AngⅡ对人心房肌细胞膜钙通道电流的影响及卡维地洛的拮抗作用

目的:观察AngⅡ对人心房肌细胞膜钙通道电流的影响及卡维地洛的拮抗作用,为应用卡维地洛治疗房性心律失常提供实验基础。方法:急性分离单个人心房肌细胞,采用全细胞膜片钳方法记录L-型钙电流(LCaL)。实验分4组:对照组,AngⅡ(0.1μmol/L)组,卡维地洛(1μmol/L)组,AngⅡ+卡维地洛组。结果:与对照组相比,0.1μmol/LAngⅡ使人心房肌细胞膜LCaL峰值电流密度明显增加(-12.74±1.65vs-5.78±0.82pA/pF,P<0.05)。1μmol/L卡维地洛对人心房肌细胞膜ICa-L无明显影响(-5.72±0.77pA/pF).但可拮抗AngⅡ的作用;AngⅡ+卡维地洛组的ICa-L峰值电流密度(-8.03±0.84pA/pF)与AngⅡ组相比有显著差异(P<0.05)。结论:AngⅡ对人心房肌细胞具有明显的电生理学作用,0.1μmol/LAngⅡ可促进人心房肌细胞膜ICaL.卡维地洛可拮抗AngⅡ对人心房肌细胞膜ICaL的作用。     

一氧化氮对缺氧/复氧乳鼠心肌细胞内游离钙的影响

目的研究一氧化氮供体S-亚硝基-已酰青酶胺(SNAP)对缺氧/复氧乳鼠心肌细胞内游离钙浓度的影响。方法培养20×5只SD大鼠(1~3)d的心肌细胞,随机分为5组:A组为正常对照组;B组为单纯缺氧/复氧组(A/R缺氧2 h复氧1 h);C组为NO预处理组加入SNAP使其终浓度分别为0.1 mmol/L,预处理20 min后行A/R;D组为NO预处理组加入SNAP使其终浓度为1 mmol/L,预处理20 min后行A/R;E组为NO预处理组加入SNAP使其终浓度为2 mmol/L,预处理20 min后行A/R。与复氧后应用特异性Ca2+荧光指示剂Fluo-3/AM负载细胞,激光共聚焦显微镜检测游离Ca2+浓度。结果与正常组相比,单纯缺氧/复氧组钙浓度明显升高(P<0.01);0.1 mmol/L和1 mmol/L SNAP能明显降低钙超载(与B组相比,P<0.01),2 mmol/L SNAP组加重钙超载(与B组相比,P>0.05)。结论一氧化氮通过降低细胞内钙超载而减轻缺氧/复氧对心肌细胞的损伤,其作用有浓度依赖性。     

以心室收缩不同步作为心脏再同步治疗筛选标准的疗效评价

心脏再同步治疗(CRT)是治疗慢性心力衰竭(CHF)的一种有效方法,目前CRT主要用于QRS时限≥120 ms、左心室舒张末期内径(LVEDD)≥55 mm、左心室射血分数(LVEF)≤0.35的顽同性心力衰竭患者,但严格入选的人群中仍有20%～30%无明显疗效,如何提高CRT的临床疗效是这一领域的研究热点,我院以心室收缩不同步作为26例CRT筛选标准,随访发现可以提高CRT的临床疗效.     

双心室起搏治疗慢性心力衰竭伴心室内传导阻滞患者的近期疗效

目的观察双心室起搏治疗慢性心力衰竭（心衰）的临床效果。方法慢性心衰患者13例均伴心室内传导阻滞,体表心电图QRS波时限为146±9 m s,心功能（NYHA）ⅢⅣ级,超声心动图显示左心室射血分数（LVEF）为0.28±0.06,左心室舒张末径（LVEDD）为68±5 mm。患者植入三腔起搏器行心房感知,双心室起搏。结果术后体表心电图QRS波时限缩短至122±7 m s（P<0.01）,心功能平均提高1级。术后1月超声心动图显示LVEF增至0.36±0.06（P<0.05）,舒张期充盈改善,二尖瓣返流减少。结论双心室起搏可有效改善慢性心衰伴心室内传导阻滞患者近期的心功能。     

以心室收缩不同步作为心脏再同步化治疗筛选标准的疗效评价

目的:以心室收缩不同步作为心脏再同步化治疗的筛选标准,观察心脏再同步化(cardiac resynchronization therapy,CRT)治疗慢性心力衰竭(CHF)的临床疗效。方法:26例CHF患者经过严格的超声筛选后行CRT,全部患者均经冠状静脉窦植入左心室电极,电极位置尽量与超声提示的左心室收缩最延迟部位一致,术后随访(13.8±10.4)个月。结果:2例患者随访中死亡,其余24例患者治疗后心功能、患者活动度、心率变异性均明显改善(P0.05),左心室舒张末内径从(77.0±9.4)mm缩小至(68.7±10.2)mm(P0.05),左心室内各室壁收缩期达峰时间标准差从(48.4±17.9)ms减少至(30.2±18.6)ms(P0.05)。术后1个月左心室16,12及6节段达最小容积点时间的标准差和最大时间差均有明显减低(P0.05)。结论:CRT是CHF治疗的有效方法,术前应用常规超声心动图及组织多普勒成像技术(TDI)等多项技术来评价患者心室运动的失同步是CRT的有效筛选手段。     

阿普卡林对低氧—复氧乳鼠心肌细胞保护作用的机制

目的 探讨低氧／复氧(H／R)对心肌细胞内Ca^2+浓度([Ca^2+]i)的影响。以及阿普卡林减轻H／R过程中钙超载的作用。方法 采用SD大鼠乳鼠(n=80)进行心肌细胞培养，用Ca^2+荧光指示剂Fluo-3／AM负载30min。然后分3组：(1)正常对照组；(2)H／R组：细胞低氧30min／复氧30min：(3)阿普卡林组：先加入终浓度为100μmol／L的阿普卡林，再行低氧30min／复氧30min。于两个实验组接受低氧处理前及刚开始复氧时、复氧30min后用激光共聚焦显微镜技术检测3个组心肌细胞[Ca^2+]i的变化。实验重复8次，共观察24个细胞。结果 对照组心肌细胞[Ca^2+]i荧光强度和荧光光密度值较低，分别为645．5U，80．3U及O．5％，O．3％。低氧30min后复氧即刻，[Ca^2+]i荧光光密度值开始增加，复氧30min后[Ca^2+]i荧光强度和荧光光密度值显著增高(与对照组比较，P&;lt;O．01)。而阿普卡林组细胞内荧光光密度值显著低于H／R组(χ^2=20．51，P&;lt;O．01)。结论 心肌细胞H／R导致钙超载；而阿普卡林有明显减轻心肌细胞H／R时Ca^2+超载的作用，从而保护心肌细胞。     

兔骨髓间充质细胞分化为肌细胞的实验研究

目的　探讨兔骨髓间充质细胞 (BMSCs)体外分化为肌细胞的可能性。方法　穿刺法抽取成年新西兰兔双侧股骨骨髓 ,分离培养BMSCs ,5 -溴脱氧尿苷 (bromod eoxyuridine)标记 ,再经过 5一氮杂胞苷 (5 azacytidine)诱导或与乳鼠心肌细胞共培养 ,通过免疫细胞化学染色及透射电镜检查 ,研究其分化情况。结果　体外培养的BMSCs无论是在 5 aza诱导还是在与心肌细胞共培养的条件下 ,均有部分细胞表达横纹肌肌动蛋白 (α actin)。电镜检查显示分化后的细胞具有原始肌小节样结构。结论　成年兔BMSCs在 5 aza诱导或与心肌细胞共培养的条件下均可向肌细胞方向分化     

卡维地洛对外源性羟自由基诱导心肌细胞凋亡的影响

目的 :观察卡维地洛 (Carvedilol)对外源性羟自由基诱导心肌细胞凋亡的影响。方法 :采用培养的第 2代心肌细胞 ,随机分成 4组 :1.正常对照组 :仅用DMEM培养 ;2 .羟自由基组 :FeSO410 0 μmol·L- 1 +H2 O2 10 0 μmol·L- 1 ;3.卡维地洛组 :卡维地洛终浓度为 1μmol·L- 1 ;4 .卡维地洛 +羟自由基组 :卡维地洛 1μmol·L- 1 +FeSO4 10 0 μmol·L- 1 +H2 O2 10 0 μmol·L- 1 。观察心肌细胞存活率和形态学 ,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 :1.羟自由基组心肌细胞存活率降低 ,和对照组比较有显著性差异(P <0 0 5 ) ;卡维地洛 +羟自由基组细胞存活率较羟自由基组高 (P <0 0 5 )。 2 .羟自由基组凋亡率较高 ,明显高于对照组 (P <0 0 5 ) ;卡维地洛 +羟自由基组的细胞凋亡率显著低于羟自由基组 (P <0 0 5 )。3.羟自由基组凋亡心肌细胞呈特征性超微结构及AnnexinV+ PI- 荧光染色。结论 :卡维地洛能减轻外源性羟自由基诱导的心肌细胞凋亡。     

大蒜素对血管紧张素Ⅱ诱发人心房肌细胞钙电流和游离钙离子浓度的影响

背景：近年来发现血管紧张素Ⅱ可诱发心房电重构，而大蒜素具有相应的拮抗作用，可阻止或减轻心房电重构的发生。目的：观察大蒜素对血管紧张素Ⅱ诱发人心房肌细胞膜钙通道电流和细胞内游离钙离子浓度的影响。设计：以急性分离的人的心房肌细胞为实验对象，随机对照设计。单位：一所军医大学医院心内科。方法：实验于2003—06／2004—06在第四军医大学西京医院心脏内科实验室完成。选择在此期间接受心脏体外循环手术的先天性心脏病患者10例；男6例，女4例，平均年龄(15&;#177;6)岁。术中取患者右心耳标本送至实验室后，急性分离单个人心房肌细胞，实验分4组：对照组(不加任何干预措施)；血管紧张素Ⅱ组：加入终浓度为0．1μmol／L的血管紧张素Ⅱ；大蒜素组：加入终浓度为50μmol／L的大蒜素；血管紧张素Ⅱ+大蒜素组：大蒜素50μmol／L与血管紧张素110．1μmol／L同时加入。采用全细胞膜片钳方法记录L型钙电流；以钙荧光探针荧光指示剂负载，应用激光共聚焦显微镜技术，分别于加入干预药物后即刻与15min检测游离钙离子浓度变化。主要观察指标：各组人心房肌细胞L型钙电流峰值电流密度及钙离子游离钙离子的荧光强度变化率。结果：①血管紧张素Ⅱ组人心房肌细胞膜L型钙电流峰值电流密度明显高于对照组【(-12．77&;#177;1．61)，(-5．78&;#177;0．81)pA／pF．P&;lt;0．05)。②大蒜素组人心房肌细胞膜L型钙电流峰值电流密度与对照组比较，无明显差异【(-5．69&;#177;0．83)pA／pF，P&;gt;0．05】。③血管紧张素Ⅱ+大蒜素组人心房肌细胞膜L型钙电流峰值电流密度明显低于血管紧张素Ⅱ组【(-8．75&;#177;0．97)pA／pF，P&;lt;0．05)。④血管紧张素Ⅱ组人心房肌细胞内游离钙离子荧光强度和游离钙离子荧光强度变化率明显高于对照组和大蒜素组【(2610．1&;#177;112．6，(299．2&;#177;27．3)％；653．9&;#177;42．5，0；639．5&;#177;44．7，(-2．2&;#177;0．6)％，P&;lt;0．05】。血管紧张素Ⅱ+大蒜素组人心房肌细胞游离钙离子荧光强度和游离钙离子荧光强度变化率明显低于血管紧张素Ⅱ组【(1284．9&;#177;85．2，(96．5&;#177;8．4)％，P&;lt;0．05】。结论：大蒜素可拮抗血管紧张素Ⅱ致人心房肌细胞膜L型钙电流峰值电流密度的增加，拮抗人心房肌细胞内钙超载，产生减轻心房肌细胞电重构的作用。     

CARTO电解剖标测指导频发室性早搏的射频消融

目的评价CARTO电解剖标测系统指导消融治疗频发室性早搏的临床应用价值。方法应用CARTO电解剖标测系统在相关心室进行标测,构建心室三维电激动图并指导消融,治疗8例非器质性心脏病患者的顽固性频发室性早搏(右心室室性早搏6例,左心室室性早搏2例)。结果8例患者中均消融成功,放电次数2.2±1.7次。术前室性早搏总数24711±5612个/24h,术后0～5个/24h,患者症状基本消失。随访3～12个月,无复发病例,室性早搏≤10个/24h。结论应用CARTO电解剖标测系统标测和消融经药物治疗无效而症状明显的频发单形性室性早搏,可实时重建心腔三维结构,附以电生理信息,安全有效,定位准确可靠。