红细胞生成素对骨髓间充质干细胞干性的影响

有研究表明,当体外培养的骨髓间充质干细胞(MSC)形成集落时,其多向分化潜能具有逐渐丧失的倾向,且在体外扩增过程中MSC出现了自发分化的倾向,限制了其在临床上的应用.我们前期实验发现,在体外促红细胞生成素(EPO)能促进MSC的增殖和迁移能力.本实验拟用EPO作用于MSC,观察其未分化相关转录因子端粒酶逆转录酶(TERT)、POU5fl转录因子-4(OCT4)、性别决定基因相关转录因子-2(SOX2)和多潜能维持因子(Nanog)mRNA的表达情况,探讨EPO对MSC干性的影响.     

肢端麻木及淋巴细胞增多与肾脏占位1例

患者，男，72岁，因手足麻木3个月于2006年3月17日入院。无发热、出汗、消瘦等自觉症状。发病前有上呼吸道感染病史。入院体检：浅表淋巴结未触及，胸骨无压痛，心、肺无异常。腹平软，肝脏不大，脾肋下1cm，质中，无触痛。四肢腱反射减弱，四肢末梢呈手套、袜套样痛觉减退，病理反射阴性。实验室检查：血 WBC 88．9×10^9／L，成熟淋巴细胞0．77，Hb 112g/L，PLT 232×10^9／L。     

COP方案治疗难治性纯红性再生障碍性贫血1例

患者 ,女 ,43岁。以头昏、乏力 2年于 1 997年 2月在北京协和医院就诊。入院检查 :血常规红细胞0 .88× 1 0 12 / L,血红蛋白 35g/ L,白细胞、血小板正常。骨髓穿刺示增生活跃 ,粒∶红比例为 2 5∶ 1 ,红系增生减低 ,可见少数中晚幼红细胞 ,粒系和巨核系未见异常。骨髓活检及染色体正常。免疫球蛋白、补体、ANA、ENA、ds DNA及抗心磷脂抗体正常 ,CD4 / CD8倒置 ,溶血及铁代谢指标及叶酸、Vit B12 测定正常。确诊为纯红性再生障碍性贫血 (纯红再障 )。给予环孢素 A 30 0 mg/ d,口服 1个月余及间断输血效果不佳 ,后行胸部 CT显示胸腺…     

骨髓增生异常综合征患者血清GM-CSF水平测定及意义

目的 :了解 MDS患者血清 GM- CSF水平并探讨其意义。方法 :采用放射免疫法测定 32例MDS、35例健康人血清 GM- CSF水平 ,t检验行统计学处理。结果 :同正常人相比 ,MDS患者血清GM- CSF水平明显下降 ( 54.86± 17pg/ ml;34 .0 1± 14pg/ ml)。结论 :MDS患者 GM- CSF自分泌水平较正常人降低 ,GM- CSF分泌水平与 MDS分型无明显相关性 ,与疗效无肯定关系。     

ABO表型与白血病

1990年Landsteiner发现的ABO红细胞血型系统是目前临床应用最为广泛的血型系统。有研究发现ABO亚型与某些疾病有一定关系,为了了解ABO表型与白血病的关系,我们对我院214例初治白血病患者,按血型及白血病类型进行统计分析,现     

急性非淋巴细胞白血病并发支气管肉瘤1例

急性非淋巴细胞白血病并发支气管肉瘤１例东风汽车公司中心医院血液内科程范军急性非淋巴细胞白血病Ｍ２亚型并发支气管肉瘤者临床罕见，现报告１例。患者，女，６３岁，因原发性高血压于１９９２年１２月３日入院。体检：血压２４／１５ｋＰａ，心肺正常，无肝脾肿大。实...     

骨髓增生异常综合征骨髓微环境的改变

骨髓微环境是一个由造血干／祖细胞（HSPC）、非造血细胞以及细胞外基质和多种细胞因子等组成的复杂网状结构,其各成分相互作用以支持正常的造血。近来研究发现,骨髓微环境中的间充质干细胞（MSC）、髓源抑制性细胞、细胞因子功能紊乱以及造血干细胞的表观遗传学改变都可以影响正常造血,导致血液系统恶性疾病如骨髓增生异常综合征（MDS）的发生。已有动物模型证实了骨髓微环境在造血系统恶性疾病的发生和维持中起着重要作用。     

肝细胞生长因子对ALL小鼠骨髓移植后GVHD和血清Th1/Th2相关细胞因子的影响

为了观察肝细胞生长因子 (HGF)对急性淋巴细胞白血病 (ALL)小鼠异基因骨髓移植 (allo BMT)后GVHD和血清Th1 Th2相关细胞因子的影响 ,BALB c小鼠ALL模型建立后 ,接受 11Gy全身照射 ,将昆明小鼠骨髓移植给该ALL模型小鼠。随机将BALB c小鼠分A、B两组 ,A组移植后 0天至 7天皮下注射HGF ,B组皮下注射PBS。移植后观察A、B两组的GVHD症状和肝、小肠、皮肤的病理学变化 ;移植后第 8天取血检测IFN γ和IL 4水平。结果表明 :A组的GVHD症状积分低于B组 (P <0 .0 5 ) ;A、B两组的IFN γ均高于正常组 (P值分别 <0 0 5和0 0 0 1) ,但A组低于B组 (P <0 .0 1) ;A、B两组的IL 4均低于正常组 (P <0 .0 5 ) ,而A组的IL 4高于B组 (P <0 .0 5 )。结论 :HGF可减轻GVHD的严重程度 ,与HGF有调节Th1 Th2相关细胞因子趋于平衡的作用有关。     

骨髓间充质干细胞成纤维样集落的培养方法及多向分化潜能

目的:建立原代小鼠骨髓间充质干细胞成纤维样集落的培养方法,了解间充质干细胞的培养特性及其多向分化潜能。方法:实验于2004-10/2005-10在郧阳医学院附属人民医院临床医学研究所完成。①间充质干细胞的分离:选取SPF级2月龄昆明种小鼠30只,无菌条件下抽取双侧股骨、胫骨骨髓,制成骨髓单细胞悬液,计数有核细胞的密度。②血清浓度对成纤维样集落的影响:调整有核细胞密度为5×108L-1,分别接种于体积分数为0.02,0.05,0.1,0.15,0.2,0.25的胎牛血清-DMEM培养基中,每种血清浓度各4孔,1mL/孔,24h后换液。随后每72h换液,连续观察2周。③有核细胞密度对成纤维样集落的影响:分别调整有核细胞至106L-1,107L-1,2.5×108L-1,5×108L-1,109L-1,分别接种于12孔板中,每种密度4孔,24h后换液。随后每72h换液,连续观察2周,瑞氏吉姆萨染色后计数成纤维样集落的个数。④成骨与成脂肪诱导:调整有核细胞密度在5×108L-1,接种于预包被鼠尾胶的12孔板中培养。24h换液,去除未贴壁的细胞,以后每48h换液1次,换液后加入成骨诱导液、成脂肪诱导液。观察各血清浓度下细胞生长情况,消化培养板中的成纤维样集落流式细胞仪检测CD34,CD133,CD90,CD105。VonKossa和油红O法染色鉴定间充质干细胞成骨与成脂肪诱导情况。结果:①不同血清浓度对成纤维样集落形成的影响:胎牛血清-DMEM培养液体积分数为0.02,0.05时,细胞可保持成纤维样,但增殖较慢;体积分数为0.15,0.2,0.25时,细胞增殖较快,但细胞易分化;体积分数为0.1时,细胞可基本保持成纤维样,且增殖速度适中。②有核细胞不同接种密度对成纤维样集落形成的影响:有核细胞接种密度为106L-1,107L-1时,每孔成纤维样集落数为0～1个。接种密度高于109L-1时,每孔成纤维样集落之间出现交叉或融合。接种密度分别为2.5×108L-1,5×108L-1,109L-1时,10d左右可见典型的成纤维样集落。成纤维样集落个数与所接种有核细胞密度呈正相关。③成纤维样集落中的间充质干细胞表面标记流式检测结果:成纤维样集落中的间充质干细胞呈CD34-,CD133-,CD90 ,CD105 ,分别各占2.5%,3.1%,67%和78%。④间充质干细胞成骨与成脂肪诱导情况:成脂肪诱导2周后成纤维样集落中(80±7)%的间充质干细胞出现脂滴,成骨诱导2周后成纤维样集落出现矿物结节。分别以油红O和VonKossa’s矿化结节特异性染色后,成脂肪诱导中成纤维样集落(85±6)%的细胞胞浆呈红色,成骨诱导中大多数的成纤维样集落中心位置出现钙结节。结论:全骨髓接种合适密度的有核细胞可形成典型的成纤维样集落,且成纤维样集落具有成骨、成脂肪等多向分化潜能。     

骨髓间充质干细胞成纤维样集落的培养方法及多向分化潜能

目的：建立原代小鼠骨髓间充质干细胞成纤维样集落的培养方法，了解问充质干细胞的培养特性及其多向分化潜能。 方法：实验于2004-10／2005-10在郧阳医学院附属人民医院临床医学研究所完成。①间充质干细胞的分离：选取SPF级2月龄昆明种小鼠30只，无菌条件下抽取双侧股骨、胫骨骨髓，制成骨髓单细胞悬液，计数有核细胞的密度。②血清浓度对成纤维样集落的影响：调整有核细胞密度为5&;#215;10^8L^-1，分别接种于体积分数为0．02，0．05，0．1，0．15，0．2，0、25的胎牛血清-DMEM培养基中，每种血清浓度各4孔，1mL／孔，24h后换液。随后每72h换液，连续观察2周。③有核细胞密度对成纤维样集落的影响：分别调整有核细胞至10^6L^-1，10^7L^-1，2．5&;#215;10^8L^-1，5&;#215;10^8L^-1，10^9L^-1，分别接种于12孔板中，每种密度4孔，24h后换液。随后每72h换液，连续观察2周，瑞氏吉姆萨染色后计数成纤维样集落的个数。④成骨与成脂肪诱导：调整有核细胞密度在5&;#215;10^8L^-1，接种于预包被鼠尾胶的12孔板中培养。24h换液，去除未贴壁的细胞，以后每48h换液1次，换液后加入成骨诱导液、成脂肪诱导液。观察各血清浓度下细胞生长情况，消化培养板中的成纤维样集落流式细胞仪检测CD34，CD133，CD90，CD105。VonKossa和油红O法染色鉴定间充质干细胞成骨与成脂肪诱导情况。 结果：①不同血清浓度对成纤维样集落形成的影响：胎牛血清-DMEM培养液体积分数为0．02，0．05时，细胞可保持成纤维样，但增殖较慢；体积分数为0．15，0．2，0．25时，细胞增殖较快，但细胞易分化；体积分数为0．1时，细胞可基本保持成纤维样，且增殖速度适中。②有核细胞不同接种密度对成纤维样集落形成的影响：有核细胞接种密度为10^6L^-1，10^7L^-1时，每孔成纤维样集落数为0～1个。接种密度高于10^9L^-1时，每孔成纤维样集落之间出现交叉或融合。接种密度分别为2．5&;#215;10^8L^-1，5&;#215;10^8L^-1，10^9L^-1时，10d左右可见典型的成纤维样集落。成纤维样集落个数与所接种有核细胞密度呈正相关。③成纤维样集落中的问充质干细胞表面标记流式检测结果：成纤维样集落中的问充质干细胞呈CD34^-，CD133^-．CD90^＋，CD105^＋，分别各占2．5％，3．1％，67％和78％。④间充质干细胞成骨与成脂肪诱导情况：成脂肪诱导2周后成纤维样集落中（80&;#177;7）％的间充质干细胞出现脂滴，成骨诱导2周后成纤维样集落出现矿物结节。分别以油红0和Von Kossa’s矿化结节特异性染色后，成脂肪诱导中成纤维样集落（85&;#177;6）％的细胞胞浆呈红色，成骨诱导中大多数的成纤维样集落中心位置出现钙结节。 结论：全骨髓接种合适密度的有核细胞可形成典型的成纤维样集落，且成纤维样集落具有成骨、成脂肪等多向分化潜能。