临床肾脏学中表观遗传学的研究

表观遗传学(Epigenetios)是研究不涉及DNA序列变化,表型却发生可遗传改变的一门不同于遗传学的新学科,其研究内容包括DNA甲基化和组蛋白修饰等几个方面,任何一方面的异常都可能影响染色质的结构与基因表达.慢性肾脏疾病(Chronic kidney disease,CKD)是一种复杂性综合疾病,它受到遗传因素和表观遗传修饰的双重影响.尿毒症患者炎症、血脂异常、高同型半胱氨酸血症、氧化应激水平都可能导致整体DNA甲基化异常.目前,对于CKD的研究尚处于初期,本文就CKD相关的表观遗传学研究作一综述.     

蛋白质芯片技术及其在全基因组翻译后修饰分析中的应用

蛋白质芯片技术可用于研究蛋白质-DNA、蛋白质-配基和蛋白质与蛋白质之间的相互作用,是当前生物科学研究中的重要内容。近年来,运用蛋白质芯片技术对全基因组进行生物化学分析的应用取得令人瞩目的成就。现着重总结蛋白质芯片技术及其在全基因组翻译后修饰分析中的应用。     

终末期肾脏病患者外周血Th17、Treg细胞表达及其平衡关系的研究

目的 探讨终末期肾脏病患者外周血CD4+T淋巴细胞、Th17细胞及CD4+CD5+CD127-调节T细胞(Treg)变化及意义.方法 采用流式细胞术检测21例尿毒症患者(尿毒症组)、21例肾移植受者(移植组)和21例健康志愿者(对照组)外周血中Th17细胞和Treg细胞占CD4+T细胞的比例.结果 尿毒症组和移植组的Th17/CD4+T细胞的比例明显低于对照组(P＜0.05,P＜0.01);尿毒症组和移植组的Treg/CD4+T细胞的比例明显低于对照组(P ＜0.01,P＜0.01);尿毒症组的Th17/Treg细胞的比值明显高于对照组(P＜0.05,P＜ 0.01).结论 尿毒症患者外周血中存在Th 17/Treg失衡,Th 17/Treg失衡可能参与了患者的免疫异常从而导致尿毒症的发生和发展.     

人胰岛的分离纯化和功能评价

目的 应用Ricordi人胰岛分离技术分离和纯化人的胰岛,并进行功能和安全性的评价.方法 获得6例成人尸体胰腺组织供体,采用胶原酶消化法及密度梯度离心法分离和纯化胰岛,并分析胰岛的数量、纯度和活力.采用免疫荧光法分析胰岛内分泌细胞的组成和分布;检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌和胰岛移植后的动物血糖水平.并对分离胰岛的安全性指标进行评价.结果 分离纯化后的胰岛数量为(22.9±3.1)万IEQ,纯度为(59.0 ±8.9)%,活力为(89.0±3.0)%.免疫荧光显示,胰岛由4种内分泌细胞组成并呈正常分布.葡萄糖刺激胰岛素释放的刺激指数为8.1 ±4.0.胰岛移植于糖尿病裸鼠后,血糖在3 d后降至正常水平并维持超过30 d.分离胰岛样本的各项安全性指标在规定范围之内.结论 采用Ricordi人胰岛分离技术分离和纯化的胰岛在形态、结构、数量、纯度、活力、体内外功能以及安全性方面都达到临床胰岛移植的标准,为开展临床胰岛移植奠定了基础.     

蛋白质组学技术在癌症相关研究中的应用

寻找理想的表型生物标志物,阐明疾病发生、发展过程中起关键作用的蛋白质分子以用于癌症的早期检测诊断及预后评估一直是癌症研究领域的热点和难点。随着人类基因组测序的完成,癌症研究的重点从基因组学转移到蛋白质组学研究中,癌症研究中的差异蛋白质组学技术也飞快发展,极大推动了与癌症相关的差异蛋白质组学研究,本文综述了近年来蛋白质组学技术在与癌症相关研究中的一些应用。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中转录因子活性差异的分析

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种较常见的、反复发作并累及多器官系统的自身免疫性疾病,其发病机制至今仍未阐明.近期有学者开始用生物芯片通过对SLE基因表达谱的检测以期达到了解相关致病基因的动态变化,希望借此来阐明SLE患者淋巴细胞免疫调节功能紊乱的机制[1-2].     

流式细胞术和SSP-PCR法检测HLA-B27抗原的比较

目的分析流式细胞术（FCM）用于强宜性脊柱炎（AS）患者人类白细胞抗原B27（HLA—B27）表达情况的测定效果，同时以药物特异性聚合酶链反应（SSP—PCR）进行对照。方法采用FCM法检测74例临床疑似AS患者的HLA—B27，将二者结果进行分析比对。结果两种检测方法检测，结果符合率为95．9％，经Kappa值评价有很强的一致性（K=0．95），无统计学意义（P〉O．05）。结论FCM法是一种快捷、简便、高效的HLA—B27检测方法，适合于临床应用。     

肾移植后脑血管病危险因素

有资料显示，肾移植后10年内脑卒中的患病率是7．97％，包括缺血性脑卒中和出血性脑卒中，肾移植后脑出血比一般人群发生率高，且卒中后死亡率高。高血压、脑血管异常、贫血、免疫抑制剂、感染等危险因素，参与肾移植后脑血管疾病发病机制。肾移植后脑血管病的防治是肾脏科医生应该重视的临床问题。     

蛋白质组学在肾病研究中的应用

蛋白质组学的快速发展为肾病的研究提供了科学的理论依据,在肾损伤、糖尿病肾病以及肾小球肾炎等肾脏疾病的诊断方面发挥了重要作用,一些差异表达蛋白及其作用机制相继被发现,如细胞信号蛋白、跨膜蛋白和钙调蛋白等.了解这些表达机制,对肾病的诊断和治疗有重要意义.