肝细胞生长因子在正常和轻型急性胰腺炎小鼠的药动学研究

目的:研究肝细胞生长因子(HGF)在轻型急性胰腺炎(MAP)小鼠的药动学及胰腺分布。方法:于正常小鼠背部皮下注射125I-HGF80ng,注射后1、2、3、4、5、10、15、30、60、90、120、180、240、300min分别取血清及胰腺组织,测定HGF含量,计算HGF半减期;小鼠分为对照组和模型组,以雨蛙肽100μg/kg体重腹腔注射复制MAP模型,125I-HGF给药后30、60、120、180、360min测定血清及胰腺组织HGF含量,计算HGF半减期。结果:HGF在正常小鼠血液及胰腺组织中呈先快后慢的代谢特征,后期半减期约为130min;复制MAP后HGF在模型组小鼠血液中的后期半减期约为195min,较对照组延长(P<0.01);模型组胰腺HGF含量高于对照组(P<0.01)。结论:HGF在正常小鼠血液及胰腺中均呈先快后慢的代谢特征;MAP后HGF半减期延长,胰腺中的HGF含量增高。     

应用基因芯片研究康莱特对人胰腺癌Patu-8988细胞的凋亡诱导作用

目的 探讨康莱特注射液诱导人胰腺癌细胞(Patu-8988)凋亡过程中相关基因表达的变化。方法 通过流式细胞仪Annexin V／PI双染法研究康莱特诱导Patu-8988细胞凋亡的过程，应用基因芯片技术分析加药前后凋亡相关基因的表达差异，并以Western印迹对部分基因蛋白产物表达进行验证。结果康莱特对Patu-8988细胞的凋亡诱导作用呈时间依赖性。康莱特作用24h后，在96条有关凋亡的目的基因中共有17条基因表达发生大于3倍的显著变化，其中表达上调基因12条，下调基因5条。Western印迹表明P53、Bcl-2、Bax、Caspase-3等蛋白表达改变与基因芯片结果一致，同时Caspase-3底物多聚ADP核糖多聚酶被降解。结论 康莱特可使Patu-8988细胞中多个凋亡相关基因的表达发生改变，进一步揭示了其诱导胰腺癌细胞凋亡的作用机制。     

树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞对胃癌细胞杀伤作用

目的探讨树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞对胃癌细胞的杀伤作用。方法采用胃癌患者自身血液中单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),经体外诱导分别扩增出DC和CIK细胞,二者共同培养后,利用MTT法检测DC细胞联合CIK细胞体外杀伤人胃癌细胞株(MNK-45、MNK-28、SG-7901)的活性。结果DC与CIK细胞共培养后得到的细胞群高表达CD3 CD56 ,平均值达到(56.74±7.63)%。通过彼此相互作用诱导出的细胞群体对胃癌细胞株MNK-45、MNK-28、SG-7901有杀伤作用,且杀伤活性随着效靶比的增加而增强。结论DC与CIK细胞共培养后有很强的增殖能力,对胃癌细胞具有杀伤活性,且其杀伤作用与胃癌细胞类型无相关性。     

羟基喜树碱诱导胃癌细胞凋亡的实验研究

目的 研究羟基喜树碱(HCPT)诱导胃癌细胞的凋亡作用,探讨其治疗胃癌的作用机制.方法 应用MTT、TUNEL染色、流式细胞仪技术研究HCPT对胃癌细胞SGC-7901、MKN-45、MKN-28的细胞毒和诱导凋亡的作用.结果 HCPT具有很强的细胞毒作用,对三株不同分化程度胃癌细胞的SGC-7901(中分化)、MKN-45(低分化)、MKN-28(6高分化)的IC50为0.008～0.012mg/ml.HCPT作用于细胞后,可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化:细胞核固缩,染色质凝集,呈新月型紧贴于核膜周边,核碎裂,染色质片断化,凋亡小体形成等.流式细胞仪DNA直方图上出现典型的亚二倍体"凋亡峰".流式细胞仪计数显示,HCPT诱导胃癌细胞SGC-7901、MKN-45、MKN-28的凋亡率分别为21.88%、12.35%、30.26%.HCPT诱导胃癌细胞的凋亡率与胃癌的分化程度有关.TDT染色法显示,细胞凋亡指数在12.35%～30.26%之间.HCPT的作用表现为细胞周期特异性,HCPT主要作用于细胞周期的S期,抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡,使细胞阻滞于S期.结论 HCPT对胃癌细胞具有很强的细胞毒作用,诱导凋亡是其主要作用机制之一.     

大鼠重症急性胰腺炎对免疫机制及TAI的影响

目的研究重症急性胰腺炎(SAP)时细胞免疫功能的变化并通过给予外源性胸腺素α1(TA1),观察能否减轻SAP的严重程度并初步探讨其作用机制.方法♂SD大鼠54只随机分为对照组、SAP组和TA1治疗组.SAP模型采用50 g/L牛黄胆酸钠1 mL/kg胰胆管逆行穿刺注射建立,治疗组造模成功后立即皮下注射TA1(100μg/kg),对照组仅给予开腹手术.三组大鼠分别在造模后3,6,12 h处死,收集外周血与胰腺标本.观察TA1对血清淀粉酶、TNF-α及胰腺组织炎症评分的影响;同时应用流式细胞术观察外周血CD3,CD4+,CD8+T细胞的变化.结果SAP组与治疗组各时间点血清淀粉酶、TNF-α水平及胰腺组织炎症评分均显著高于对照组(P＜0.01);12 h治疗组与SAP组相比,TNF-α水平明显下降,胰腺组织炎症评分显著改善(P＜0.01).SAP组3,6 h外周血CD3,CD4+T细胞百分率较对照组明显升高(P＜0.01);但在12 h则明显低于对照组(P＜0.01);治疗组3 h外周血CD3,CD4+T细胞百分率较对照组明显升高(P＜0.01),但6,1 2 h与对照组没有明显的差异.结论SAP时存在细胞免疫功能的低下,外源性TA1可能通过调节CD3,CD4T细胞分化从而减轻胰腺炎症.     

柴胡桂枝汤抑制3T3细胞的成纤维化作用研究

目的传统中药柴胡桂枝汤以往常被临床用作抗炎药来治疗慢性胰腺炎患者,但其具体机制尚未明确.     

纤维桩连接自体牙冠过渡性修复年轻恒前牙冠折效果观察

目的 比较年轻恒前牙冠折后使用纤维桩连接粘结和复合树脂粘结修复的临床疗效。 方法 68例(83颗牙)外伤折断片保留完整的上颌恒前牙根据折断位置（中1/3或颈1/3处）和自体断冠再接方式（纤维桩或复合树脂）进行分组,临床随诊观察6个月至2年以上。 结果 两组1年内成功率差异无统计学意义(P＞0.05)。纤维桩粘结组2年的成功率为92.86%,高于常规粘结组的73.91%,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05)。纤维桩粘结组2年以上的成功率为84.62%,高于常规粘结组的53.33%,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05)。纤维桩粘结组中1/3折断组再接成功率高于颈1/3折断组,但两者比较差异无统计学意义。结论 使用纤维桩连接自体牙冠过渡性修复年轻恒前牙冠,疗效肯定,又不影响后期的永久修复,是一种良好的过渡性修复方法。     

胃癌细胞固有荧光特征初探

目的:探讨正常胃上皮细胞和不同分化程度胃癌细胞的细胞内固有荧光特征性生物物质来源。方法:通过激光共聚焦显微镜比较2种不同分化程度的胃癌细胞株和正常胃上皮细胞株在波长500～530nm的固有荧光表现;以罗丹明123(Rodamine123)对细胞内线粒体进行染色,观察细胞固有荧光的位置分布;采用氧化呼吸链阻断剂羰基氰化物间氯苯腙(CCCP)阻断细胞氧化呼吸反应,测定细胞内固有荧光强度变化。结果:波长500～530nm的细胞固有荧光主要来自于细胞线粒体内,不同分化程度的胃癌细胞株荧光强度都明显弱于正常上皮细胞株。CCCP作用于细胞可提高该波长范围细胞内的荧光强度。结论:细胞在500～530nm波段固有荧光减弱的特征可能有助于诊断胃癌,该固有荧光的生物物质来源可能是参与线粒体内氧化呼吸作用的重要辅酶还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)。     

TXA_2合成抑制对动脉粥样硬化形成的影响

自Hamberg和Moncada发现血小板和血管壁前列腺素代谢可产生两种作用完全相反的物质—TXA_2和PGI_2后,许多学者注意到它们在动脉粥样硬化(AS)形成中的作用,认为AS的发生是由于