用APAAP桥联酶标技术快速诊断合胞病毒

应用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）桥联酶标技术，对１１６例急性下呼吸道感染的患儿，进行合胞病毒抗原快速诊断研究，并与免疫荧光（ＩＦＡ）技术对照。二者阳性符合率９８．００％，阴性符合率９５．３８％，准确性为９６．５５％，进一步证明，ＡＰＡＡＰ桥联酶标技术特异性好，灵敏性高，用于呼吸道细胞检测，无内源性酶的干扰，并且操作简便，无需荧光显微镜，优于ＩＦＡ技术，可用于合胞病毒感染的快速诊断；与ＩＦＡ技术联用，可提高阳性检出率。     

突触后密度蛋白-95在大鼠脊髓发育过程中的表达变化

目的:探讨突触后密度蛋白-95(PSD-95)在大鼠脊髓发育过程中的表达变化以及细胞定位。方法:采用实时定量PCR(Real-Time PCR)和Western blot测定发育不同时期PSD-95 mRNA及蛋白水平的表达变化。采用免疫荧光染色显示PSD-95在发育脊髓中的细胞定位。结果:大鼠脊髓发育过程中PSD-95 mRNA及其蛋白水平从生后1d开始逐渐升高,在生后1周达高锋,成年后维持在一定的生理水平。免疫荧光双标证实PSD-95在生后发育早期主要定位于脊髓灰质,与神经元的标记物NeuN和突触的标记物synapsin存在共定位;成年后广泛分布于脊髓前角、后角以及白质,分别与NeuN和synapsin以及小胶质细胞的标记物OX-42共定位。结论:大鼠脊髓发育过程中PSD-95在基因和蛋白水平呈现明显的时相变化,在生后发育早期主要表达在前角运动神经元和后角感觉神经元,提示PSD-95参与了神经元的发育和成熟。     

用核酸杂交法检测1474例产妇血及新生儿尿中人巨细胞病毒DNA

用核酸杂交法检测１４７４例产妇血及新生儿尿中人巨细胞病毒ＤＮＡ钱绩虎，程纯，季玉红，王建明人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）是先天性病毒感染中最常见、最严重的一种。先天性感染ＨＣＭＶ后，可造成流产、死胎、死产、先天性畸形等，另有１０％出生时无症状的新生儿在学龄...     

β-1,4-半乳糖苷键在星形胶质细胞瘤中的表达特征

目的研究β-1,4-半乳糖苷键在各型人脑星形胶质细胞瘤中的表达变化特征。方法分别提取人正常脑及星形胶质细胞瘤蛋白质,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）,考马斯亮蓝（CBB）染色。并利用特异识别β-1,4-半乳糖苷键的蓖麻凝集素-Ⅰ（RCA-Ⅰ）,经letin blot和组织化学方法分析β-1,4-半乳糖苷键在各型人脑星形胶质细胞瘤中的表达变化和表达定位。结果CBB染色结果显示,人正常脑及星形胶质细胞瘤的蛋白质组成相似。RCA-Ⅰ letin blot显示：星形胶质细胞瘤组织半乳糖基化较正常脑组织有升高趋势,并且有-61kD的蛋白在胶质瘤组织中被半乳糖基化。组织化学方法表明：β-1,4-半乳糖苷键散在表达于正常脑组织和各级胶质瘤组织中,随着肿瘤分级增高,表达β-1,4-半乳糖苷键的细胞增多：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ平均RCA-Ⅰ染色阳性率分别为15％、21％、28％和41％,而正常脑组织平均RCA-Ⅰ染色阳性率为8％。结论β-1,4-半乳糖苷键的表达与人脑星形胶质细胞瘤恶性程度密切相关,为分析β-1,4-半乳糖苷键及其相关糖基转移酶在恶性胶质瘤中的发病和诊治意义奠定基础。     

HPLC法测定黄褐毛忍冬总皂苷中α-常春藤皂苷的含量

目的:建立黄褐毛忍冬总皂苷中α-常春藤皂苷的含量测定方法。方法:采用HPLC法对黄褐毛忍冬总皂苷中α-常春藤皂苷进行含量测定,色谱柱为Welchrom C18(5μm,4.6×250 mm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液(43:57);流速1.0 ml/min;检测波长为205 nm。结果:α-常春藤皂苷在0.32~1.62μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),平均加样回收率为98.07%,RSD为1.11%(n=6)均符合要求。结论:方法简便、准确、适用于对黄褐毛忍冬总皂苷中α-常春藤皂苷的含量测定。     

布洛芬联合退热走珠器治疗高热患儿效果观察

目的:探讨布洛芬联合退热走珠器对高热患儿的解热效果。方法:将240例高热患儿随机分为观察组和对照组各120例。在常规治疗基础上,观察组应用布洛芬联合退热走珠器降温,对照组采用布洛芬联合温水擦浴降温。结果:观察组降温有效率高于对照组(P<0.05)。观察组用药2 h、3 h、4 h及6 h体温下降情况均较对照组明显(P<0.05)。观察组血沉下降率优于对照组(P<0.05)。结论:应用布洛芬联合退热走珠器降温迅速、安全,疗效优于布洛芬联合温水擦浴效果。     

蛋白激酶C在脂多糖诱导内皮细胞β-1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ表达中的作用

目的 研究蛋白激酶c(PKC)对脂多糖(LPS)诱导内皮细胞β-1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ(β-1,4-galactosyltransferase-Ⅰ,β-1,4-GalT-Ⅰ)表达的调节作用,以及对内皮细胞骨架结构改变及其黏附能力的影响.方法 分别用PKC激动剂或几种不同类型的PKC抑制剂预处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs)30 min,LPS刺激HUVECs 4 h后,RT-PCR、Western blot方法 检测β-1,4一GalT-Ⅰ表达变化,细胞荧光染色观察β-1,4-GalT-Ⅰ催化的糖链表达变化及细胞骨架结构的改变,通过内皮-单核细胞黏附试验观察HUVECs黏附能力的改变.结果 几种不同类型的PKC抑制剂均能不同程度地抑制LPS刺激HUVECs引起的β-1,4-GalT-Ⅰ表达的上调,PKC激动剂能够使上调的β-1,4-GalT-Ⅰ的表达进一步增加;在HUVECs中β-1,4-GalT-Ⅰ与细胞骨架有共同定位,PKC抑制剂显著抑制LPS诱导的内皮细胞骨架蛋白的重构和β-1,4-GalT-Ⅰ细胞内的再分布;PKC抑制剂显著抑制LPS诱导的内皮-单核细胞黏附能力的上调.结论 PKC可能参与调节LPS诱导的HUVECs β-1,4-GalT-Ⅰ的表达,可能多种类型的PKC参与了这一调节过程;PKC可能通过对β-1,4-GalT-Ⅰ的调节进而影响炎症过程中内皮细胞骨架蛋白的重构及内皮细胞与单核细胞的黏附能力.     

细胞外信号调节激酶在脂多糖诱导内皮细胞β-1，4-半乳糖基转移酶-Ⅰ表达中的作用

目的:研究细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated protein kinase,ERK)对脂多糖(LPS)诱导内皮细胞β-1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ(β-1,4-galactosyltransferase-Ⅰ,β-1,4-GalT-Ⅰ)表达的调节作用。方法:应用ERK通路抑制剂U0126预处理人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)2 h,再用LPS刺激HUVECs 4 h,分别用RT-PCR和Western-blot方法检测β-1,4-GalT-ⅠmRNA及蛋白水平表达变化,并通过内皮-单核细胞黏附试验观察HUVECs黏附能力的改变。结果:U0126显著抑制LPS引起的HUVECsβ-1,4-GalT-Ⅰ表达的上调及其黏附能力的上词。结论:ERK信号转导通路可能参与调节LPS诱导的内皮细胞β-1,4-GalT-Ⅰ的表达,并影响内皮细胞的黏附能力。     

P27^kip1与出核因子CRM1在人淋巴瘤细胞系中的表达及相互关系

目的研究P27kip1与出核因子CRM1在淋巴瘤细胞中的表达及相互关系。方法运用血清饥饿同步化处理淋巴瘤细胞株Jurkat和Raji,10%血清刺激细胞增殖。Western blot分别检测生长阻滞及增殖的淋巴瘤细胞中P27kip1与CRM1的表达。用核浆分离方法检测P27kip1与CRM1分别在胞核、胞质的定位。免疫沉淀检测P27kip1与CRM1在淋巴瘤细胞中的结合。结果在不同状态的淋巴瘤细胞中,P27kip1与CRM1蛋白水平的表达均表现为负相关,并且P27kip1的核内外分布与CRM1的核内外分布一致。免疫沉淀结果验证在淋巴瘤细胞中P27kip1与CRM1相互结合。结论出核因子CRM1可能通过与P27kip1结合而影响P27kip1的核内外分布及表达水平,从而参与调控淋巴瘤细胞的生长。     

应激对T淋巴细胞增殖的抑制作用

使用束缚方法使大鼠产生应激，一部分实验取大鼠应激３ｈ、６ｈ，１２ｈ和１８ｈ的淋巴结提取物，与刀豆素Ａ（ＣｏｎＡ）同时加入到正常大鼠肠系膜淋巴结细胞悬液中，浓度比为１：１６０和１：６４０，另一部分实验取大鼠应激３ｈ、６ｈ、１２ｈ、１８ｈ和解除束缚后，１２ｈ、２４ｈ，４８ｈ，７２ｈ，９６ｈ的血清，与ＣｏｎＡ同时加入到正常大鼠肠纱膜淋巴结细胞悬液中，浓度比为１：１６和１：６４，孵育６８ｈ后用噻唑蓝（ＭＧ