大鼠β细胞素蛋白的表达、纯化及生物学活性鉴定

目的:获得大量重组大鼠β细胞素并检测其活性。方法:用PCR法从大鼠肾组织中扩增534bp的β细胞素基因片段,并按读框克隆到原核表达载体pET28a( )中。以构建的重组质粒pET28a-rBTC转化大肠杆菌BL-21(DE3)菌株,在IPTG诱导下表达β细胞素蛋白,表达产物用SDS-PAGE和Westernblot检测。采用镍柱亲和层析法纯化目的蛋白。结果:经IPTG诱导后,在大肠杆菌中可表达相对分子质量Mr为20000的目的蛋白。目的蛋白主要以包涵体的形式表达;表达量约占菌体蛋白总量的20%～30%。表达的目的蛋白与抗His标签抗体具有良好的反应性。结论:大鼠β细胞素基因在PET表达系统中得到高效表达;蛋白复性后能有效地促进NIH3T3细胞的体外增殖。     

右美托咪定减轻脂多糖致大鼠急性肺损伤

目的探讨右美托咪定在减轻脂多糖(LPS)致大鼠急性肺损伤(ALI)中的作用及相关机制。方法将SD大鼠随机分为:对照组、脂多糖组(LPS组,腹腔注射LPS 5 mg/kg)和右美托咪定+脂多糖组(LD组,腹腔注射右美托咪定25μg/kg+LPS 5 mg/kg)。6 h后,收集左肺支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA检测BALF中白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;取右肺组织进行HE染色观察肺组织病理学变化,并进行肺损伤评分;计算肺组织湿重/干重(W/D)的比值;Western blot检测肺组织中HGMB1、TLR4和TLR2蛋白的表达。结果与对照组相比,LPS组中肺损伤评分、W/D比值、BALF中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量明显升高(P0.05),且肺组织中HMGB1,TLR2,TLR4的表达上调(P0.05);与LPS组相比,LD组中各指标变化显著减轻(P0.05)。结论右美托咪定能够减轻LPS致大鼠急性肺损伤,可能与HGMB1和TLRs蛋白表达的抑制有关。     

胃良恶性病变组织中CD24和CD44v6的表达及其意义

目的： 研究胃良恶性病变组织中癌干细胞标记物CD24、CD44v6的表达并探讨其临床病理意义。方法: 49例胃癌、20例癌旁组织、36例淋巴结转移灶及80例不同类型胃良性病例（浅表性胃炎10例，萎缩性胃炎15例，胃溃疡20例，胃息肉20例，胃腺瘤15例）标本常规制作石蜡包埋切片，CD24和CD44v6染色方法为EnVision免疫组化法。结果: 胃癌病例CD24和CD44v6表达阳性率明显高于癌旁组织和不同类型胃良性病变（P＜0.05或P＜0.01），且阳性表达的良性病例胃黏膜上皮均呈中至重度不典型增生；转移灶CD24和CD44v6表达与相应原发灶呈现高度一致性（P>0.05）；组织学分级Ⅱ级、无淋巴结转移及无远处器官转移胃癌病例CD24和CD44v6表达阳性率明显低于组织学分级Ⅲ或Ⅳ级、淋巴结转移及远处器官转移病例（P＜0.05）。此外，浸润深度T₁-T₂及淋巴结N1站转移病例CD24表达阳性率明显低于浸润深度T₃-T₄和淋巴结N₂、N₃站转移病例（P＜0.05）。结论: CD24和CD44v6表达可能是反映胃癌发生、进展、生物学行为和预后的重要癌干细胞标记物，检测胃良性病例CD24和CD44v6表达水平对预防和早期发现胃癌可能有一定的临床价值。     

乙脑病毒prME蛋白编码基因表达分析及不同DNA免疫方法比较

将构建的含流行性乙型脑炎病毒(Japaneseencephalitisvirus,JEV)prME蛋白编码基因的重组质粒 (pJME)以不同浓度 (10 μg、5 μg以及 3μg)分别转染于HepG2细胞中 ,Westernblot法分析重组质粒表达特点 ,肌肉与基因枪注射方式将pJME免疫BALB/c鼠 ,二次免疫后 3周 ,腹腔注射乙脑病毒JaGAr 0 1株 ,10 5PFU/10 0 μl作为病毒攻击观察 2 1d。比较分析所产生的中和抗体效价以及保护基金项目 :日本金泽医科大学High Tech nologycenterH2 0 0 0 2项目资助作者单位 :中国医科大学附属第二医院感染科 (冯国和 ,王玉梅 ,窦晓光 ,王占英 ,乔…     

采用去β细胞技术建立胰岛α细胞大鼠模型

目的 建立一种去除胰岛β细胞的α细胞大鼠模型.方法 12周龄SD大鼠分为3组(n=8):正常对照组(NC)、模型1组(M1)和模型2组(M2),M1和M2组大鼠分别腹腔注射1次链脲佐菌素(STZ)100和150 mg/kg,5 d后处死大鼠,胰腺组织匀浆检测胰岛素(Ins)和胰高糖素(Glc)的含量;胰腺组织HE染色,Ins、Glc经免疫组织化学染色并图像定量分析.结果 去β细胞大鼠(M1和M2组)胰岛丽积约为正常大鼠的1/7,β细胞面积占胰岛面积比例由正常状态的74.3%分别下降到5.4%和5.2%,胰腺匀浆液Ins的含量不到正常的3%,而Glc的含量略有上升.NC组Glc阳性细胞位于胰岛周边,数量较少,M1和M2组Glc阳性的α细胞由周边向中央聚集,α细胞面积占胰岛面积比例由16.4%分别上升到76.5%和74.4%.结论 STZ一次大剂量腹腔注射可获得完全去除胰岛β细胞的大鼠模型,且不影响α细胞的形态和功能,建立胰岛α细胞大鼠模型.     

健脾补肾中药方对结直肠癌裸鼠移植瘤模型Klotho及铜死亡相关蛋白的研究

目的：探讨健脾补肾法对结直肠癌裸鼠移植瘤模型Klotho及铜死亡相关蛋白FDX1及LIAS的影响。方法：将16只裸鼠皮下移植瘤模型分为对照组和中药组,每组各8只,对照组用0.4 ml0.9%氯化钠注射液灌胃,中药组用0.4 ml健脾补肾类中药颗粒灌胃。2组裸鼠培育14 d后,免疫组化检测肿瘤组织Klotho及铜死亡相关蛋白FDX1、LIAS的表达情况。结果：2组造模后致瘤率均达100%,中药组裸鼠精神及活跃程度较好;2组灌胃14 d后各死亡1只。2组裸鼠肿瘤的质量及体积比较,差异无统计学意义(P>0.05)。中药组裸鼠肿瘤组织中Klotho蛋白、FDX1蛋白阳性表达显著高于对照组(P<0.05);2组裸鼠肿瘤组织中LIAS蛋白表达均呈阴性,差异无统计学意义(P>0.05)。结论：健脾补肾法可上调结直肠癌裸鼠移植瘤模型抑癌基因Klotho蛋白及铜死亡相关蛋白FDX1的表达。     

腹部推拿联合艾灸治疗脾虚型功能性便秘的临床疗效

目的：分析腹部推拿联合艾灸治疗脾虚型功能性便秘的临床疗效。方法：选取郑州人民医院2021年11月至2023年1月期间收治的78例脾虚型功能性便秘患者,其中艾灸治疗的39例患者纳入对照组,在艾灸治疗基础上联合腹部推拿治疗的39例患者纳入观察组。治疗后,比较两组患者临床疗效与相关临床指标。结果：观察组患者总有效率高于对照组,差异具有统计学意义（P <0.05）;治疗后,观察组患者排便次数、大便性状、盆底松弛程度、阻塞感、排便不尽感积分均低于对照组,差异具有统计学意义（P <0.05）;治疗后,观察组患者直肠肛管压差、力排时肛管残余压均低于对照组,差异具有统计学意义（P <0.05）;治疗后,观察组患者血清胃动素（MTL）、P物质（SP）水平均高于对照组,生长抑素（SS）水平低于对照组,差异具有统计学意义（P <0.05）。结论：腹部推拿联合艾灸治疗脾虚型功能性便秘可进一步改善患者相关临床指标。     

彩色多普勒对高血压患者视网膜中央动脉的检测

高血压病各期均可引起眼底视网膜动脉的改变 ,而做为主干的视网膜中央动脉 (ＣＲＡ)血流状态直接影响视网膜血流及生理功能 ,也反映周身血管阻力情况。因此 ,检测ＣＲＡ血流动力学变化 ,可为临床提供有价值参数。现将 30例高血压病和 2 0例正常组ＣＲＡ血流检测结果报告如下 :1　资料与方法1 1　高血压组 :30例 (6 0眼 ) ,为本院住院患者 ,均符合世界卫生组织 (ＷＨＯ)高血压诊断标准[1] 。男 14例 ,女 16例 ,年龄 41～ 81岁 ,平均 5 8 6 3± 10 2 3岁。病程 1～ 2 8年 ,平均 8 77± 6 82年。按眼科学高血压病眼底分级法[2 ] :将其分成三…     

颅内肿瘤的CT误诊分析

目的　分析颅内肿瘤的CT误诊原因 ,提高颅内肿瘤的CT诊断水平。方法　回顾分析经病理证实、CT误诊的 17例颅内肿瘤的CT图像资料 ,并与病理学结果进行对照。结果　CT误诊的 17例包括脑膜瘤 7例 ,胶质瘤 7例 ,颅咽管瘤 1例 ,垂体瘤 1例 ,多发颅内肿瘤1例。病变征象不典型、对病变CT征象认识不足和观察不仔细、检查方法不当、诊断思维错误、机器因素等是造成CT误诊颅内肿瘤的主要原因。结论　加强对病变CT征象的认识 ,培养客观正确的诊断思维 ,选择恰当的扫描方式 ,有助于减少或避免颅内肿瘤的CT误诊。     

特大交腿皮瓣修复小腿深度烧伤1例

1　临床资料　男性患者 ,34岁 ,农民 ,因煤气中毒右小腿烧伤后肿痛 15ｄ收入院。患者因煤气中毒晕到后烧伤右小腿 ,伤后约 10ｍｉｎ被他人发现救起 ,于当地医院给予吸氧及外用烧伤灵抗感染治疗 ,15ｄ后转入我院。查体 :体温37℃ ,脉博 :82 /ｍｉｎ ,呼吸 :18/ｍｉｎ ,血压 :16 / 12ｋＰａ ,体重 :70ｋｇ。烧伤创面主要位于右小腿胫前约 2 5ｃｍ× 10ｃｍ ,创基呈黑色干性坏死 ,胫骨外露约 15ｃｍ× 2ｃｍ ,呈灰白色 ,痂下有少许脓性分泌物 ,有恶臭味 ,坏死界限清楚 ,足背动脉博动好 ,末梢血运好 ,足趾活动灵活 ,活动时小腿疼痛加重。辅助检…