高皂苷人参株系早期筛选的研究

通过PCR引物检测人参DNA特异性片段,快速、准确的评价低龄人参种质质量,加快人参育种进程。该研究基于个体之间的基因差异,设计7对引物,通过比对不同人参DNA的扩增图谱与皂苷含量相关性,成功得到一对特异性引物GC1,并采用L_(16)(4~5)正交试验优化其25μL PCR体系,各组分最佳配比为:DNA 2.60 mg·L~(-1),Mg2+1.44 mmol·L~(-1),d NTP 0.19mmol·L~(-1),引物0.32μmol·L~(-1),Taq 0.076 U·μL~(-1)。对GC1引物进行验证,在24株供试人参中有2株扩增出1 200 bp特异性条带阳性样品,2株阳性样品中9种单体皂苷及其加和值含量均较高。该特异性条带序列与甘油-3-磷酸脱氢酶同源性达99%。GC1可以作为一种高皂苷人参株系早期筛选鉴定方法的特异性引物,有利于加快人参育种进程。     

刺五加果水提物和醇提物对小鼠的镇静催眠作用及其机制

目的：探讨刺五加果水提物（ASF-WE）和醇提物（ASF-AE）对小鼠的镇静催眠作用,并阐明其可能作用机制,为刺五加果的开发提供依据。方法：分别制备ASF-WE和ASF-AE。120只雄性ICR小鼠随机分为空白对照组、地西泮（DZP）阳性对照组（DZP组）、不同剂量（4、8、16、32和64 mg·kg^-1） ASF-WE组和不同剂量（4、8、16、32和64 mg·kg^-1） ASF-AE组,每组10只,连续给药5 d,记录各组小鼠自主活动次数,利用阈下催眠剂量戊巴比妥钠诱导睡眠实验记录小鼠入睡率,利用催眠剂量戊巴比妥钠诱导睡眠实验记录小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间,筛选出ASF-WE和ASF-AE的催眠剂量和亚催眠剂量。根据模型药的不同[模型药分别为5-羟色氨酸（5-HTP）、对氯苯丙氨酸（pCPA）和氟马西尼（FLU）],分别将雄性ICR小鼠40只随机分为空白对照组、模型对照组（5-HTP组和pCPA组）、ASF-WE＋模型药组和ASF-AE＋模型药组,每组10只;80只雄性ICR小鼠随机分为空白对照组、FLU组、DZP组、ASF-WE组、ASF-AE组、DZP+FLU组、ASF-WE＋FLU组和ASF-AE＋FLU组,每组10只;连续给药5 d,采用戊巴比妥钠诱导睡眠实验记录各组小鼠的睡眠潜伏期和睡眠时间,采用ELISA法检测小鼠海马组织中5-羟色胺（5-HT）和γ-氨基丁酸（GABA）水平。结果：与空白对照组比较,32和64 mg·kg^-1 ASF-WE组小鼠自主活动次数明显减少（P<0.05或P<0.01）,16、32和64 mg·kg^-1ASF-AE组小鼠自主活动次数明显减少（P<0.05或P<0.01）,16、32和64 mg·kg^-1ASF-WE组和ASF-AE组小鼠入睡潜伏期明显缩短（P<0.05或P<0.01）,睡眠时间明显延长（P<0.05或P<0.01）。与5-HTP组比较,ASF-WE＋5-HTP组和ASF-AE＋5-HTP组小鼠睡眠潜伏期明显缩短（P<0.01）,睡眠时间明显延长（P<0.01）,小鼠海马组织中5-HT水平明显升高（P<0.05）。与空白对照组比较,pCPA组小鼠睡眠潜伏期明显延长（P<0.01）,小鼠睡眠时间明显缩短（P<0.01）,表明失眠模型成功建立;与pCPA组比较,ASF-WE＋pCPA组和ASF-AE＋pCPA组小鼠睡眠潜伏期明显缩短（P<0.05）,睡眠时间明显延长（P<0.01）,小鼠海马组织中GABA水平明显升高（P<0.05或P<0.01）。与ASF-WE组比较,ASF-WE+FLU组小鼠睡眠潜伏期明显延长（P<0.05）,睡眠时间明显缩短（P<0.01）,小鼠海马组织中GABA水平明显降低（P<0.05）;与ASF-AE组比较,ASF-AE+FLU组小鼠睡眠潜伏期差异无统计学意义（P>0.05）,睡眠时间明显缩短（P<0.01）,小鼠海马组织中GABA水平明显降低（P<0.05）。结论：ASF-WE和ASF-AE均具有较好的镇静催眠作用,其作用机制可能与5-HT能和GABA能中枢神经系统有关。