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目的 构建人His-ARPC2融合蛋白表达载体,并在原核细胞中进行表达与纯化.以研究其功能及鉴定与其相互作用的蛋白。方法 采用PCR方法从人肝cDNA文库扩增ARPC2基因编码区,使用常规酶切、连接方法将其重组至pET-14b载体中。对阳性克隆进行酶切、PCR和测序鉴定。转化BL21(DE3)大肠杆菌株,用异丙基β-D硫代半乳糖(IPTG)诱导融合蛋白表达,并利用Ni-NTA亲和层析纯化该融合蛋白。结果 所构建的人ARPC2的His融合蛋白表达载体是正确的,该载体可在大肠杆菌内高效表达,用Ni-NTA纯化获得了相对分子质量约36000的融合蛋白。结论 成功构建了人His-ARPC2融合蛋白表达载体,并在原核细胞中获得了高效表达和纯化,为进一步研究ARPC2的生理功能提供了重要的实验材料。 相似文献
92.
目的研究紫杉醇(PA)体外化疗对胰腺癌细胞凋亡抑制蛋白Survivin基因表达的影响。方法培养人胰腺癌细胞株SW1990,加入低浓度的PA,用流式细胞仪分别检测加药前和加药后24、48h的细胞凋亡率,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹技术(Western blot)检测Survivin mRNA和蛋白的表达。结果SW1990细胞给予低浓度的PA后,加药前和加药后24、48h的细胞凋亡率分别为(2.59±0.35)%、(14.75±1.29)%、(22.65±2.80)%;其Survivin mRNA的表达则分别比加药前提高了1.1倍和2.9倍;Survivin蛋白的表达分别增加了1.3倍和3.6倍。结论应用PA化疗可促使胰腺癌细胞内Survivin表达的增加,抵抗化疗诱导的细胞凋亡。 相似文献
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94.
95.
为了研究各型病毒性肝炎患者血浆可溶型GMP-140的含量变化,采用ELISA法检测了119例病毒性肝炎患者血浆GMP-140含量。结果,各型肝炎患者血浆GMP-140含量均较正常对照组增高,其中急性肝炎、慢性肝炎(慢肝)重度、慢性重型肝炎(慢重肝)与正常对照组比较有显著性差异;慢重肝、慢肝重度又较稳性肝炎和慢肝轻、中度显著升高;预后不同的慢重肝也存在显著性差异,好转组高于恶化组。动态观察表明,急性 相似文献
96.
97.
肿瘤干细胞的研究现状 总被引:2,自引:0,他引:2
干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的原始细胞, 目前已分离培养出多种组织来源的干细胞。同时, 人们亦发现恶性肿瘤进行性生长、转移和复发的特点与干细胞的基本特性十分相似, 继而推测肿瘤是干细胞分化增殖失调而产生的异常组织, 并提出了肿瘤发生的干细胞学说 [1]。近期的研究已从血液系统肿瘤、乳腺癌及脑部肿瘤中初步分离出肿瘤干细胞 [2-5], 为这一理论提供了有力的证据。1 肿瘤干细胞肿瘤干细胞的观念并非新生事物。早在四十多年前, 研究者就发现了它们可能存在的迹象。当时观察到只有 1%的白血病细胞可以在培养皿中生… 相似文献
98.
组胺H_3受体激动剂(R)-α-methylhistamine在离体豚鼠输精管平滑肌上的效应表现为两个时相。在10~(-10)~10~(-7)mol/L范围内,aMeHA浓度依赖性地抑制电场刺激诱发输精管平滑肌的收缩。当浓度增加至10~(-6)和10~(-5)mol/L时,αMeHA上述抑制效应减弱,并转为增强平滑肌收缩的效应。当存在扑尔敏(10~(-6)mol/L)时,αMeHA 相似文献
99.
应用彩色多普勒检测新生儿脑血流首都儿科研究所(100020)赵逸,秦柔嘉多普勒超声是一种无创、简便了解新生儿脑血流状态的方法。1979年首先由Bada应用低频经颅多普勒技术检测了窒息新生儿的脑血流发现其阻力指数(RI)降低[1]。但由于检测方法的缺陷... 相似文献
100.
目的:研究严重烫伤后血IL-6和IL-1α对中性粒细胞(PMN)凋亡的影响。方法:复制30%体表面积Ⅲ度烫伤大鼠模型;分离PMN,TUNEL荧光标记,流式细胞仪分析细胞凋亡;PMNcaspase3活性以荧光免疫吸附酶法测定;血清IL-6和IL-1α水平以酶联免疫法测定。结果:血清IL-6水平(μg/L)在伤后各组(3、6、12、24、48h依次分别为9.14±1.16、12.49±1.14、3.01±0.75、1.41±0.28和1.56±0.43)和IL-1α水平(ng/L)在伤后3、6、12h组(90.08±8.39、320.93±14.48和47.84±5.19)均分别显著高于伤前对照组IL-6(0.24±0.07)和IL-1α(27.65±4.86)水平(P<0.05);伤后各组PMN凋亡率(%)按时点依次为9.89±2.00、4.98±1.35、1.31±0.72、2.49±1.87和6.88±1.13显著少于伤前组13.66±3.88(P<0.05);PMNcaspase-3的活性测定结果与PMN的凋亡表现相一致。结论:大鼠烫伤后外周血PMN凋亡明显延迟;IL-6和IL-1α等细胞因子是重要的影响因素,减少细胞内caspase-3的激活可能是其机制之一。 相似文献