胰酶消化后新生鼠成肌细胞生长方式与规律以及模拟转基因电穿刺激对冻存和复苏细胞的损害

目的：采用原代培养技术进行大鼠原代细胞的培养与增殖，并模拟基因转染中的电穿刺激，探讨大鼠成肌细胞在基因转染技术中可能的应用前景。方法：实验于2000—04／10在四川大学华西医院病理实验室完成。①选取SD新生鼠10只，消毒后切开皮肤，分离大腿肌肉，高浓度磷酸盐缓冲液浸泡，5min后剪碎组织块至1mm^3以下，加入胰酶使用液，37℃水浴消化，胎牛血清终止消化过程，弃上清。再加人生长培养基重悬细胞，置于CO2孵箱中进行接种。②弃去培养基，重新加入等量生长培养基，3-5d更换1次。显微镜下细胞若出现间隙或变圆即中止消化。细胞计数后按所需密度接种于培养瓶，1：2或1：3传代。③细胞的冻存与复苏：冻存液的配制比为二甲基亚砜：胎牛血清：Dulbecco改良的EWe培养基=1：4：5。消化细胞后离心去上清，将沉淀细胞移至冻存管内，加入冻存液，-80℃过夜，第2天取出后先行液氮保存，后迅速投入37℃水浴中振荡，使其1mln内完全溶解。收获进入对数生长期的细胞，1．5&;#215;10^6个／次，加入一次性电转杯内。电压0．3KV，电场强度0．5KV／cm，电容950μF，电阻250Ω条件下电击24ms。结果：①胰酶消化后新生鼠成肌细胞的生长方式：成肌细胞呈圆形，悬浮于培养液中，大约两三天开始贴壁生长，五六天后细胞几乎全部贴壁。②新生鼠成肌细胞的生长规律：胰酶消化五六天后，成肌细胞进入对数生长期，增殖明显加快，细胞间隙变窄，呈极性生长现象，数量可达1&;#215;10^6个／mL。传代培养可至20代以上，生长速度明显减缓。③模拟转基因电穿孔条件下对冻存和复苏细胞的损害：电穿孔后出现大量细胞碎片，约有一半左右细胞在一两天内死亡，10-14d后残留细胞开始增殖，贴壁生长。结论：以原代培养技术培养、冻存成肌细胞并模拟电穿孔刺激，大鼠成肌细胞的培养效率高、细胞胞膜稳定且存活周期长。提示成肌细胞是一种较理想的基因转染包装细胞。     

后腹腔镜输尿管上段切开取石术的经验及学习曲线

目的 总结后腹腔镜输尿管上段切开取石术的经验和改进方法。方法 2003年5月-2005年12月完成经后腹腔途径输尿管上段切开取石术20例。早期完成的一组10例中右侧输尿管上段结石4例，左侧输尿管上段结石6例，平均结石大小22mmm-（11-27mm）；后期完成的一组10例中右侧输尿管上段结石5例，左侧输尿管上段结石5例，平均结石大小23mm（12-30Imm）。结果 早期完成一组中1例因术中出血改行开放手术．1例发生双J管移位而漏尿。后期完成的一组无并发症发生，手术时间较前一组明显缩短。结论 对于较大的、嵌顿的输尿管上段结石，后腹腔镜输尿管切开取石术安全、有效；通过不长的学习曲线，对于有选择性的病例，可以考虑作为第一线的治疗方法。     

睾丸扭转后激发细胞介导的自身免疫反应

目的 :观察大鼠睾丸扭转后能否激发迟发型超敏反应 (Delayedtypehypersensitivity ,DTH) ,以此来探讨睾丸扭转后机体的自身免疫反应。方法 :通过建立大鼠睾丸扭转模型 ,观察足垫反应来评估睾丸扭转后DTH。结果 :大鼠睾丸扭转后能诱导出足垫反应 ,但是 ,环孢素A和切除扭转的睾丸能够明显抑制大鼠睾丸扭转后的足垫反应。结论 :睾丸扭转后睾丸抗原的持续存在能诱导DTH ,激发了针对睾丸抗原的细胞介导的自身免疫反应。     

老年人群血尿酸水平与代谢综合征各组分相关性研究

人们生活水平改善以及生活方式的改变,代谢综合征(MS)的患病率不断上升,迫切需要关注该病的预防,早期诊断和干预,减少伴随多种代谢紊乱而增加的心血管疾病危险因素,高尿酸血症是代谢综合征涉及的另一重要疾病状态,是心血管疾病的重要危险医素[1].研究系回顾性资料分析,探讨血尿酸水平与MS代谢综合征及各组分的关系.     

单纯性血尿患者的鉴别诊断及肾穿活检分析

目的:对单纯血尿患者进行鉴别诊断及肾穿活检,以阐明血尿在肾脏病变中的重要性.方法:相差显微镜和尿红细胞体积曲线进行血尿的鉴别诊断,对肾小球性血尿和混合性血尿的患者进行肾穿活检明确病理改变.结果:肾小球性血尿在单纯性血尿中的比例较非肾小球性血尿高,肾穿刺活检表明IgA肾病是肾性血尿第1位病因.结论:单纯性血尿患者的筛查十...     

地塞米松对哮喘大鼠气道炎症及CD4+ CD25+ 调节性T细胞的影响

目的 观察地塞米松对支气管哮喘(哮喘)大鼠气道炎症和CD4+ CD25+调节性T细胞(CD4+ CD25+ Tr)的影响,探讨地塞米松治疗哮喘的机制.方法 30只Wistar大鼠随机分成正常对照组,哮喘组,地塞米松组.计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数并分类,应用HE染色行肺组织病理学检查,流式细胞仪检测外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4+ CD25+ Tr的比例.结果 地塞米松组BALF细胞总数及淋巴细胞(Lym)、中性粒细胞(Neu)和嗜酸性粒细胞(Eos)百分率较哮喘组明显减少(P＜0.05,P＜0.01),与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).病理组织学显示:地塞米松组较哮喘组肺组织炎性细胞浸润明显减少.哮喘组PBMCs中CD4+ CD25+ Tr比例较正常对照组明显减少(P＜0.05),地塞米松组CD4+ CD25+ Tr比例较哮喘组明显增加(P＜0.05).结论 地塞米松可减轻哮喘大鼠气道炎症反应,其机制可能与促进CD4+ CD25+ Tr产生有关.     

姜黄素对大鼠肺间质纤维化影响的机制研究

Objective To observe the possible mechanism and inhibitory effects of curcumin on pulmonary fibrosis induced bleomycin in rats at the fibrosing stage. Methods 80 male Sprague-Dawley rats were random divided into 4 groups (20 rats in each group). Rats in the fibrosis model group, the prednisone group and the curcumin group were induced by instilled bleomycin through tracheal, rats in the control group with same volume normal saline. Since the 15th day after bleomycin administration, the curcumin group and prednisone group were given curcumin (300 mg/kg) or prednisone (5mg/kg) per day by intragastric administration, respectively. The normal control group and the model group were given 1% sodium carboxymethyl cellulose ( 10ml/kg). Six rats of each group were random sacrificed on the 21st, 28th, 42nd and 56th days after bleomycin administration. The histological changes of the pulmonary were evaluated by H. E and Masson dyeing. The expressions of transforming growth factor-β1 (TGF-β1), platelet-derived growth factor (PDGF) and hydroxyproline in the tissue of pulmonary were assessed by immunohistochemistry and digestion method. Results Pulmonary fibrosis and hydroxyproline level in the curcumin group were obviously reduced as compared with the model group on the 42nd and 56th day[42 d:1. 28 ±0. 61 vs 2. 28 ±0. 39,P <0. 01 ;(1.73 ±0. 22)mg/g vs (2.50 ±0. 37) mg/g, P <0.01;56 d:1.00 ±0.59 vs 1.73 ±0.36, P< 0. 05; ( 1.57 ± 0. 36) mg/g vs (2. 20 ± 0. 42) mg/g, P < 0. 01 ], and it was also lower than that in prednisone group on the 42nd day( P < 0. 05 ). The expression of TGF-β1 and PDGF in the curcumin group were obviously lower than that in the model group on the 28th, 42nd and 56th day[28 d:TGF-β1 :3642. 05 ±839. 31 vs 5067. 35 ±738. 39, P <0. 05 ;PDGF:2957. 55 ±739. 16 vs 4457. 75 ±568. 39, P <0. 05;42 d: TGF-β1: 2689. 73 ± 529.22 vs 4089. 50 ± 619. 37, P < 0. 01; PDGF: 2834. 46 ± 567. 16 vs 3239. 52 ±628. 26, P <0. 01 ;56 d:TGF-β1: 1968.57 ±408. 36 vs 2968.20 ±498.42, P <0. 01 ;PDGF: 1083.36 ±381.35 vs 2019. 40 ±412. 36, P <0. 01 ], which was lower than that in prednisone group on the 42nd and 56th day (42 d,TGF-β1 :3529. 07 ±981.35,PDGF:2618. 34 ±813. 34;56 d,TGF-β1 :2530. 83 ±439. 37,PDGF: 1738. 35 ±536. 62, Pall <0. 05 ) , and it had no obvious difference compared with control group on the 56th day ( P > 0. 05 ). Conclusion Curcumin could alleviate bleomycin-induced pulmonary fibrosis in rats at the fibrosing stage by inhibiting the expressions of TGF-β1 and PDGF.     

病友支持模式对血液透析患者焦虑抑郁状态的影响

目的探讨病友支持模式对初入血液透析患者焦虑、抑郁状态的影响。方法应用方便抽样法选取2015年11月~2017年11月行维持性血液透析并按照纳入排除标准入组的92例初入血液透析患者作为研究对象,再应用随机数字表,将其分为观察组(n=46)和对照组(n=46),对照组按照血液透析常规护理方式进行护理,观察组同时予以病友支持模式进行护理,干预前和干预后3个月,分别对2组患者的焦虑、抑郁状态进行评价。结果干预3个月后,2组SAS、SDS评分较护理前明显改善,且观察组的得分均低于对照组(焦虑自评量表得分:37.1±8.4比44.9±7.5,t=4.747,P0.001;抑郁自评量表得分:40.4±7.7比49.0±6.7,t=5.731,P0.001),差异有统计学意义。结论病友支持模式能有效改善初入血液透析患者的焦虑、抑郁状态,为其树立信心,积极应对透析治疗,值得临床推广。     

甲状腺癌24例病理分析

我科于1977～1986年间共收检甲状腺手术切除标本380例,其中甲状腺癌24例,占总数的6％。 一般资料(见附表)     

同床异梦应早醒

同床异梦应早醒石明有的人说：奇怪——现在日子过好了，家反倒不安分了，爱“出事”了。说这话的人一定不少，但亲口对我讲的是人称“中款”的瞿老板。说他“老板”，有些“文不对题”，因为他只是个校办工厂的小厂长，“老板”是工人们送他的雅号，也是对他的戏谑。说他...