斑蝥素诱导人胰腺癌细胞凋亡的实验研究

目的 探讨斑蝥素（Cantharidin）对人胰腺癌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法采用MTT法观察斑蝥素对人胰腺癌细胞株SW1990细胞增殖的抑制作用。采用Hoechst33258染色、TUNNEL染色、流式细胞术检测细胞凋亡改变，并以RT—PCR和Westernblot检测凋亡调节基因p53和Bcl-2、Bax的表达。结果 5mol／L斑蝥素能明显抑制人胰腺癌SW1990细胞的生长，呈现凋亡特征。RT—PCR和Westernblot检测可见Bax、p53基因表达显著增加，而Bcl—2基因表达减少。结论 斑蝥素能诱导人胰腺癌细胞凋亡，其作用可能与上调p53、Bax基因和下调Bcl-2基因有关。     

阻断Nav1.8表达对大鼠内脏高敏感性影响的研究

目的通过阻断Nav1．8钠通道的表达研究其对内脏高敏感性的影响。方法以新生大鼠直肠内气囊扩张法制成动物模型，连续3d，每天2次鞘内注射Nav1．8钠通道反义寡核苷酸以阻断Nav1．8的表达，并以行为学腹部收缩反射（AWR）评分和脊髓c-Fos的表达为指标观察大鼠内脏高敏感的改变情况。结果鞘内注射Nav1．8钠通道反义寡核苷酸使大鼠Nav1．8 mRNA的表达下降。行为学检测发现造模组大鼠AWR评分下降，脊髓c-Fos样免疫反应（c-FLI）阳性细胞总数减少，主要是1区和3区的细胞数减少，而注射错配寡核苷酸组无明显改变。对照组则不论注射错配寡核苷酸或反义寡核苷酸AWR评分和脊髓c—FLI阳性细胞数均无明显改变。结论鞘内注射反义寡核苷酸阻断Nav1．8的表达，可以降低造模大鼠内脏高敏感状态。     

天花粉蛋白抗胃癌作用研究-72hr体外细胞毒作用和负人胃癌裸鼠体内抑瘤试验

目的：研究天花粉蛋白（Ｔｒｉｃｈｏｓａｎｔｈｉｎ，ＴＣＳ）体外对胃癌细胞毒作用和其在负人胃癌裸鼠体内抑瘤试验：方法：以不同剂量ＴＣＳ加入到不同分化程度的胃癌细胞中，在９６孔微孔板培养７２小时后以ＭＴＴ比色法测定其杀伤率。用ＳＧＣ－７９０１瘤移植于裸鼠肾包膜下，分别用ＴＣＳ，生理盐水（ＮＳ）和丝裂霉素（ＭＭＣ）治疗后观察移植瘤生长情况。结果：ＭＫＮ－２８，ＭＫＮ－４５，ＳＧＣ－７９０１于ＴＣＳ终浓度为１．０ｍｇ／ｍｌ时杀伤率均达７３％以上，低剂量ＴＣＳ与ＭＭＣ联用呈加成杀伤癌细胞作用。１．０ｍｇ／ｋｇＴＣＳ剂量在负ＳＧＣ－７９０１瘤鼠体内抑瘤率为５９．９％（Ｐ＜０．００１），且与等剂量ＭＭＣ抑瘤率相当；ＴＣＳ最低有效抑瘤剂量为０．５ｍｇ／ｋｇ。结论：ＴＣＳ在体内外对胃癌细胞抗癌作用于本实验得到证实，为胃癌的治疗预期可带来突破性进展     

腺病毒介导XAFl基因诱导胰腺癌细胞株SW1990凋亡的实验研究

X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)是一种潜在的肿瘤抑制基因,能拮抗XIAP的抗凋亡作用.目的:探讨Ad5/F35腺病毒介导XAF1基因诱导胰腺癌细胞株SW1990凋亡的作用及其可能机制.方法:构建重组腺病毒Ad5/F35-XAF1和对照病毒Ad5/F35-Null,感染胰腺癌细胞株SW1990.分别以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法检测XAF1 mRNA和蛋白表达,以Annexin V-FITC/PI双染法和原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡率,以蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Caspase-3、PARP、Caspase-8、Caspase-9和细胞色素C的表达.结果:Ad5/F35-XAF1感染SW1990细胞后,XAFI mRNA和蛋白表达均显著增高,并能诱导细胞凋亡,同时伴有Caspase-3、PARP、Caspase-8和Caspase-9活化增强以及细胞色素C蛋白表达增加.结论:重组腺病毒Ad5/F35-XAF1感染胰腺癌细胞株SW1990后,能明显诱导细胞凋亡,其机制可能与XAF1激活了死亡受体途径和线粒体凋亡途径有关.