抑癌基因RASSF1A在结肠癌中的表达研究

目的探讨抑癌基因Ras相关区域家族1A（RASSFlA）基因在结肠癌组织以及相应正常结肠组织中的表达并分析其表达与结肠癌临床病理因素之间的关系。方法采用免疫组织化学SP法和Western blot法检测34例结肠癌手术标本和相应的正常结肠组织中RASSFlA蛋白的表达水平,应用RT-PCR法检测RASSFlAmRNA在结肠癌和正常结肠组织中的表达情况。结果①免疫组织化学法结果：结肠癌组织中RASSFlA蛋白表达阳性率明显低于其在正常结肠组织中的表达阳性率[35．3％（12／34）比97．1％（33／34）,P〈0．05]。结肠癌组织中RASSFlA蛋白的表达与肿瘤分化程度和TNM分期均有关（P〈0．05）,即高、中分化及TNM分期较低（Ⅰ＋Ⅱ期）者的RASSFlA蛋白表达阳性率较高P〈0．05）。②Western blot法结果：在34例结肠癌患者中RASSFlA蛋白表达水平明显低于其在相应的正常结肠组织中的表达水平[0．3168＋0．0196比0．9144±0．1776,P〈0．05];该结果与RT-PCR法检测到的RASSFlAmRNA表达情况基本一致[0．1589±O．2237和0．5723±0．1939,P〈0．05]。结论RASSFlA基因的失表达可能在原发性结肠癌的发生、发展中起重要作用,检测RASSFlA的表达情况可为结肠癌的早期诊断提供帮助。     

中国人群主动脉夹层死亡危险因素meta分析

目的探讨中国人群主动脉夹层死亡的危险因素,为降低主动脉夹层患者的死亡率提供科学依据。方法检索1990年1月至2017年02月Pubmed、万方数据库、中文科技期刊全文数据库、中国期刊全文数据库(CNKI)收录的文献,应用Review Manager 5.3进行meta分析。结果共纳入文献24篇,累计病例831例,对照4750例。meta分析结果显示,中国人群主动脉夹层死亡的危险因素:神经系统阳性(OR=3.43,95%CI:2.45~4.80)、心包积液(OR=6.89,95%CI:3.54~13.41)、Stanford A型(OR=5.06,95%CI:2.73~9.38)、血压降低/休克(OR=3.87,95%CI:2.31~6.47)、高血压病史(OR=1.76,95%CI:0.99~3.13)、女性(OR=2.75,95%CI:1.79~4.22)、胸痛(OR=2.12,95%CI:1.67~2.70)、肾功能不全(OR=5.12,95%CI:1.87~14.06),而保护因素为舒张压偏高(OR=0.93,95%CI:0.89~0.97)和手术/介入治疗(OR=0.14,95%CI:0.10~0.20)。结论控制血压水平,预防神经系统、肾功能不全及心包积液等并发症,积极采取手术/介入治疗,修复主动脉内膜破口可以有效降低主动脉夹层患者的死亡风险。     

噬菌体随机十二肽库淘选及鉴定胃癌特异性结合肽

目的利用噬菌体展示随机十二肽库淘选出与胃癌BGC823细胞特异性结合的多肽,为寻找胃癌早期诊断和治疗的标志物打下基础。方法以胃癌细胞BGC823为靶细胞,胃黏膜永生化上皮细胞GES为吸附细胞,在常温下对噬菌体随机十二肽库进行三轮消减淘选,挑取单克隆、扩增纯化噬菌体,并经ELISA和免疫组化法初步鉴定噬菌体克隆亲和力;测序阳性克隆,合成荧光素FITC标记多肽,鉴定其与胃癌细胞和胃癌组织的亲和力及特异性。结果三轮淘选后,经ELISA法初步鉴定,随机挑选的20个单克隆中11号(GC-11)多肽对BGC823细胞亲和力最高。细胞、组织免疫荧光实验进一步证明,荧光素标记的多肽FITC-GC-11对BGC823细胞和胃癌组织具有高亲和力。结论利用噬菌体随机十二肽库成功淘选出与胃癌细胞BGC823和胃癌组织具有较高亲和力的多肽GC-11。     

诊断超声提高脂质体介导血管内皮生长因子基因转染的体外实验

目的 研究超声破坏微泡造影剂的方法提高脂质体介导的血管内皮生长因子(VEGF)基因在内皮细胞中转染率的可行性。方法 脂质体介导VEGF基因转染1h后，将6孔板中的内皮细胞每孔加入造影剂10μl或100μl或500μl，然后置于水槽中，暴露在超声下30s、60s、90s。2d后，用荧光显微镜观察标记基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达。结果 超声照射细胞30s和60s，EGFP基因表达显著提高，照射90s时杀死了大多数细胞。每孔加入微泡造影剂100μl时，其在超声作用下产生的空化作用提高了基因转染效率，造影剂为500μl时，细胞死亡率较高。结论 超声破坏微泡造影剂可以提高脂质体介导的基因细胞转染效率，为今后治疗基因的体内转染提供了经验。     

综合医院医务人员手卫生认知及影响因素调查

目的了解医务人员手卫生认知现状及其影响因素,为手卫生的科学管理提供依据。方法 2013年4月采用随机抽样的方法抽取某综合性三级甲等医院在岗医务人员,对其进行问卷调查,调查其近1个月手卫生实施情况及手卫生知识认知状况等。结果调查750名医务人员,共回收有效问卷652份。医务人员每天进行洗手及卫生手消毒的次数以10~19次居多,分别占46.62%和47.85%;每次洗手时间≥30 s者占30.52%,洗手后采用纸巾擦拭干手者占60.58%,日常工作中按六步洗手法进行手卫生者占57.21%。临床10种需实施手卫生的认知状况调查总体正确率为68.68%。医务人员主观认为的影响手卫生实施的因素有:洗手液、手消毒剂刺激皮肤(63.34%);工作环境中洗手池数量太少(41.10%);洗手液、手消毒剂、干手纸费用太高(38.96%)等。结论除加强手卫生宣教外,配置合理的手卫生设施和提高手卫生的规范性是综合医院进一步加强手卫生的重点。     

食管中下段鳞癌并发胃贲门平滑肌肉瘤1例报告

患者,男,72岁。以“上腹不适伴纳差、乏力1月”之主诉于2006年8月4日入我院。50年前行阑尾切除术。查体:上腹部剑突下轻压痛,余无异常。胃镜检查示:食管距门齿32~35cm处,食管前壁见一盘状肿块,顶部轻度溃疡,病变质硬,触之易出血。胃结构正常,胃角弧形,光滑,底部黏液池浑浊,胃液适中。胃窦黏膜花瓣状,红白相间,以白为主,胃窦血管网可见,胃扩张蠕动良好,幽门圆形,开闭自然,未见反流。取活检示:食管鳞状细胞癌级。上消化道钡餐透视示:食管弓下段可见一长约3.5cm的充盈缺损,黏膜中断破坏,管壁僵硬;胃呈钩型,少量空腹潴留液,位置中等,黏膜皱壁排列尚规则,未见明显增粗,紊乱,中断现象,未见明确龛影及钡斑,张力中等,蠕动,舒缩功能良好;幽门管居中,钡通过良好。胸部CT示:纵隔内见淋巴结影,但不大。腹部B超示:胆囊壁毛糙。肺功能正常。实验室检查:RBC3.2×10cm/L,Hb104g/L,WBC5.47×109/L,PC247×109/L,ALT59U/L,AST68U/L,凝血及乙肝表面抗原均阴性。遂于2006年8月8日在全麻下行经左胸剖胸探查术。术中见肿瘤位于左下肺动脉约2cm,长约3cm,局部稍膨大,质硬,...     

实验用猪胰腺和小肠组织总RNA提取及鉴定

目的:探讨提取猪胰腺和小肠组织总RNA并尽量减少RNA降解的方法,为胰腺和小肠组织高质量RNA的提取和进一步研究奠定基础。方法:取新鲜猪胰腺和小肠组织,RNA提取采用酸性一步法。结果:RNA琼脂糖凝胶电泳显示RNA没有明显降解。结论:胰腺和小肠组织RNA酶含量丰富,极易降解RNA。操作速度、RNA提取试剂盒的质量和防止RNA污染的综合措施是成功制备高质量RNA的关键。     

肝细胞癌的分子靶向治疗

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是人类第5大恶性肿瘤,死亡率极高.在我国,HCC的治疗已取得显著进展,但总体发病率和死亡率尚无明显改观,对于不适宜手术切除的晚期HCC,现有的药物治疗并不能改善患者预后,进一步提高疗效仍面临严峻挑战.所以,发现新的靶向治疗药物或新的靶点对HCC的早期诊断、化学预防以及治疗显得尤为重要.目前从对HCC发生、发展的分子机制的研究中,人类已发现了多个潜在分子靶点.这些靶点大部分为酪氨酸激酶受体激活的信号传导通路,包括:Raf/MEK/ERK,PI-3K/Akt/mTOR和Jak/Stat等.以索拉菲尼、舒尼替尼等为药物代表的多靶点、多激酶抑制剂治疗HCC更是受到高度关注.本文主要介绍HCC潜在的分子靶点以及常用靶向药物的临床进展.     

可调控的肝癌特异性基因治疗载体的构建

目的　构建新型AFP顺式作用元件调控的基因表达载体 ,检测该调控元件的特异性和可调控性。方法　PCR扩增截短的AFP基因启动子、增强子 ,将上述片段与含有报告基因强化绿色荧光蛋白基因的载体pEGFP 1的多克隆位点连接 ,构建成为AFP基因顺式作用元件调控的肝癌特异性EGFP表达载体 (pEGFP 1 EP)。用脂质体法将表达载体转染表达或不表达AFP的肿瘤细胞系 ,荧光显微镜观测重组AFP顺式作用元件的启动活性 ,并用流式细胞术检测全反式视黄酸对它的抑制作用。结果　成功地将AFP基因启动子、增强子克隆到报告基因载体pEGFP 1的多克隆位点 ,酶切鉴定和DNA序列分析无误 ,荧光显微镜观测证实EGFP能在AFP阳性肝癌细胞特异性表达 ,1× 10 -7M全反式视黄酸对其活性有明显的抑制。结论　AFP顺式作用元件修饰的基因治疗载体 ,在基因转录水平特异性调控目的基因的表达 ,为下一步将其作为肝癌基因治疗载体奠定了基础。     

腔内激光治疗静脉曲张的探讨

摘要：目的: 探讨腔内激光(EVLT)联合手术个性化治疗静脉曲张的综合方法。方法:下肢慢性静脉功能不全（CVI）285例（295条患肢），根据临床表现和双功超声、静脉造影，基于CEAP分期，分为A，B，C 3组，采取3种手术方式进行治疗。A组用单纯腔内激光闭塞术;B组用腔内激光加点式结扎；C组用股浅静脉包窄术加腔内激光加点式结扎。结果:全组曲张浅静脉均消失，皮肤颜色变浅，肿胀改善，溃疡愈合或缩小。结论:EVLT技术治疗下肢浅静脉曲张是有效的微创手术治疗方法，只要根据CEAP分期，通过标准化的诊断，选择好适应证，采用EVLT联合其他手术治疗原发性下肢深静脉瓣膜功能不全是可行和有效的。