮和雌二醇水平昼夜节律的影响. [方法]健康雄性SD大鼠30只,适应性喂养30d后采集大鼠24h自发活动数据,利用生物节律单余弦分析软件筛选具有昼夜节律的大鼠17只,再对该17只大鼠24h采血6次测血浆褪黑素水平,然后选取褪黑素水平昼夜节律差异无统计学意义的大鼠10只,随机分为对照组和照射组,每组5只.照射组在昼夜时点(ZT)1点给予2000 μW/cm2900 MHz的微波辐射,1h/d,持续30d;对照组除不给予微波辐射外,其他条件同照射组(即假照射).大鼠在辐射结束后第0、4、8、12、16、20h各采血一次,测定大鼠血浆的褪黑素、睾酮和雌二醇水平,比较照射组与对照组血浆褪黑素、睾酮和雌二醇水平昼夜节律的不同.[结果]对照组在假照射后血浆褪黑素水平、睾酮水平存在明显昼夜节律,照射组在微波辐射后血浆褪黑素水平和睾酮水平也存在明显昼夜节律,但微波辐射后相位响应曲线的中值、振幅、峰值时点与对照组假照射后相比发生了明显变化(P＜0.05).对照组假照射后血浆雌二醇水平有明显昼夜节律(P＜0.05),照射组微波辐射后血浆雌二醇水平不存在昼夜节律(P＞0.05). [结论] 2000μW/cm2 900MHz微波辐射可影响雄性大鼠血浆褪黑素、睾酮和雌二醇水平的昼夜节律.     

衰老过程是否受基因控制

对这个问题的回答很可能是肯定的。最近的实验支持这样的假说,即人类细胞的衰老过程并非由于损伤的积累,而是内源性时序变化的结果。通常情况下,细胞在体外分裂有限,世代后就会衰老死亡。只有在特殊情形如发生恶变时,才会无休止地分裂下去。最近发现,细胞的增殖潜力是由少数几个基因控制的,当这些基因发生突变时,会导致细胞的无限增殖。将几种不同的突变细胞相互融合,其杂交的后代细胞中有些继续保持增殖能力,而有些则逐渐衰老死亡。这是由于亲代细胞具有不同的基因缺陷,因此在融合之后,每一方都可为另一方提供所缺乏的功能。杂交细胞发生恶变的原因在于两个亲代具有相同的基因缺陷。试验表明,只要有4个基因发生突变,就能产生26个不同的恶变细胞系。这就是说,细胞的某些基因主管正常的衰老程序,因此改变这些基因也就能控制细胞的生长。已知衰老细胞的信使RNA和某些膜蛋白分子能抑制年轻细胞DNA     

应用无线遥测技术研究褪黑素的降压作用

[目的]探讨不同昼夜时点给予褪黑素对自发性高血压大鼠血压及血清激素水平的影响,对褪黑素的降压机制进行初步研究. [方法] 20周龄自发性高血压大鼠6只,分别在收缩压峰值和谷值前1h给予褪黑素(10mg/kg),采用无线遥测方法,动态监测大鼠收缩压、舒张压、平均压.腹腔注射褪黑素0、1、2、3h后取血,采用自身对照的方法测定并比较褪黑素注射前后对应时点大鼠血压和血清内皮素、一氧化氮(NO)水平.[结果]与自身对照比较,注射褪黑素2h后,峰、谷值组大鼠收缩压下降率分别为11.56％、10.45％,舒张压下降率分别为12.66％、16.63％,平均压下降率分别为12.02％、12.88％;注射褪黑素后1h,NO上升率分别为55.44％、79.1％,内皮素下降率分别为14.22％、29.04％.[结论]褪黑素对自发性高血压大鼠有降压作用,部分原因可能是通过降低内皮素水平,提高NO水平而实现.     

吸入氡致大鼠肺蛋白质组表达变化的分析

目的 从蛋白质组学角度分析氡染毒后大鼠肺组织蛋白质表达谱的变化。方法 雄性Wistar大鼠氡吸入染毒累积剂量分别达100、200、400工作水平月(WLM)后,取大鼠肺组织,裂解提取其总蛋白;双向电泳(2-DE)分离总蛋白,ImageMaster 2D Platinum软件分析差异表达蛋白,切取差异蛋白点,胶内酶解并进行质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定。结果 正常对照组和氡染毒组大鼠肺组织的2-DE图谱有明显差异,差异表达点中与氡染毒呈剂量变化关系的点有14个表达上调,9个表达下调,质谱鉴定出其中的15个差异蛋白点。结论 氡染毒组大鼠肺组织的蛋白表达谱发生了一定的差异性,氡吸入致靶器官肺损伤可能与多种蛋白相关。