不同浓度人羊膜匀浆上清液培养大鼠许旺细胞的增殖

背景：许旺细胞是周围神经修复过程的重要细胞,而研究发现人羊膜细胞分泌的多种细胞因子能够促进许旺细胞增殖。 目的：观察不同浓度人羊膜匀浆上清液对鼠许旺细胞(RSC96)生长的影响。 方法：使用含体积分数20%胎牛血清的高糖DMEM培养基原代培养RSC96细胞株,传代至第2代用于实验研究。根据人羊膜匀浆上清液在培养基中的不同体积分数(0,10,15,20,25%)分组。 结果与结论：人羊膜匀浆上清液的总蛋白浓度为675 mg/L,表皮生长因子、碱性成纤维生长因子和血管内皮生长因子浓度分别为(470.625±2.546),(4.121±0.026)和(0.172±0.002) ng/L。在培养第1-7天,10%和15%人羊膜匀浆上清液组的增殖率大于20%和25%人羊膜匀浆上清液组(P < 0.05);10%、15%人羊膜匀浆上清液组显示出促进细胞增殖的作用,而20%、25%人羊膜匀浆上清液组显示出抑制细胞增殖的作用;各实验组的细胞活力与对照组接近(P > 0.05)。提示人羊膜匀浆上清液低浓度时(10%和15%)具有促进RSC96增殖作用,高浓度时(20%和25%)抑制RSC96增殖。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

白介素-35在炎症及自身免疫性疾病中的免疫学效应及临床意义

白介素（IL）-35是新近发现的IL-12家族抑制性细胞因子,在T细胞、B细胞免疫应答及传播性免疫耐受过程中发挥重要调控作用。目前尚未发现IL-35具备促炎效应。新近,炎症及自身免疫性疾病的相关基础及临床研究揭示了IL-35的病理生理学意义及其对疾病发生、发展及转归的重大影响。IL-35有望成为炎症及自身免疫性疾病诊断、监测及判断预后的重要免疫学指标,也是潜在的调控、治疗靶点。对IL-35表达及调控的深入研究,将为临床诊治炎症及自身免疫性疾病提供崭新的思路及方向。     

贯穿缝扎联合打孔法构建兔耳难愈性创面模型*

背景：以往制作的兔耳难愈创面模型仅局限于单纯的缺血模型,缺血淤血模型少见。 目的：建立一种方法简单、效果确实的兔耳难愈性创面模型。 方法：将40个兔耳分为两组：实验组贯穿缝扎兔耳根部背腹侧中央、头侧所有动、静脉,缝扎后第10天在耳背侧用活检打孔器制作3个深达软骨面的圆形创面。对照组仅制作与实验组完全相同的3个圆形创面。 结果与结论：实验组兔耳缝扎后立即呈现紫黑色,第10,20,30天为淡紫黑色、紫色、淡紫色,说明贯穿缝扎联合打孔法构建的难愈创面的缺血、淤血状态持久、稳定。实验组创面肉芽组织生长、表皮化时间及创面愈合时间均较长于对照组均延迟(P < 0.01),血管内皮细胞生长因子表达明显低于对照组(P < 0.01)。说明贯穿缝扎联合打孔法制作的兔耳难愈性创面模型方法简单、效果确实可靠,可作为缺血淤血因素所致难愈性创面修复的实验研究模型。     

调压调温全自动气烫仪的研制与应用

理想的动物烫伤创面模型在创面深度、大小、形状及均匀性上应是一致的,但现有烫伤设备~([1-5])的性能难以完全达到此要求.为此我们研制了一种调压调温全自动气烫仪,用于创面模型制作,效果较好.现介绍如下.     

曲尼司特减轻松木屑烟雾吸入性损伤大鼠肺组织胶原沉积的研究

目的观察曲尼司特对松木屑烟雾致大鼠肺组织损伤后胶原蛋白合成的影响,为曲尼司特防治松木屑烟雾吸入性损伤致肺组织胶原沉积乃至纤维化提供可行性。 方法将72只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为正常组、对照组、治疗组、盐水组,每组18只。对照组、治疗组和盐水组大鼠吸入松木屑烟雾共15 min(每间隔5 min吸烟1次,每次5 min,共吸烟雾3次),对照组不给予任何治疗,治疗组和盐水组于吸入烟雾后6 h,分别每天经腹腔注射1次曲尼司特(200 mg·kg^-1)和0.9%氯化钠溶液0.5 mL,正常组大鼠不予致伤、治疗。伤后7、14、28 d,各组取肺组织行苏木精-伊红、Masson染色,并行组织病理评分和计算胶原沉积率(CVF),碱水解法测定肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量,对数据行单因素方差分析、t检验。 结果(1)苏木精-伊红染色：松木屑烟致伤后7 d,对照组和盐水组大鼠肺组织中均可见不同程度炎性细胞浸润、充血、肺间质水肿,随着观察时间的延长,肺组织炎性细胞浸润增加、出血增多,肺间隔逐渐增宽。伤后7、14、28 d,治疗组肺组织病理评分[(2.60±0.63)、(4.05±0.20)、(3.80±0.23)分]分别低于对照组[(3.20±0.28)、(5.00±0.40)、(8.48±0.51)分]和盐水组[(3.20±0.16)、(5.20±0.33)、(8.20±0.52)分],差异均有统计学意义(t＝-1.732、-1.837、-4.025、-5.745、-16.673、-15.556, P<0.05),除伤后7 d,治疗组与正常组[(2.20±0.23)分]比较差异无统计学意义(t＝1.188, P>0.05),伤后14、28 d,治疗组均高于正常组,差异有统计学意义(t＝12.438、9.798, P<0.05);(2)胶原沉积：伤后7 d,对照组和盐水组大鼠小气道周围胶原纤维沉积增加,随着观察时间的延长,肺间质逐渐出现大面积的胶原沉积。伤后7、14、28 d,治疗组的CVF[(5.22±0.26)%、(6.66±0.59)%、(4.86±0.44)%]均低于对照组[(6.21±0.31)%、(11.64±0.39)%、(36.17±2.24)%]和盐水组[(6.20±0.56)%、(11.11±1.01)%、(33.72±4.41)%],差异均有统计学意义(t＝-4.893、-3.170、-8.476、-10.184、-27.491、-13.014,P<0.05),且除伤后28 d,治疗组CVF与正常组[(4.54±0.23)%]差异无统计学意义(t＝3.860, P>0.05),伤后7、14 d的治疗组均高于正常组[(4.54±0.23)%、(4.54±0.23)%],差异均有统计学意义(t＝1.275、6.646, P<0.05);(3)HYP表达：伤后7、14 d,治疗组[(0.77±0.01)、(0.97±0.01) μg/mL]、对照组[(0.93±0.01)、(1.27±0.18) μg/mL]和盐水组[(0.92±0.01)、(1.23±0.16) μg/mL]大鼠肺组织中HYP表达均高于正常组[(0.66±0.06)、(0.66±0.06)μg/mL],差异均有统计学意义(t＝3.619、9.134、8.918、10.739、6.309、6.652,P<0.05),且伤后14、28 d治疗组[(0.97±0.01)、(0.83±0.02) μg/mL]显著低于对照组[(1.27±0.18)、(1.43±0.16) μg/mL]和盐水组[(1.23±0.16)、(1.42±0.15) μg/mL],差异均有统计学意义(t＝-3.232、-3.230、-7.699、-7.913,P<0.05),伤后28 d,治疗组[(0.83±0.02) μg/mL]与正常组[(0.66±0.06) μg/mL]低于对照组[(1.43±0.16) μg/mL]和盐水组[(1.42±0.15) μg/mL],差异均有统计学意义[(t＝-7.699、-7.913、-9.326、-9.564, P<0.05),且治疗组与正常组间比较差异无统计学意义(t＝5.720, P>0.05)。 结论曲尼司特减轻了松木屑烟雾吸入性大鼠肺组织病理损伤程度,减少胶原沉积和HYP的表达。     

成功救治大面积烧伤合并急性肾损伤、高钠血症1例

急性肾损伤、高钠血症是大面积烧伤病人常见并发症,其死亡率高。作者科室通过应用持续肾脏替代治疗、手术切痂等综合治疗手段,成功救治1例大面积烧伤合并急性肾损伤、高钠血症患者,现将诊疗经过分析总结如下。     

康肤霜治疗恶性肿瘤急性放射性皮肤损伤的临床研究

目的：观察康肤霜治疗恶性肿瘤急性放射皮肤损伤的疗效。方法：对2007年8月-2010年10月我院60例Ⅱ级以上放射性皮肤损伤恶性肿瘤患者,随机分为两组,治疗组30例用我院烧伤科自制的康肤霜治疗;对照组30例用羊毛脂软膏治疗,比较两组患者放射皮肤损伤治疗效果、愈合时间及体力状况。结果：60例患者均可进行结果分析。治疗组、对照组总有效率分别为100.0%（30/30）、80.0%（24/30）,两组差别有统计学意义（P〈0.05）。两组平均愈合时间分别为治疗组（7.5±1.7）d,对照组（9.6±3.5）d,治疗组皮肤愈合时间明显比对照组短（P〈0.01）,生存质量高于对照组。结论：康肤霜可有效促进急性放射性皮肤损伤的愈合,是一种经济有效的方法。     

康肤霜促进兔深Ⅱ度烫伤创面愈合的实验研究

为加速深Ⅱ度烧伤创面愈合 ,笔者单位自行研制了复方制剂康肤霜 (由锌、冰片、洗必泰、水溶性基质、少量维生素A、维生素E按一定比例配制成的水包油型白色霜剂 ) ,以新西兰大白兔为烫伤模型 ,分别用康肤霜、重组人表皮生长因子凝胶剂 (桂林华若威生物有限公司 )、紫花烧伤膏 (山东华润制药有限公司 ,主要成分为紫花、花椒、地黄、冰片、黄莲 )、等渗盐水进行对比治疗 ,观察康肤霜疗效。一、材料与方法1.实验分组 :新西兰大白兔 16只 ,体重 2 5 0 0～ 30 0 0g。麻醉后于每只兔脊柱两侧对称烫伤共 8个直径 2cm的圆形创面 (经预试验及病理检查…     

人羊膜匀浆上清液对脂多糖致伤的大鼠肺微血管内皮细胞增殖及分泌炎症因子的影响

目的：：探讨人羊膜匀浆上清液(hAHS)对脂多糖(LPS)致伤的大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVECs)增殖及其分泌促炎因子的影响。方法：用新鲜人羊膜制备 hAHS,用考马斯亮蓝法和 ELISA 法分别测定 hAHS中总蛋白和表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、白介素-4(IL-4)、IL-10、血管生成素-1(Ang-1)、人β-防御素2(HBD2)的含量。MTT 法检测不同体积分数 hAHS(0、10%、15%、20%、25%)作用于 RPMVECs后细胞增殖活性的变化,确定 hAHS 促进 RPMVECs 增殖的最佳浓度。根据共培养条件不同,将 RPMVECs随机分为4组：N组(10%FBS+DMEM/F12),A组(10%FBS+DMEM/F12+15%hAHS),B组(10%FBS+DMEM/F12+LPS)和 C组(10%FBS+DMEM/F12+15%hAHS+LPS)。各组细胞在干预后0、12、24、48、72 h用 MTT法测定吸光度值(A值),并分别于培养6、8、10、12、24 h时用 ELISA法测定RPMVECs培养上清液中TNF-α、IL-6、IL-8的含量。结果：hAHS中总蛋白浓度为(725.125±12.625)mg/L,其中 EGF、bFGF、VEGF、IL-4、IL-10、Ang-1、HBD2的浓度分别为(504.785±4.665)、(4.426±0.138)、(0.185±0.006)、(25.650±4.104)、(13.733±2.197)、(15.561±0.496)和(4.763±0.714)ng/L。hAHS 的体积分数在10%~20%时均具有促进 RPMVECs增殖的作用且以15%hAHS培养后第7、9天的增殖率最佳,而25%hAHS在第7、9、11天使 RPMVECs增殖率小于0%hAHS组(P<0.05)。A组48和72 h细胞增殖活性较 N组显著增加,B组24、48和72 h的增殖活性较 N 组显著降低;C组24、48和72h的增殖活性较 B组显著升高(P<0.05)。ELISA结果显示,B组各时间点的IL-6和TNF-α的含量以及8、10、12和24 h的IL-8含量均显著高于N组(P<0.05);C组10和12 h的IL-6含量,8、10、12和24 h的IL-8含量及各时间点的TNF-α含量均显著低于B组(P<0.05)。结论：hAHS含有促进组织修复、调节免疫反应、降低血管通透性及杀伤致病微生物的多种生长因子、细胞因子,对 LPS致伤的 RPMVECs增殖具有促进作用,并减少致伤后炎症因子分泌。     

不同深度兔耳烫伤创面模型的研究

目的建立兔耳不同深度烫伤创面模型。方法以改装的冷热温喷雾机作为烫伤装置,在兔每只耳背侧中段区域内的中线两边设计对称的4个直径1.5 cm烫伤创面,烫伤时间分别为2,3,4,5,6 s,每一时间点6个创面。观察烫伤区变化,伤后24h取标本行组织病理检查并测量烫伤深度。结果各烫伤创面呈圆形且边界清楚,制作浅Ⅱ度、深Ⅱ度、Ⅲ度、Ⅳ度创面的烫伤时间分别为2,3,4,5 s,5 s以上均达软骨,烫伤深度随烫伤时间延长而加深。结论制作本模型的烫伤设备简单,操作便捷、安全,烫伤创面形状、大小一致,创面深度准确、稳定,制作的兔耳烫伤模型可用于创面修复方面的研究。