人类真核翻译延长因子1A2在胰腺癌的表达研究

目的研究人类真核翻译延长因子1A2(EEF1A2)及其表达产物eEF1A2蛋白在人胰腺癌细胞株和组织标本中的表达。方法收集人胰腺导管腺癌病理标本15例,人正常胰腺组织标本8例。运用RT-PCR、Realtime-PCR、Western blot以及免疫组化等技术检测人胰腺癌细胞株SW1990、Bx-PC3、PaTu8988和胰腺癌组织标本中EEF1A2的表达水平。结果人胰腺腺癌细胞株PaTu8988、SW1990和BxPC3中,EEF1A2mRNA和eEF1A2蛋白表达水平与正常胰腺组织相比,均明显上调。8例癌旁正常胰腺组织标本中仅1例胰腺导管细胞内eEF1A2呈弱阳性表达,而15例胰腺导管腺癌病理标本中,胰腺导管腺癌细胞内eEF1A2均呈中至强阳性表达,两者比较有显著差异(P<0.05)。结论EEF1A2在胰腺癌中呈异常高表达。EEF1A2的致癌机制可能与加速蛋白质翻译速度、抑制凋亡以及改变细胞骨架有关。EEF1A2有可能成为胰腺癌一个有效的诊断标志物和基因治疗靶点。     

重症急性胰腺炎肝血流动力学改变及活化蛋白C干预的影响

目的 通过CT灌注成像技术探讨SAP时肝脏的血流动力学表现,以及活化蛋白C(activated protein C,APC)对其的治疗作用.方法 SD雄性大鼠分为对照组、ANP组、APC 10μg/kg体重、50 μg/kg体重治疗组.于制模后1 h、6 h、16 h、24 h行肝脏动态CT灌注成像检查,测定局部肝血流量(BF)、血容量(BV)、平均通过时间(MTT)、表面通透系数(PS)和肝动脉指数(HAF),24 h处死动物行肝脏和胰腺病理学检查.结果 与对照组比较,ANP组BF、BV值降低,MTT值延长,PS增加,HAF值下降,以24 h点最为显著(P＜0.01).APC治疗组与ANP组比较,上述指标改善,以APC 50 μg/kg体重治疗组更明显(P＜0.01或0.05),同时肝脏组织损伤分级及胰腺组织病理分值明显降低(P＜0.01).结论 ANP大鼠肝脏存在明显的血液低灌注状态,而APC的应用可改善异常的血流动力学.     

薏苡仁提取液对人胰腺癌细胞凋亡和超微结构的影响

背景:薏苡仁提取液目前已广泛应用于临床抗肿瘤治疗,但至今尚未见其单独应用于胰腺癌的报道.目的:观察薏苡仁提取液对人胰腺癌细胞凋亡和超微结构的影响,以探索胰腺癌治疗的新途径.方法:以不同浓度薏苡仁提取液处理人胰腺癌细胞系PaTu-8988后,分别通过光镜观察、Hoechst 33258荧光染色、末端脱氧核苷酸转移酶原位标记(TUNEL法)和流式细胞术检测细胞凋亡,应用透射电镜观察细胞超微结构的变化.结果:经10μl/ml和20μl/ml薏苡仁提取液作用72 h后,PaTu-8988细胞的增殖能力明显下降,其作用呈剂量依赖性;光镜观察显示凋亡细胞变圆、体积缩小,Hoechst 33258荧光强染,TUNEL标记阳性.20μl/ml薏苡仁提取液作用24、48和72 h后,流式细胞仪DNA直方图上出现亚二倍体凋亡峰,细胞凋亡率呈时间依赖性,分别为7.1%±.6%、113%±0.3%和15.1%±2.9%,显著高于对照组的2.4%±1.1%(P<0.01).透射电镜观察显示,凋亡早期主要是线粒体结构的改变,后期则出现典型的凋亡征象,如核固缩、染色质凝集靠近核膜和凋亡小体形成.结论:薏苡仁提取液可诱导人胰腺癌细胞凋亡,其作用呈剂量和时间依赖性,线粒体可能在早期细胞凋亡中起重要作用.     

苦参碱联合5-FU诱导人胃癌细胞凋亡的机制

目的探讨苦参碱和5-氟尿嘧啶(5-FU)联用诱导人胃癌细胞SGC7901凋亡的机制。方法1.0mg/mL苦参碱联合20mg/L5FU作用于SGC7901细胞48h,RTPCR和免疫细胞化学检测bcl-2、bax、Fas、Fas-L的mRNA和蛋白表达;免疫细胞化学、酶联免疫吸附试验和Westernblot检测活性caspase3的表达,并与空白对照组和单独苦参碱或5-FU用药组比较。结果联合用药组bcl2下调,bax、Fas上调,与空白对照组有显著差异(P<0.05),与单独用药组相比无显著性差异(P>0.05);联合用药组活性caspase-3表达显著增高,与各组比较均有显著差异(P<0.01)。结论苦参碱和5FU联用通过上调bax、下调bcl2/Fax,显著提高活性caspase3的表达,从而协同诱导胃癌细胞SGC7901的凋亡。     

XAF1在人肝癌组织中表达及机制研究

目的 XIAP相关因子1(XIAP-associated factor 1,XAF1)可与XIAP直接结合并拮抗其抗凋亡作用.本文研究了XAF1在人体肝癌组织表达,同时探讨了XAF1可能的作用机制.方法 通过免疫组化方法检测了XAF1在人体肝癌组织中表达水平;建立稳定高表达XAF1的肝癌细胞克隆,通过基因芯片技术探讨了XAF1可能的作用机制.结果 XAF1在人肝癌组织中表达免疫组化实验结果提示,XAF1在人肝癌组织中的表达阳性率为0.56%±0.03%,在癌旁组织中的表达阳性率为5.1±0.023%,两组均值间差异有统计学意义(P＜0.05);基因芯片结果提示,7.03%的基因发生的改变有统计学意义.其中1.72%基因与细胞凋亡和细胞周期相关.在细胞凋亡和细胞周期相关基因中,41.9%与线粒体凋亡相关途径相关,可见XAF1可能通过线粒体内源性途径促进凋亡.结论 XAF1在人体肝癌组织中表达水平低于癌旁组织;其抑制凋亡反应可能是通过内源性途径机制实现,XAF1有可能成为肝癌基因治疗的新靶点.     

蒿甲醚对胃癌细胞和胰腺癌细胞的体外杀伤作用

目的 观察蒿甲醚(ART)在体外对胃癌细胞株和胰腺癌细胞株的杀伤作用以及对细胞增殖和细胞凋亡的影响.方法 选择人胃癌细胞株SGC-7901和MKN-45及胰腺癌细胞株SW-1990和BXPC-3,采用MTT法检测不同浓度ART对不同肿瘤细胞的抑制作用;应用流式细胞仪检测ART对肿瘤细胞细胞周期和细胞凋亡的影响.结果 MTT结果显示ART对各株肿瘤细胞均具有显著的杀伤作用(P<0.05),且其细胞毒作用与时间-剂量呈正相关(P<0.05);流式细胞仪检测显示,ART使各株肿瘤细胞阻滞于G0/G1期,并诱导细胞凋亡.结论 ART在体外对SGC-7901、MKN-45、SW-1990、BXPC-3细胞株有明显的细胞毒作用,且具有时间-剂量效应关系;其抑制作用与阻滞细胞周期和诱导肿瘤细胞凋亡有关.     

结肠癌中骨形成蛋白-6启动子异常甲基化

目的研究骨形成蛋白-6（BMP-6）启动子在结肠癌细胞中的甲基化状态。方法运用甲基化特异PCR（MSP）法检测30例原发结肠癌和癌旁组织中BMP-6的甲基化水平。甲基化修饰后亚硫酸盐测序PCR（BSP）分析结肠癌细胞COLO-205细胞BMP一6启动子CpG岛甲基化状态。提取细胞RNA,通过实时定量PCR（real time-PCR）检测BMP-6mRNA在不同浓度的DNA甲基化酶抑制剂5＇-杂氮-2’-脱氧胞嘧啶（5-aza-dC）处理COLO-205细胞后BMP-6mRNA的改变情况。结果原发性结肠癌的甲基化异常检出率是33．3％（10／30）。BMP-6在COLO-205细胞中存在高甲基化状念,COLO-205细胞经5-aza-dC处理后BMP-6mRNA表达明显上调。结论BMP-6在原发性结肠癌中存在甲基化异常,说明BMP-6鹾闪甲基化异常可能参与结肠癌的发生。     

血清NPY水平与子宫内膜异位症患者疼痛及焦虑、抑郁的相关性

目的:分析、探讨血清神经肽Y(NPY)表达水平与子宫内膜异位症(EMS)患者疼痛、焦虑和抑郁症状的相关性。方法:采集2018年1月至2020年12月江西省人民医院病理诊断为子宫内膜异位症患者108例的血清标本和健康对照者102例的血清标本,通过酶联免疫吸附试验(Elisa法)检测血清NPY在研究组和对照组以及研究组不同疼痛程度组间的表达,同时探讨血清NPY与EMS患者焦虑、抑郁的关系。结果:血清NPY在对照组中表达水平为(95.13±11.04)pg/ml,在研究组中表达水平为(147.80±21.83)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05);EMS患者疼痛程度越强,血清NPY水平越高,疼痛亚组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05);EMS疼痛伴焦虑、抑郁者与对照组相比,血清NPY表达低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:血清NPY在EMS患者中高表达,其水平与EMS患者疼痛程度正相关,与EMS疼痛患者焦虑、抑郁程度负相关,表明NPY可能参与EMS的发病机制,其表达与EMS机体的情感障碍、应激状态密切相关。     

腺病毒介导XAFl基因诱导胰腺癌细胞株SW1990凋亡的实验研究

X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)是一种潜在的肿瘤抑制基因,能拮抗XIAP的抗凋亡作用.目的:探讨Ad5/F35腺病毒介导XAF1基因诱导胰腺癌细胞株SW1990凋亡的作用及其可能机制.方法:构建重组腺病毒Ad5/F35-XAF1和对照病毒Ad5/F35-Null,感染胰腺癌细胞株SW1990.分别以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法检测XAF1 mRNA和蛋白表达,以Annexin V-FITC/PI双染法和原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡率,以蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Caspase-3、PARP、Caspase-8、Caspase-9和细胞色素C的表达.结果:Ad5/F35-XAF1感染SW1990细胞后,XAFI mRNA和蛋白表达均显著增高,并能诱导细胞凋亡,同时伴有Caspase-3、PARP、Caspase-8和Caspase-9活化增强以及细胞色素C蛋白表达增加.结论:重组腺病毒Ad5/F35-XAF1感染胰腺癌细胞株SW1990后,能明显诱导细胞凋亡,其机制可能与XAF1激活了死亡受体途径和线粒体凋亡途径有关.     

斑蝥素诱导人胰腺癌细胞凋亡的实验研究

目的 探讨斑蝥素（Cantharidin）对人胰腺癌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法采用MTT法观察斑蝥素对人胰腺癌细胞株SW1990细胞增殖的抑制作用。采用Hoechst33258染色、TUNNEL染色、流式细胞术检测细胞凋亡改变，并以RT—PCR和Westernblot检测凋亡调节基因p53和Bcl-2、Bax的表达。结果 5mol／L斑蝥素能明显抑制人胰腺癌SW1990细胞的生长，呈现凋亡特征。RT—PCR和Westernblot检测可见Bax、p53基因表达显著增加，而Bcl—2基因表达减少。结论 斑蝥素能诱导人胰腺癌细胞凋亡，其作用可能与上调p53、Bax基因和下调Bcl-2基因有关。