人血管内皮生长因子165基因转染兔骨髓间充质干细胞的蛋白表达

背景：骨髓间充质干细胞是最好的组织工程种子细胞来源,含有血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor 165,VEGF165)不仅对血管再生和启动成骨修复有重要意义,其持续稳定的释放还能够提高新生骨的矿化程度,增强修复组织的力学性能。 目的：观察hVEGF165基因转染的兔骨髓间充质干细胞分泌血管内皮生长因子的蛋白功能。 方法：体外分离、培养兔骨髓间充质干细胞,纯化并鉴定兔骨髓间充质干细胞;免疫荧光法检测细胞表面标志;传代培养后的骨髓间充质干细胞以pcDNA3.1-VEGF165质粒和脂质体1∶3比例的混合液转染,并分为3组：转染组应用pcDNA3.1-VEGF165转染细胞,空载体转染组应用pcDNA3.1-空载体转染,未转染组不处理。通过ELISA和Western-blot检测转染后细胞中外源性血管内皮生长因子的表达。 结果与结论：转染组与其他两组比较,VEGF165蛋白含量显著增高,差异有显著性意义(P < 0.05),但空载体转染组与未转染组之间差异无显著性意义(P > 0.05),转染组不同时间点之间VEGF165蛋白含量差异均有显著性意义(P < 0.05),hVEGF165基因转染的骨髓间充质干细胞能成功分泌VEGF165蛋白。提示采用基因转染技术可将hVEGF165基因转染到骨髓间充质干细胞中并可有效表达具有生物活性的VEGF165。     

应用HPV和液基细胞筛查内蒙古杭锦旗宫颈病变的研究

评估宫颈癌筛查方法,探讨少数民族地区宫颈病变发病情况。方法:2010年3月24日～2010年3月30日,在当地政府大力支持下,由当地妇幼保健院组织常住鄂尔多斯杭锦旗2013名年龄在25-65岁已婚有户籍的妇女进行宫颈癌筛查。采用第二代杂交捕获人乳头瘤病毒(HC-Ⅱ)和宫颈薄层液基细胞学(TCT)检测,对宫颈细胞异常和HC-Ⅱ阳性者进行阴道镜检查,阴道镜异常者行多点活检或宫颈管诊刮术,以病理学诊断为金标准。比较3种方法的检出率,评价TCT,HPV的诊断价值。结果:2013例受检者中,TCT异常患者258例,占12.82%;HPV-DNA阳性者,481例,占23.89%,在阴道镜下行多点活检,病理结果 CINⅠ以上者191例,占9.49%.TCT和HPV均阴性者,属于无病理改变。TCT(-),HPV(+)者中≥CINⅡ的检出率13.33%(2/15),TCT(+)和HPV(+)同时存在的病例中,CINⅡ的检出率最高占39.32%(46∕117),仅TCT(+)而HPV(-)者,占13.60%(8/59),8例均为CINⅡ,无原位癌和浸润癌发生。P<0.05差异有统计学意义。结论:持续的HR-HPV感染与宫颈病变的演进有关,TCT联合HC-Ⅱ是宫颈癌筛查最有效的方法,尤其对宫颈高度病变,可以有效的预防宫颈癌的发生。     

人血管内皮生长因子165基因转染兔骨髓间充质干细胞的蛋白表达

背景：骨髓间充质干细胞是最好的组织工程种子细胞来源,含有血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor 165,VEGF165)不仅对血管再生和启动成骨修复有重要意义,其持续稳定的释放还能够提高新生骨的矿化程度,增强修复组织的力学性能。 目的：观察hVEGF165基因转染的兔骨髓间充质干细胞分泌血管内皮生长因子的蛋白功能。 方法：体外分离、培养兔骨髓间充质干细胞,纯化并鉴定兔骨髓间充质干细胞;免疫荧光法检测细胞表面标志;传代培养后的骨髓间充质干细胞以pcDNA3.1-VEGF165质粒和脂质体1∶3比例的混合液转染,并分为3组：转染组应用pcDNA3.1-VEGF165转染细胞,空载体转染组应用pcDNA3.1-空载体转染,未转染组不处理。通过ELISA和Western-blot检测转染后细胞中外源性血管内皮生长因子的表达。 结果与结论：转染组与其他两组比较,VEGF165蛋白含量显著增高,差异有显著性意义(P < 0.05),但空载体转染组与未转染组之间差异无显著性意义(P > 0.05),转染组不同时间点之间VEGF165蛋白含量差异均有显著性意义(P< 0.05),hVEGF165基因转染的骨髓间充质干细胞能成功分泌VEGF165蛋白。提示采用基因转染技术可将hVEGF165基因转染到骨髓间充质干细胞中并可有效表达具有生物活性的VEGF165。     

地塞米松联合脂多糖诱导股骨头坏死模型的构建

背景：对于研究股骨头坏死的发病机制及治疗方法,建立与股骨头坏死病程相似的动物模型是非常重要的。 目的：观察地塞米松联合脂多糖诱导兔股骨头坏死的实验效果。 方法：健康雄性新西兰大白兔30只,随机分为模型组(n=20)和对照组(n=10)。模型组经耳缘静脉注射2次10 μg/kg的脂多糖,再肌肉注射3次地塞米松25 mg/kg,对照组注射同等剂量的生理盐水。 结果与结论：4周后,CT扫描显示模型组兔股骨头不同程度的骨密度不均匀。显微CT观察发现,模型组骨体积分数、骨矿物质密度、骨矿物质含量和骨小梁厚度均显著低于对照组,而骨小梁间隙高于对照组(P < 0.05)。组织学切片见模型组骨细胞陷窝空疏,脂肪细胞增多,部分血管栓塞,其中存活动物的骨坏死率和骨陷窝空虚率均明显低于对照组。说明地塞米松联合脂多糖可有效建立骨坏死模型。     

快速溶剂萃取GC-MS分析不同枣的挥发性成分

目的:建立枣中挥发性成分分析方法,鉴定其化学成分。方法:采用快速溶剂萃取(ASE)-气质联用(GC-MS)法分析不同枣中挥发性成分,利用峰面积归一化法测定各成分的相对百分含量。比较ASE和索式提取(SE)2种提取方法对大枣枣果中挥发性成分提取效果的差异,同时考察ASE法下不同溶剂(80%乙醇和石油醚)对挥发性成分提取效率的影响,探讨了提取物甲酯化处理后对提取挥发性成分的影响,并利用主成分分析比较了9种枣中挥发性成分的差异。结果:ASE法以80%乙醇为提取剂较为高效、安全。对河北行唐大枣甲酯化处理后发现更多的挥发性成分,比未甲酯化处理多18种成分。9种枣果中不饱和脂肪酸相对含量占45.3%~70.3%,其中十六烯酸(甲酯)相对含量最高,可达24.0%~38.3%。将9种枣果18个共有峰相对含量采用主成分分析评价不同产地的枣果品质,9种枣果得到有效区分,其中武邑马牙枣品质最佳,其次为武邑小枣、香河小枣和武邑大枣。结论:不同地区、不同品种枣果挥发性成分存在一定的差异性。该实验可为开发枣资源提供参考依据。     

谢林教授治疗椎动脉型颈椎病经验采撷

目的:总结谢林教授辨治椎动脉型颈椎病的临床经验。方法:通过跟随谢林教授临诊和研习老师治疗椎动脉型颈椎病的病案,从病因病机、辨证辨病论治、治疗大法及组方遣药等方面总结谢林教授辨治椎动脉型颈椎病的经验,并附医案说明。结果:谢林教授认为椎动脉型颈椎病的病因病机关键是肾精不足,肝脾失调,痰浊阻络。对于本病应辨证结合辨病论治,治疗上以柔肝健脾、化痰通络为主,佐以补肾填精之法贯穿始终,并根据患者临床表现随症加减用药。结论:谢林教授治疗椎动脉型颈椎病经验丰富,特色突出,值得临床推广。     

《黄帝内经》血理论及研究

《黄帝内经》奠定了中医血理论的基础,为血证治疗提供了理论支持,但后世研究仍存在一定偏颇,对血的渊源未形成系统研究。因此,血的发生研究对补充《黄帝内经》理论有重要意义。此文以血理论发展的历史时期为线索,对《黄帝内经》血理论发生学、体系建立以及临床应用进行系统对比整理,尽可能丰富血理论的科学内涵,为解决现今临床实践中的问题提供不同视角。     

热消融不全后残存肝癌细胞HepG2生物学特性变化的实验研究

目的： 探讨热消融不全后残存肝癌细胞HepG2的生物学特性变化。方法：47℃热处理肝癌细胞株HepG2 5min,7.5min,10min,HepG2为正常对照组,倒置光学显微镜下观察热消融不全后残癌细胞的形态变化;（MTS法检测残癌细胞继续培养24h,48h,72h后的OD值,观察其增殖能力;Transwell法检测残留癌细胞迁移能力;残癌细胞进行单细胞培养10 d,观察克隆形成能力。结果：随着热处理时间的延长,发生凋亡的HepG2癌细胞增多;残留癌细胞在24h内的增殖能力增强,随后48h-72h时间段增殖速率降低;迁移能力随热处理时间延长增强,克隆形成能力随热处理时间延长减弱。结论： 热消融不全后残存肝癌细胞HepG2生物学特性发生了变化,在一定时间内增殖速度增快,随后恢复至正常,随着热处理时间的延长其迁移能力增强,但克隆形成能力则下降。     

剪切波弹性成像鉴别颈部良恶性淋巴结的诊断价值

【摘要】 目的 运用ROC曲线探讨剪切波弹性成像技术鉴别诊断良性与恶性颈部淋巴结的价值。方法〓对76例患者共120个颈部淋巴结术前进行常规超声检查及剪切波弹性成像检查。分析比较良性与恶性淋巴结之间剪切波弹性成像定量参数的差异。以病理结果为金标准,绘制剪切波弹性成像定量参数的ROC曲线并两两比较曲线下面积。结果〓弹性值比值、平均弹性值、最大弹性值的曲线下面积分别为:0.838,0.828,0.812,两两比较曲线下面积的差异没有统计学意义。结论〓剪切波弹性成像的三个定量参数均对颈部淋巴结具有鉴别诊断价值,三个定量参数具有同等的诊断价值。     

实验性大鼠2型糖尿病心肌病模型的建立

目的 建立能够模拟人2型糖尿病心肌病的大鼠模型.方法 24只SD大鼠,随机分为对照组12只,模型组12只.模型组大鼠高糖高脂饲料喂养10周,分别在第4、8周末腹腔注射链脲佐菌素20 mg/kg.对照组大鼠普通饲料喂养10周,分别在第4、8周末腹腔注射等量的生理盐水.于实验的第10周末检测各组大鼠的糖化血红蛋白(GHb),空腹血糖(FBG)和血脂等血液生化指标.剖杀大鼠,组织切片,H-E染色观察大鼠心肌的形态学改变.结果 模型组大鼠GHb和FBG明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组大鼠比较,模型组大鼠总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白升高;而高密度脂蛋白降低,差异有统计学意义(P＜0.05).H-E染色,模型组大鼠心肌细胞紊乱排列,细胞肥大,水样变性,形态杂乱扭曲.结论 高糖高脂喂食,链脲佐菌素小剂量多次腹腔注射,能够建立类似于人类的高血糖、高血脂症状的糖尿病心肌病大鼠模型.