应用基于[~1H]NMR的代谢组学评价逍遥散的抗抑郁有效组分

目的以基于[1H]核磁共振(NMR)的代谢组学技术对慢性温和不可预知应激模型(CUMS)及逍遥散5个不同极性组分干预后的大鼠血浆进行代谢组学研究,分析干预后大鼠血浆中小分子代谢物的变化以确定逍遥散抗抑郁作用的有效组分。方法 42只SD成年雄性健康大鼠,分别ig给予石油醚萃取组分(XY-A)、30%乙醇提取组分(XY-B)、60%乙醇提取组分(XY-C)、95%乙醇提取组分(XY-D)和药渣水提组分(XY-E),每天1次,连续21 d,每天ig给药30 min后用夹尾等刺激建立慢性温和不可预知应激模型,每日1种,持续21 d。造模21 d后于大鼠麻醉后于股动脉取血,用NMR波谱仪检测小分子代谢物代谢轮廓,对所得到的图进行分段积分并归一化,然后用SIMCA-P软件进行分析。结果正常对照组与模型组沿第一主成分能够明显分开,与其它组分相比,XY-A组与模型组能够明显分开,且离正常对照组最近。与正常对照组相比,模型组亮氨酸/异亮氨酸、缬氨酸和3-羟基丁酸等含量明显下降;丙氨酸、胆碱、糖类明显上升。与模型组相比,XY-A组亮氨酸、缬氨酸和3-羟基丁酸等有不同程度的回调。结合载荷图,发现10种引起正常对照组与模型组分开的差异代谢物。与模型组相比,这些代谢物在XY-A组分组大部分有不同程度的回调。结论经过基于1H NMR的代谢组学技术研究表明,石油醚组分是逍遥散起抗抑郁作用的有效组分。     

黄芩苷滴丸成型工艺考察

目的:研究黄芩苷滴丸的制备工艺。方法:以滴丸的圆整度、滴制时的拖尾情况、溶散时限、硬度等为指标,对基质、药物与基质的配比、熔融的温度、滴制温度、冷却剂、冷却温度及冷凝柱的长度进行考察。结果:滴丸最佳制备工艺为最佳基质PEG 6000,药(黄芩苷-PVPK30固体分散体)-基质(质量比)(1∶5),熔融温度为80～90℃,滴制温度为85～90℃,冷凝剂为液体石蜡和植物油1∶1的混合物,冷凝液的温度在10℃左右,冷凝柱长为40 cm。结论:优选得到的黄芩苷滴丸成型工艺稳定可行。     

伊马替尼和十字孢碱对非小细胞肺癌A549细胞凋亡的影响

目的探讨伊马替尼（STI571）、十字孢碱（STS）对非小细胞肺癌A549细胞凋亡的影响。方法经STI571和STS处理后,通过Western印迹检测A549细胞内凋亡诱导因子（apoptosis-inducing factor,AIF）的变化,然后利用膜联蛋白（annexin）Ⅴ-FITC PI凋亡试剂盒,借助流式细胞仪,检测A549细胞凋亡;利用Hoechst染色检测A549细胞凋亡现象并通过免疫荧光技术检测细胞内AIF和线粒体的变化。结果 Western印迹检测结果显示,STI571和STS处理能够提高AIF在A549细胞内以相对分子质量为57×103的形式表达;流式细胞仪检测结果显示,STS处理组膜联蛋白ⅤFITC染色的细胞数随着STS处理时间的增加呈现先增后降的趋势,溴化乙锭PI染色的细胞数随着处理时间增加到20 h呈现增多的趋势;STI571处理组膜联蛋白ⅤFITC的染色结果和溴化乙锭的染色结果与对照组相比,变化均不显著;STI571与STS共同作用组膜联蛋白ⅤFITC染色细胞数少于STS单独处理组结果,溴化乙锭染色的细胞数明显多于STS单独处理组;Hoechst染色结果显示,STS处理组和STI571、STS共同处理组细胞核内染色质发生凝集;间接免疫荧光结果显示,AIF发生聚集且细胞内线粒体染色亮度减弱。结论 STS和STI571处理能够引起细胞内AIF分布形式上的变化,STS可引起A549细胞发生细胞凋亡,STI571处理不能引起细胞发生凋亡,但能引起细胞内AIF发生聚集并对STS引起的细胞凋亡有促进作用。     

玉屏风配伍剂量变化与有效成分的相关性研究

目的 研究玉屏风处方中黄芪、白术、防风配伍剂量变化与有效成分的相关性。方法 对玉屏风配伍剂量变化的4组整方和3组拆方分别先用水回流提取,然后将药渣再用80%乙醇回流提取,并采用分光光度法对水醇提取液中总黄酮、总皂苷、总多糖及总氨基酸进行测定。结果 有效成分的量是总多糖＞总氨基酸＞总黄酮＞总皂苷;在整方组中,总皂苷的量是黄芪、白术、防风配伍1∶1∶1＞2∶2∶1＞4∶4∶1＞3∶1∶1,总多糖、总氨基酸及总有效成分的量是黄芪、白术、防风配伍2∶2∶1＞1∶1∶1＞3∶1∶1＞4∶4∶1;在拆方组中,总皂苷的量是防风∶黄芪＞黄芪∶白术＞防风∶白术,总多糖、总黄酮、总氨基酸及总有效成分的量是黄芪∶白术＞防风∶白术＞防风∶黄芪。结论 随着玉屏风药材剂量的变化,水醇提取液总有效成分明显改变,但是,这种改变并不是药材中相应成分量的线性加减。     

南柴胡和北柴胡组成的逍遥散抗抑郁作用的1H-NMR代谢组学研究

目的 比较不同品种柴胡（南柴胡和北柴胡）组成的逍遥散的抗抑郁功效,探寻其对大鼠内源性代谢产物变化规律的影响。方法 采用慢性温和不可预知应激程序对大鼠进行为期4周的抑郁造模,在造模2周后分别ig给予由南柴胡或北柴胡组成的逍遥散（生药）46 g/kg水提取液、文拉法辛0.05 g/kg干预,每天1次,连续给药2周,观测动物行为学症状。应用核磁共振（¹H-NMR）方法分析大鼠血清内源性代谢产物的变化规律。结果 2种逍遥散和文拉法辛对抑郁大鼠行为学指标均有显著影响,与模型组比较差异显著（P＜0.05、0.01）。代谢组学研究结果显示,2种逍遥散和文拉法辛干预后,大鼠血清中异亮氨酸、氧化三甲胺、胆碱水平升高,而乳酸、N-乙酰糖蛋白、肌酸、苏氨酸及β-葡萄糖等水平降低,与模型组比较差异显著（P＜0.05、0.01）。2个逍遥散组对抑郁大鼠行为学指标的影响组间比较未显示统计学差异。结论 不同品种柴胡组成的逍遥散均具有明显的抗抑郁作用,但功效有所差别,即南柴胡组成逍遥散的抗抑郁效果及起效时间略优于北柴胡。应用行为学与代谢组学相结合的方法评价逍遥散抗抑郁功效具有准确性好、灵敏度高等特点。     

北柴胡不同农家栽培类型与有效成分相关性研究

目的:通过对北柴胡4个不同农家栽培类型的有效成分的分析,确定最佳的栽培类型。方法:采用分光光度法测定柴胡总皂苷的含量;采用柱前衍生化HPLC-UV法测定柴胡皂苷a、d的含量。结果:4种类型在有效成分含量上从高到低依次为细根少分枝型、细根多分枝型、粗根多分枝型、粗根少分枝型。而粗根的栽培产量高于细根。结论:栽培时应首选粗根多分枝型柴胡根。     

逍遥散治疗抑郁症代谢网络的模块划分与生物学机制研究

逍遥散的抗抑郁作用已经明确,应用代谢网络的功能模块划分方法,从功能模块角度探究逍遥散治疗抑郁症的生物学机制具有重要意义和价值.通过数据库收集逍遥散调节差异代谢物、差异代谢物相关的酶以及与抑郁症相关的蛋白,对逍遥散调节差异代谢物进行通路富集分析和交互分析,利用STRING工具构建差异代谢物相关的酶与抑郁症的蛋白网络,应用...     

基于NMR代谢组学技术的当归不同部位化学成分比较

目的拟对当归Angelica sinensis不同部位的化学成分进行比较。方法运用核磁代谢组学技术对当归的不同部位进行了代谢组学化学成分比较。并采用主成分分析、正交偏最小二乘法、单变量分析等统计方法对当归不同部位的代谢产物进行了比较分析。结果通过核磁图谱共指认出包括初级和次级代谢产物共36种。多种统计分析发现,当归头部量较高的成分包括缬氨酸、异亮氨酸等;主要分布于尾部的成分包括Z-丁烯基苯肽、cis-Z,Z′-3α,7α′,7α,3α′-dihydroxyligustilide等;主要分布于身部的成分包括色氨酸、阿魏酸松柏酯;在头部和尾部量均较高的成分包括天冬氨酸、Z-藁本内酯等;在3个部分无明显差异的成分包括丙氨酸、精氨酸等。结论采用的核磁共振指纹可同时表征当归中的初级和次级代谢产物,研究结果可为进一步揭示当归不同部位功效与化学成分的相关性奠定基础。     

高效液相色谱法测定接骨增效胶囊中柚皮苷含量

目的 :建立接骨增效胶囊中柚皮苷含量测定方法。方法 :采用高效液相色谱法 ,色谱柱为HyporsilODS柱 (4.6mm×15 0mm ,5 μm) ;流动相为甲醇 水 冰醋酸 (35∶6 5∶0 .3,pH3) ;紫外检测波长 2 83nm ;流速为 1.2ml·min-1。结果 :线性范围是 2～35 μg·ml-1;回收率为 97.0 1% ,RSD =3.11% (n =5 )。结论 :方法简便、快速、准确 ,可作为该制剂的质控方法。     

基于内切-1,4-β-半乳聚糖酶水解的黄芪糖指纹图谱的建立及不同种质资源黄芪的鉴别

目的:建立基于内切-1,4-β-半乳聚糖酶水解的黄芪糖指纹图谱,用以鉴别不同种质资源的黄芪。方法:以内切-1,4-β-半乳聚糖酶对不同种质资源蒙古黄芪(移栽芪和野生芪)和膜荚黄芪(移栽芪和野生芪)多糖进行酶解,通过荧光辅助糖电泳(FACE)获得糖指纹图谱,利用主成分分析进行数据处理,获得区分不同种质资源黄芪的差异性糖组分。结果:内切-1,4-β-半乳聚糖酶酶解产物中五糖和六糖可以作为区分蒙古黄芪移栽芪和野生芪的差异性糖片段,四糖和五糖可以作为区分膜荚黄芪移栽芪和野生芪的差异性糖片段,四糖、五糖和六糖可以作为区分野生蒙古黄芪与野生膜荚黄芪的差异性糖片段。结论:内切-1,4-β-半乳聚糖酶降解的多糖产物能很好的鉴别黄芪种(蒙古黄芪与膜荚黄芪)及生长方式(移栽芪和野生芪)。该研究结果可为黄芪药材的品质评价及活性寡糖的筛选奠定基础。