苦参碱联合5-氟尿嘧啶抑制胃癌细胞株增殖作用的研究

经典化疗因药物不良反应大而影响其疗效，我国一些传统中药因其独特的抗肿瘤效应及较少的不良反应，成为抗肿瘤药物开发的一个热点。中西药联合化疗将是今后肿瘤化疗的发展方向之一。本研究采取中药提取成分苦参碱和5-氟尿嘧啶(5-Fu)联用，体外作用于胃癌细胞株SGC-7901，观察联合用药的效果。     

双嘧达莫对胃癌多药耐药的逆转实验研究

目的 研究双嘧达莫对胃癌细胞多耐药的逆转作用。方法 逐渐递增长春新碱浓度诱导胃癌细胞株ＳＧＣ７９０１产生多药耐性（ＳＧＣ７９０１ｒ）。以双嘧达莫为逆转剂，ＭＴＴ法测定抗癌药对肿瘤药对肿瘤细胞的杀伤作用；激光全聚焦镜测定肿瘤细胞内柔红霉素和钙离子荧光强度。结果 胃癌ＸＧＣ７９０１ｒ细胞对长春新碱、柔红霉素、丝裂霉素及顺铂的耐药性分别的ＳＧＣ７９０１ｒ细胞的４．４６倍、１４．９５倍、２１．２０倍和１６     

HGF减轻小鼠轻型急性胰腺炎及其机制的初步探讨

目的肝细胞生长因子(HGF)可减轻雨蛙肽诱导的大鼠轻型急性胰腺炎,然而其作用机制不甚明了,HGF对小鼠轻型急性胰腺炎的作用亦未见报道.本研究即试图在这两方面作初步探讨.     

耐药胃癌裸鼠移植瘤中血管生成与耐药机制的关系

目的探讨氟尿嘧啶耐药的人胃癌细胞裸鼠移植瘤血管生成与肿瘤耐药产生机制的关系。 方法建立裸鼠移植瘤模型;逆转录多聚酶链反应(RT—PCR)法检测血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达;免疫组织化学方法检测裸鼠移植瘤VEGF蛋白的表达;免疫组织化学方法进行血管内皮细胞染色,计算肿瘤组织内微血管密度。 结果成功建立耐药和亲本两组裸鼠移植瘤。与其亲本细胞裸鼠移植瘤比较,耐药细胞裸鼠移植瘤组织VEGFmRNA和蛋白质表达以及微血管密度都显著减少(P<0.05)。 结论胃癌的耐药机制可能与血管生成减少有关。     

Vasostatin基因对胰腺癌血管生成的抑制作用

目的研究 vasostatin 对体内、外血管生成的作用,探讨其对胰腺癌生长抑制的作用机制。方法应用小管形成实验研究 vasostatin 对体外血管生成的影响,鸡胚绒毛尿囊膜实验观察 vasostatin 对体内血管生成的作用。复制人胰腺癌裸鼠移植瘤模型,瘤内注射10~8pfu Ad-vasostatin、10~8pfu Ad-lacZ 及缓冲液,观察移植瘤生长曲线及瘤重。应用免疫组化法检测肿瘤微血管密度(MVD),研究 vasostatin 对胰腺癌移植瘤血管生成的影响。结果体外实验中,Ad-vasostatin 组细胞数较少,细胞排列连续性差,可见条索状细胞链,但中空闭合管状结构缺如。鸡胚绒毛尿囊膜实验提示 Ad-vasostatin 组的血管纹理欠清晰,小血管分布凌乱、稀疏,形态不规整,小血管分支少,多数在第二、第三级,极少数达到第四级。肿瘤生长3周后,Ad-vasostatin 组移植瘤瘤重(112mg±78mg)显著小于 Ad-laeZ 组(322mg±148mg)(P<0.05)及缓冲液组(468mg±160mg)(P<0.01)。免疫组化结果提示,Ad-vasostatin 组肿瘤组织 MVD[(76.2±16.8)个/mm~2]显著低于 Ad-lacZ 组[(144.0±16.6)个/mm~2]与缓冲液组[(147.0±22.7)个/mm~2)(P<0.05)。结论腺病毒介导的 vasostatin 基因可显著抑制体内、外血管生成,vasostatin 基因对人胰腺癌裸鼠移植瘤血管生成的抑制作用是其抑制人胰腺癌裸鼠移植瘤生长的重要原因。     

阻断Nav1.8表达对大鼠内脏高敏感性影响的研究

目的通过阻断Nav1．8钠通道的表达研究其对内脏高敏感性的影响。方法以新生大鼠直肠内气囊扩张法制成动物模型，连续3d，每天2次鞘内注射Nav1．8钠通道反义寡核苷酸以阻断Nav1．8的表达，并以行为学腹部收缩反射（AWR）评分和脊髓c-Fos的表达为指标观察大鼠内脏高敏感的改变情况。结果鞘内注射Nav1．8钠通道反义寡核苷酸使大鼠Nav1．8 mRNA的表达下降。行为学检测发现造模组大鼠AWR评分下降，脊髓c-Fos样免疫反应（c-FLI）阳性细胞总数减少，主要是1区和3区的细胞数减少，而注射错配寡核苷酸组无明显改变。对照组则不论注射错配寡核苷酸或反义寡核苷酸AWR评分和脊髓c—FLI阳性细胞数均无明显改变。结论鞘内注射反义寡核苷酸阻断Nav1．8的表达，可以降低造模大鼠内脏高敏感状态。     

天花粉蛋白抗胃癌作用研究-72hr体外细胞毒作用和负人胃癌裸鼠体内抑瘤试验

目的：研究天花粉蛋白（Ｔｒｉｃｈｏｓａｎｔｈｉｎ，ＴＣＳ）体外对胃癌细胞毒作用和其在负人胃癌裸鼠体内抑瘤试验：方法：以不同剂量ＴＣＳ加入到不同分化程度的胃癌细胞中，在９６孔微孔板培养７２小时后以ＭＴＴ比色法测定其杀伤率。用ＳＧＣ－７９０１瘤移植于裸鼠肾包膜下，分别用ＴＣＳ，生理盐水（ＮＳ）和丝裂霉素（ＭＭＣ）治疗后观察移植瘤生长情况。结果：ＭＫＮ－２８，ＭＫＮ－４５，ＳＧＣ－７９０１于ＴＣＳ终浓度为１．０ｍｇ／ｍｌ时杀伤率均达７３％以上，低剂量ＴＣＳ与ＭＭＣ联用呈加成杀伤癌细胞作用。１．０ｍｇ／ｋｇＴＣＳ剂量在负ＳＧＣ－７９０１瘤鼠体内抑瘤率为５９．９％（Ｐ＜０．００１），且与等剂量ＭＭＣ抑瘤率相当；ＴＣＳ最低有效抑瘤剂量为０．５ｍｇ／ｋｇ。结论：ＴＣＳ在体内外对胃癌细胞抗癌作用于本实验得到证实，为胃癌的治疗预期可带来突破性进展     

全反式维甲酸对多种胰腺癌细胞的诱导凋亡作用

目的 观察全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)能否诱导人胰腺癌细胞的凋亡.方法 分别将人胰腺癌细胞SW1990、PaTu8988、BxPC3和ATRA共同孵育后,用MTT法检测细胞活性,分别用流式细胞仪检测、TUNEL和透射电镜观察细胞的凋亡.结果 MTT法显示,ATRA对3株人胰腺癌细胞株SW1990、PaTu8988和BxPC3的生长均有明显的抑制作用(P ＜ 0.05).流式细胞仪的检测、TUNEL和电镜的观察结果均证实ATRA诱导后,3株胰腺癌细胞株凋亡率均高于对照(P ＜ 0.01),并随诱导时间延长而增加.结论 ATRA在体外能显著抑制多株胰腺癌细胞株的生长,并促进其凋亡.     

人乙酰胆碱酯酶基因转染增强全反式维甲酸诱导胰腺癌细胞凋亡

目的探讨转染人乙酰胆碱酯酶(AChE)基因对全反式维甲酸诱导胰腺癌细胞凋亡的影响。方法应用含人AChE基因的真核表达质粒pcDNA3/AChE和绿色荧光蛋白(GFP)真核表达质粒pcDNA3/GFP,以脂质体介导上述两种质粒DNA对人胰腺癌细胞株Patu8988进行瞬时转染,转染后的细胞经全反式维甲酸(ATRA,1μmol/L)分别处理24h及48h,流式细胞仪分别检测AnnexinV染色后早期细胞凋亡率及转染效率,以细胞化学染色法(KarnovskyRoots染色)检测AChE表达。结果流式细胞仪测定GFP显示转染效率达(45.50±3.84)%,人AChE基因转染后联合ATRA治疗凋亡比例增加,转染前后分别为(14.26±1.16)%/(42.84±7.21)%(24h,P<0.01)和(18.08±0.75)%/(56.29±2.54)%(48h,P<0.01)。细胞化学染色法可见AChE阳性细胞,染色聚集于胞核部位。结论胰腺癌细胞AChE基因的高表达可增加细胞对ATRA诱导凋亡的敏感性。