儿童动脉缺血性脑卒中的研究进展

近年来，神经影像学的发展为脑卒中的诊断提供了可靠依据，脑卒中逐步被认为是儿童一个重要的致病、致死原因。儿童脑卒中的发病率要比以往想象的要多，且一半以上的儿童动脉缺血性脑卒中（AIS）幸存者中有认知或者运动残疾，危害性极大，需要引起临床医生的足够重视。本文就儿童AIS的流行病学、危险因素、病因和发病机制、诊断、治疗、预后及复发危险性进行较全面阐述，并指出了相关研究方向。     

用药安全五牢记

药物治疗给人类解除病痛,带来幸福,但同样也会给许多人造成药害,引起后遗症,甚至死亡。中国每年有250万人因用药或药物不良反应致病住院,其中高达20万人死于用药不当。事实上,多数问题不在于药物本身,而是选择或使用过程中不当引起的。     

小鼠趋化因子SLC的基因克隆及真核表达

次级淋巴组织趋化因子 (Secondarylymphoidtis suechemokineSLC)又称 6CKine、TCA 4,是重要的CC趋化因子成员 ,其组织分布主要是外周淋巴组织或器官 ,趋化体内多种淋巴细胞到外周淋巴组织或器官、刺激活化NK细胞增殖[1 3] 。基于其对多种效应细胞的趋化和调节作用 ,国外已开展SLC在肿瘤、急慢性感染性疾病及过敏性疾病等方面的应用研究 ,我们在实现了人SLC在大肠杆菌的原核表达基础上 ,进一步探讨鼠SLC在真核细胞表达 ,应用于SLC生物学活性及肿瘤基因治疗研究。1　材料与方法1 1　载体、菌株及主要试剂　pMD18 Tvector购自大连…     

小泛素样修饰蛋白对α-突触核蛋白线粒体亚细胞定位及α-突触核蛋白经泛素系统降解的影响

目的 探讨α-突触核蛋白(α-synuclein)的小泛素样修饰蛋白1(small ubiquitin-like modifier1,SUMO-1)化修饰对α-synuclein蛋白亚细胞线粒体定位及α-synuelein蛋白经泛素系统降解的影响.方法 构建野生型、A53T突变型和缺失SUMO-1互作氨基酸的K96R突变型α-synuclein真核表达质粒.将野生型、A53T突变型和K96R突变型α-synuclein真核表达质粒分别转染HEK293细胞;在转染后48 h通过应用线粒体染色剂和激光共聚焦技术,观察野生型、A53T突变型及缺失SUMO-1修饰的α-synuclein蛋白的亚细胞线粒体定位和蛋白聚集情况.在转染后48 h应用anti-ubiquitin抗体进行Western印迹分析,明确野生型、A53T突变型及缺失SUMO-1修饰的α-synuclein蛋白泛素化程度有无差别.结果 将构建所得EGFP-α-synuclein-WT、EGFP-α-synuclein-A53T、EGFP-α-synuclein-K96R真核表达质粒经双酶切鉴定及DNA测序证实;激光共聚焦结果显示野生型、A53T突变型、K96R突变型α-synuclein蛋白均广泛分布于细胞质和细胞核中,以细胞质为主,野生型、A53T型细胞可见绿色荧光物质在胞质积聚,形成强荧光斑块,K96R型胞质内绿色荧光物质聚集少;野生型、A53T突变型、K96R突变型α-synuclein均与线粒体存在共定位,A53T突变型、K96R突变型α-synuclein在SUMO-1修饰或缺失的情况下对α-synuclein蛋白的线粒体亚细胞定位无明显影响.Western印迹结果显示转染缺失SUMO-1互作氨基酸的K96R突变型α-synuclein真核表达质粒组的细胞泛素蛋白的含量与转染空质粒组相比无明显变化,转染野生型、A53T突变型α-synuclein真核表达质粒组HEK293细胞中泛素蛋白的含量减少.结论 α-synuclein基因过度表达及致病突变A53T对α-synuclein蛋白的线粒体亚细胞定位无明显影响;SUMO-1修饰对α-synuclein蛋白的线粒体亚细胞定位也无明显影响;SUMO-1对a-αsynuclein基因过度表达及A53T突变型α-synuclein细胞内泛素化蛋白数量产生影响.     

利用噬菌体展示技术研究功能基因组及其与酵母双杂交方法的比较

 近年来基因组测序工作已揭示了数以万计的新基因,但是这些基因序列的价值只有当这些数据被翻译成蛋白质功能的时候才能被了解。而蛋白质与蛋白质之间相互作用构成了细胞生化反应网络的一个主要组成部分,不仅可以从分子水平揭示蛋白质的功能,而且为我们更好地理解生命过程﹑疾病机制和新药开发等提供了一个很好的基础。当前随着人类基因组和众多生物物种全基因组测序的完成,功能基因组学（functional genomics）成为研究的主流,它是对基因组中包含的全部基因及其所翻译的蛋白质的功能加以解读和描述,尤其是大量未知基因的功能及其对应的蛋白质产物的功能。在研究功能基因组方面已有许多生物化学和生物物理方法,其中噬菌体展示（phage display technology,PDT）和酵母双杂交（yeast two-hybrid system,Y2H）是比较成熟的生物技术。噬菌体展示技术诞生于 1985 年,在抗体库展示方面取得了巨大的成功,也被用于研究蛋白质-蛋白质相互作用和未知基因克隆等多个分子生物学领域^[1]。酵母双杂交方法诞生于 1989 年,它被广泛用于研究功能基因组和蛋白质-蛋白质相互作用,但是噬菌体展示技术在研究蛋白质-蛋白质相互作用方面具有一些独特的优势^[2]。本文综述了噬菌体展示技术在克隆功能基因和研究蛋白质-蛋白质相互作用方面的最新进展,同时将噬菌体展示技术与酵母双杂交方法进行了比较。     

1,6-二磷酸果糖预处理对家兔急性肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察1,6-二磷酸果糖(FDP)预处理对急性肾缺血-再灌注损伤的保护作用。方法:新西兰大白兔27只,随机均分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(Ⅰ组)、1,6-二磷酸果糖预处理组(F组)。采用左肾切除右肾动静脉夹闭60 min再灌注180 min致肾损伤的模型,术前连续4d给予FDP。缺血-再灌注180 min后分别检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、肾组织丙二醛(MDA)水平及超氧化物岐化酶(SOD)活性,观察肾组织的病理变化及肾小管计分,并对3组进行比较。结果:与S组比较,I组的Scr、BUN、MDA水平明显升高(P0.05),SOD活性明显降低(P0.01)。F组的Scr、BUN、MDA水平均较Ⅰ组明显降低(P0.01或P0.05),而SOD活性明显增强(P0.01)。F组肾组织病理变化轻于Ⅰ组。结论:FDP预处理对兔急性肾缺血-再灌注损伤具有保护作用,该保护作用的机制可能与增强SOD活性,清除过多的氧自由基,减少MDA的生成有关。     

Caspase-9和caspase-3在创伤后应激障碍大鼠海马神经元的表达及意义

目的:探讨caspase-9和caspase-3在创伤后应激障碍(PTSD)大鼠海马神经元中的表达及意义.方法:采用国际认定的无连续单一应激(SPS)方法刺激大鼠建立PTSD大鼠模型,取SPS刺激后1、4、7、14、28 d组和正常对照组.应用免疫组织化学、免疫荧光双标、激光共聚焦显微镜技术和免疫印迹法检测caspase-9和caspase-3蛋白的表达.结果:与正常对照组相比,caspase-9活性于SPS刺激后1 d升高,SPS刺激后7 d再次上调并达到高峰,之后逐渐下降.Caspase-3活性于SPS刺激后7 d达到高峰,之后逐渐下降.结论:caspase-9和caspase-3共同参与了PTSD大鼠海马神经元凋亡的调控.     

肝脏天然免疫系统对HBV感染及肝脏免疫致病的新解释

近期研究表明，肝脏NK细胞、NKT细胞、γδT细胞占肝脏淋巴细胞总数的2／3左右，如此庞大的肝脏天然免疫淋巴细胞在乙型肝炎病毒(HBV)感染及其免疫致病中发挥何种效应，引起了学者们的高度关注。传统理论认为CD4^ T细胞和CD8^ T细胞在抗HBV感染及其引起的免疫损伤中起主导作用，但仅占肝脏淋巴细胞总数1／3的这类T细胞能否承担肝脏抗HBV免疫与损伤的全部职责，值得重新定位。     

HLA衍生肽诱导移植免疫耐受的机制

HLA衍生肽能诱导移植免疫耐受。其机制目前尚不清楚，本文将就阻碍TCR和MHC结合，降低CTL和NK毒性反应，T细胞无能，排除/凋亡，抑制血红素氧化酶活性。阻断细胞周期，诱导Th免疫偏离，阻断T细胞介导的抗体反应等方面作一综述。     

冲击波致伤作用实验研究进展

原发冲击伤是爆炸产生的冲击波直接作用于生物体而引起的。各种生物激波管和其它冲击波发生装置的研制大大促进了冲击波致伤作用的实验研究的开展。通过将多种动物、离体器官以及培养的细胞暴露于冲击波,获得了大量的原发冲击伤实验研究结果。作者在简述冲击波的基本物理学特征的基础上,着重概括了生物激波管研制和原发冲击伤实验研究方法及其主要进展。