人白介素2体外诱生与检测方法的建立

本研究旨在建立流式磁珠免疫荧光方法，并通过Luminex 100多功能液相分析平台对细胞培养上清液中的IL-2进行定量分析。用密度梯度离心法从ACD抗凝人外周血中分离淋巴细胞，用植物凝集素刺激其分化，在48小时后收集培养上清液，于-20℃冻存待测。用Luminex 100多功能液相分析平台检测IL-2标准品以及样品的相关荧光单位值（RFU），通过标准曲线求出样本中IL-2浓度。结果表明：得出标准品系列的回归方程为Lg（RFU）=1．547＋0．867LgC。方差分析显示F=301．7427，P〈0．05（v=6）；回归系数t检验显示，t=17．3707（v=6），P〈0．05。结论：建立了人IL-2体外诱生和检测的方法。该方法所得标准曲线有统计学意义。细胞上清液中的IL-2含量（对数）与荧光强度（对数）之间有直线关系。     

A3等位基因的分子遗传分析

为了研究血型血清学鉴定为A3型的4例样本，其中2例样本为一个家系，用血清学方法检定其3例为A3型，1例为A3B型。通过PCR-SSP与测序分析其Exon 6与Exon 7及部分内含子，与A101等位基因参比序列进行了比较。结果发现在2例A、型样本中单倍体分别为常见的A102等位基因与O1—2等位基因，1例A，样本中单倍体分别为常见的A102等位基因与少见的O^1V-4等位基因，1例A3B样本在A基因中发现838C→T(Leu280Phe)，此研究结果提示血清学表现为A3型的分子遗传背景存在多态性，A3B型的838C→T可能是A3低转移酶活性的分子基础。     

安徽汉族HLA-A、B、DRB1基因多态性和单倍型的分布特征

目的分析安徽汉族人群中人类白细胞抗原(HLA)-A、B、DRB1基因和单倍型的分布特征。方法根据2816例安徽汉族无关骨髓供者的HLA基因型数据,分别采用方根法和最大似然性方法计算HLA-A、B、DRB1基因频率和单倍型频率,并进行群体比较。结果安徽汉族中共检出78个HLA基因,其中A*02、A*11、A*24、A*33、A*30、B*13、B*46、B60、B62、B*58、B61、DRB1*09、DRB1*15、DRB1*04、DRB1*07、DRB1*12、DRB1*08、DRB1*13、DRB1*11和DRB1*14最常见。440条A-B单倍型和481条B-DR单倍型中,A2-B46、A30-B13等26条A-B单倍型以及B13-DR7、B46-DR9等27条B-DR单倍型最常见;另外,至少80条A-B单倍型和102条B-DR单倍型呈现显著的正连锁不平衡,其中A2-B46、A30-B13、A33-B58、A33-B44、A2-B38等17条A-B单倍型以及B13-DR7、B46-DR9、B58-DR17、B44-DR13、B54-DR4、B52-DR15、B58-DR3、B57-DR7等18条B-DR单倍型表现为强连锁不平衡。3488条A-B-DR单倍型中,537条A-B-DR单倍型的频率大于等于3.55×10-4,A30-B13-DR7和A2-B46-DR9等27条单倍型频率高于0.005。结论安徽汉族人群HLA-A、B、DR基因和单倍型的分布比较接近中国北方汉族人群,但一定程度上受到南方汉族人群的影响。     

应用ABO和STR基因分型技术鉴定混合血样

目的探讨应用分子生物学方法鉴别混合血液样本的价值。方法应用STR基因分型和ABO基因分型方法检测2份血样(标本1、标本2)的15个STR基因座和ABO基因型。结果标本2为A型血样,而标本1为标本2与另-B型或AB型血的混合样本。结论STR和ABO基因分型等分子生物学技术可为疑难样本的鉴定提供一种简便、快速、可靠的方法。     

无抽搐电休克联合喹硫平对双相情感障碍躁狂发作患者氧化应激水平及认知功能的影响

目的：探讨无抽搐电休克联合喹硫平在双相情感障碍（BD）躁狂发作患者中的效果。方法：采用随机数字表法将2020年6月-2022年6月上饶市第三人民医院收治的60例BD躁狂发作患者分为对照组（30例,接受喹硫平治疗）和研究组（30例,在喹硫平治疗基础上加用无抽搐电休史治疗）。比较两组精神状况、治疗效果、氧化应激水平和认知功能。结果：两组治疗前精神状况、氧化应激水平和认知功能比较,差异均无统计学意义（P>0.05）;治疗后,研究组简明Bech-Rafaelsen躁狂量表（BRMS）评分为（6.35±2.08）分,低于对照组的（17.92±3.18）分,差异有统计学意义（P<0.05）。研究组治疗总有效率为96.67%(29/30),高于对照组的80.00%(24/30),差异有统计学意义（P<0.05）。研究组治疗后超氧化物歧化酶（SOD）为（132.28±13.05）U/mL,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）为（153.53±12.64）U/L,过氧化氢酶（CAT）为（1.86±0.52）U/m L,均高于对照组的（119.98±12.76）U/m L、（145.02±...     

一个新的等位基因:HLA-A~*1114克隆和序列分析

目的　识别确认中国人群的HLA新等位基因。方法　使用PCR SSP以及以测序为基础的分型 (SBT)技术 ,在HLA分型常规工作中发现 1个与HLA A 110 2基因相关的新基因 ,以基因克隆及DNA测序 ,分析该基因和A 110 2基因序列的差异。结果　该基因和A 110 2基因序列的差异在于外显子 3区域中 ,5 2 4A >G ,5 2 6G>C以及 5 2 7C >G等 3个碱基的取代 ,使密码子 175由组氨酸变为精氨酸 ,密码子 176由丙氨酸变为精氨酸。结论该基因为HLA新等位基因 ,2 0 0 2年 9月已被世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为HLA A 1114。用PCR SSP方法 ,在 30 0 0名随机造血干细胞供者中 ,未发现其他带有A 1114基因的个体。     

短串联重复序列监测异基因造血干细胞移植后的植入状态及其演变过程

目的：监测和观察异基因造血干细胞移植后的植入状态及其演变过程。方法：于2003—01／2004—12在中国造血干细胞库深圳分库采集完成人类白细胞抗原配型的6对供受者标本。采用荧光标记复合扩增短串联重复序列检测技术，对6对供受者标本移植前后的系列血样进行DSS1179，1321S11，D18S51，D5S818，D13S317，D7S820，D3S1358，vWA，FGA共9个短串联重复序列位点和Amelogenin性别位点的检测，找出供受者间的差异基因，通过移植后不同时间段患者基因型的转变情况，判断供者细胞是否植入以及嵌合体类型。结果：供受者6对样本均获得满意的9个短串联重复序列位点和1个性别位点的分型结果。6对移植标本短串联重复序列差异基因由受者型向供者型转化的时间为14～23d。6对样本间存在明显差异。第3对、第5对在第14天已为供者完全嵌合状态，而第1对在第16天、第4对在第18天尚为供受者混合嵌合体。但6对样本都是一个从混合嵌合向完全嵌合发展的良好趋势。结论：①6对移植标本短串联重复序列差异基因由受者型向供者型转化的时间为14～23d，6对样本都有从混合嵌合向完全嵌合发展的良好趋势。②采用荧光标记复合扩增短串联重复序列方法可精确地测量聚合酶链反应产物的数量，描述造血干细胞的植入程度及植入的整个演变过程。     

深圳地区妊娠期孕妇血清IgG抗体效价与产后HDN的相关性

目的探讨深圳地区1069例妊娠期孕妇血清中红细胞血型IgG类抗体特异性、效价对母婴血型不合引起的新生儿溶血病（HDN）的影响,为新生儿免疫溶血性疾病的早期诊断及预防提供依据。方法对深圳地区的1069例与丈夫红细胞血型不合的孕妇血清进行IgG类抗体筛选,对不规则抗体阳性者鉴定抗体的特异性,采用以间接抗球蛋白法定期检测相应抗体的效价。并随访高胆红素血症的新生儿,对其进行红细胞直接抗球蛋白试验、血清游离试验和红细胞放散试验等,以了解黄疸患儿中因红细胞血型IgG抗体引发HDN的构成。结果1069例样本中,IgG抗A／B效价≥64者765例,产生HDN的457例;IgG抗A／B效价〈64者236例,产生HDN的61例。ABO-HDN占总调查人数45．65％。IgG抗D、C、D＋C、M、Mur≥16者57例,产生HDN的54例;IgG抗D、C、D＋C、M、Mur〈16者11例,产生HDN的1例。非ABO-HDN占总调查人数5．14％。结论深圳地区的孕妇血清中IgG类抗体效价与新生儿溶血病密切相关,HDN发病率有明显偏高的现象。定期筛选与鉴定孕妇体内IgG类抗体可预测新生儿溶血病的发生、评估HDN的严重程度及提高HDN的治愈率。     

中国人群人类白细胞抗原A、B和DRB1基因测序分型中模棱两可等位基因的鉴别

背景:人类白细胞抗原基因测序分型中,当某些等位基因间的差异碱基位于测序范围外时,无法得到清晰的等位基因结果.目的:分析中国人群人类白细胞抗原A,B,DRB1基因测序分型中模棱两可等位基因的分布规律,探讨其在中华骨髓库大样本人类自细胞抗原A、B、DRB1基因的测序分型中的解决方案.设计、时间及地点:采用随机抽样方法对研究样本进行人类白细胞抗原A、B、DRB1基因的测序分型,并对其中的模棱两可等位基因进行验证性实验,于2006-01/2008-06在深圳市血液中心完成.材料:658名深圳骨髓库汉族供者乙二胺四乙酸盐抗凝血5 mL.方法:采用聚合酶链式反应-测序分型方法对658名深圳骨髓库供者的人类白细胞抗原A、B和DRB1基因进行高分辨分型,并采用针对相应位点的高分辨聚合酶链式反应-序列特异性引物方法对其中由于碱基差异位于检测区外而产生的模棱两可等位基因进行鉴别.主要观察指标:模棱两可等位基因的分布及确认.结果:658份标本中,人类白细胞抗原A、B和DRB1三个基因座的模棱两可等位基因分别为9个(2种)、140个(5种)、406个(8种),占等位基因总数的14.06%(565/3 948).高分辨聚合酶链式反应-序列特异性引物鉴定结果显示,中国报道的DRB1*1401被全部确认为DRB1*1454;12例B*0705/B*0706中,有1例被确认为B*0706,其他13种等位基因的鉴定结果分别为A*6801、A*7402、B*2705、B*3501、B*4402、B*5801、DRB1*0101、DRB1*0406、DRB1*0803、DRB1*1101、DRB1*1201、DRB1*1302和DRB1*1502.结论:在中华骨髓库大样本人类白细胞抗原基因的测序分型中可以应用直接鉴别的方法区分模棱两可等位基因,但在临床移植前的高分辨确认试验中则需要采用实验方法进行精确分型.     

定期无偿献血者T细胞免疫功能的研究

目的通过对定期无偿全血捐献者、定期无偿血小板捐献者2个特殊健康人群的T细胞数量以及细胞活化、细胞因子分泌功能的研究,评价定期献血对机体T细胞免疫功能的影响。方法采用流式细胞术对3组人群(定期无偿全血捐献者、定期无偿血小板捐献者、对照组)外周血中T细胞总数、CD4+T细胞群及CD8+T细胞群进行数量分析;分离外周血淋巴细胞体外培养,加丝裂原植物凝集素PHA刺激T细胞活化,流式细胞术检测CD4+CD25+活化T细胞群;Lum inex 100多功能液相分析平台检测细胞因子IL-2的分泌量。结果定期无偿全血捐献组及定期无偿血小板捐献组的T细胞总数及CD4+T细胞群、CD8+T细胞群的数量与对照组的差异无统计学意义(P>0.05);T细胞活化指标CD25+、CD69+均在培养d4(72h)表达最高;定期无偿捐献全血组CD4+CD25+活化T细胞以及IL-2分泌量与对照组的差异无统计学意义(P>0.05);定期无偿捐献血小板组CD4+CD25+活化T细胞以及IL-2的分泌量高于对照组(P<0.05)。结论机体通过强大的正负免疫调节,使定期献血者T细胞的数量和功能维持稳定状态。