肝癌靶向性超抗原表达载体的构建与鉴定

目的：设计并构建受AFP基因顺式作用元件调控，并经减毒处理的肝癌特异性超抗原表达载体。方法：用新设计的引物作PCR扩增截短的AFP基因启动子和增强子、linker-CD80tm和SEA（D227A）。将上述片段与逆转录病毒载体pLXSN的多克隆位点连接，构建成为AFP基因顺式作用元件调控的肝癌特异性减毒超抗原表达载体[pLXSN SEA(D227A)-Linker-CD80tm]，并用软件对其开放读框进行分析。结果：成功克隆了截短的AFP基因启动子、增强子、linker-CD80tm和SEA（D227A）。将上述序列连接到逆转录病毒载体pLXSN的多克隆位点，酶切鉴定和DNA序列分析无误。结论：AFP基因转录启动元件修饰的SEA表达载体，在基因转录水平定量、定向、特异性调控强有力的细胞和体液免疫活化剂（SEA），为下一步将其作为基因疫苗治疗肝癌奠定了基础。     

胃肠道间质瘤的临床研究现状

胃肠道间质瘤（gastrointestinal stromal tumors，GIST）是一组来自胃肠间质组织的恶性肿瘤，与消化道上皮性肿瘤相比，间叶肿瘤所占比例较低，约占胃肠道肿瘤的3%左右[1]。但在消化道间叶性肿瘤中，GIST是胃肠道最常见的间叶源性肿瘤。该病病灶多位于肠系膜、网膜与胃肠道上，在中老年人群中发病率较高[2，3]，且男性与女性发病率并无显著差异。根据《中国GIST病理共识意见》，GIST是一种间叶源性肿瘤，其在组织学上主要由多形性、上皮样或梭形细胞以弥散状或束状排列，在免疫表型上有功能未知蛋白（DOG1）、巢蛋白及c-Kit蛋白（CD117）表达，在遗传学上有血小板衍生生长因子受体A（PDGFA）与频发c-Kit基因突变，且其存在光谱生物学行为。在分子靶向药物与免疫组化技术于临床中的应用日益广泛背景下，GIST诊断与治疗的方法也在逐渐改进[4]，然而如何通过探究促使其治疗效果进一步得到提高，是现阶段众多医生与广大患者极为关注的问题。本文对GIST最新研究情况展开综述。     

肝癌靶向性超抗原基因疫苗的设计和预测

目的：探讨AFP顺式作用元件调控的肝癌特异性减毒超抗原疫苗(SEA(D227A)—Linker—CD80tm)设计的合理性。方法：应用核酸和蛋白质分析软件Cene Construction Kit2.0、ANTHERPRO5.0、JAMBW1.1和www.expasy.com网站提供的方案，分析重组体的开放读框以及融合蛋白的可及性、柔性、抗原性和疏水性，并作了跨膜区和二级结构模拟。结果：重组体的转录受AFP顺式作用元件调控，Linker所在部位柔性高，可及性弱，不改变两侧蛋白分子的抗原性和疏水性。融合蛋白表达后，被CD80tm锚定于肝癌细胞表面，超抗原部分(SEA)表达在细胞膜外，二级结构预测Linker不改变蛋白结构，完全符合作者设计疫苗的初衷。结论：重组疫苗设计合理，特异性高，融合蛋白有很大可能保留了SEA和CD80tm的理化特性，为进一步的实践操作提供了可靠的理论基础。     

腹腔镜疝修补术——中老年腹壁疝患者的福音

夏季是皮肤病的高发季节。其中有一部分患者是因为睡凉席而致，医生称这种皮肤病为“凉席皮炎”。     

亲体部分小肠移植1例报告

我科于2004年5月成功施行了1例亲体部分小肠移植，现已术后7月余，患者情况良好。受者，男，17岁，因绞窄性小肠梗阻行大部小肠及右半结肠切除，残余小肠约20cm。进食后即腹泻，便为未消化食物，依赖胃肠外营养（TPN）生存。O型血，全身重要脏器功能良好。CMV、EB病毒学检查阴性。经TPN支持，术前各项营养指标达正常水平。供者，患者母亲，41岁。自愿为受者捐献部分小肠。CMV、EB病毒学检查阴性；全消化道及肠系膜上动脉造影示小肠解剖正常，血管分布良好。O型血，HI，A配型与其子半数相符。     

消化系肿瘤分子影像诊断的研究进展

消化系肿瘤具有高发病、高死亡的特点,而现有检查手段难以实现早期、准确地诊断.分子影像以分子而非解剖结构为对象,提升检查的灵敏及特异性.消化系肿瘤分子影像涉及的成像方法包括光学内镜、闪烁扫描成像、磁共振、超声等.抗体、多肽、适体等均可作为特异性配体,经显像基团标记成为探针,实现对肿瘤细胞或间质的特异性结合及成像.这类技术不仅用于肿瘤早期诊断,还可协助肿瘤分期,指导治疗.随着新仪器及探针的开发,以及多元化显像模式的发展,分子影像已逐渐完善并从实验室进入临床,使更早期、全面、准确诊断消化系肿瘤成为可能.     

5HRE强化的肝癌靶向性自杀基因载体的构建

目的设计并构建5个拷贝的缺氧反应元件(5HRE)增强子和甲胎蛋白启动子(AFPp)联合调控的自杀基因硝基还原酶(NTR)真核表达载体。方法设计引物作重叠PCR从大肠杆菌中克隆融合有6个组胺酸基因标签(6his-tag)的自杀基因NTR,用合成的HRE寡核苷酸单链退火,多次重组克隆构建5HRE。将NTR基因、5HRE和AFPp与酶切去除了巨细胞病毒即刻早期启动子(Pcmvie)的pIRES2-EGFP载体重组,构建携带5HRE、AFPp和NTR基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-5HRE-AFPp-NTR。结果成功克隆了融合6his-tag的NTR基因,NTR基因与Genbank公布的序列一致。成功合成了5HRE,测序与预期相符。将上述片段和AFPp重组到去除了Pcmvie的pIRES2-EGFP载体上,酶切鉴定和DNA序列分析无误。结论成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-5HRE-AFPp-NTR,为下一步的体外实验奠定了基础。     

迟发性创伤性膈疝致胃坏死1例报告

患男 ,2 0岁。以左上腹疼痛伴恶心、呕吐 2 d,于 2 0 0 3年 5月 2 7日收入院。2年前左胸背部刀刺伤后行清创缝合术 ,此后经常出现左上腹不适 ,尤以饭后明显 ,曾按“慢性胃炎”给予对症治疗 ,症状略有缓解。 2 d前饱食后出现左上腹绞痛 ,伴频繁呕吐 ,呕吐物为咖啡色胃内容物。查     

秋冬季节警惕"下肢卒中"

“下肢卒中”是下肢动脉硬化闭塞症导致的急性下肢动态闭塞的俗称，医学上把动脉硬化导致的全身血管的阻塞性疾病统称为动脉硬化闭塞症。     

ELISPOT技术在抗肿瘤疫苗研究中的应用

在肿瘤疫苗治疗前后，如何准确的定量，定性判定肿瘤抗原特异性T细胞反应，评价疗效，是影响抗肿瘤疫苗发展的关键，ELISOPT法是近年来逐渐建立起来的一种通过检测细胞因子评价T淋巴细胞功能和特异性的新方法，它能够对T淋巴细胞直接进行检测，不需要体外扩增，特异性，敏感性都有所提高，经过可行性分析和多中心对比研究，该技术不仅可用于监测肿瘤疫苗的疗效，也能用来鉴定肿瘤抗原表位，很有可能在完成的与其他方法的比较后ELISPOT将会成为定量分析肿瘤或病毒特异性的T细胞反应的首选。