99Tcm—survivinmRNA反义肽核酸制备及荷瘤裸鼠基因显像研究

目的制备99Tcm标记的survivinmRNA反义肽核酸（PNA）探针,并进行荷瘤裸鼠体内基因显像,研究其对肿瘤早期诊断的价值。方法化学合成survivinmRNA的反义、无义PNA,在5’端连上4个氨基酸[Gly一（D）Ala—Gly—Gly],形成1个类似N。结构的强螯合基团;为消除空间阻碍,引入1个1一氨基丁酸（Aba）作为隔离物,利用配体交换法进行99Tcm标记。用HPLC及ITLC对标记物的标记率、放化纯进行鉴定。并对反义、无义组各5只人肺癌A549荷瘤裸鼠行99Tcm一survivinmRNA反义、无义PNA体内显像。注药后1,2和4h分别显像,利用ROI测得肿瘤与对侧组织的rr／NT比值。结果分析采用SPSS13．0软件进行成组t检验。结果99Tcm一survivinmRNA反义PNA即刻标记率为（95．48±1．92）％,放化纯〉95％,且标记物体外稳定性好,与血清保温24h后标记率仍〉85％。无义PNA标记率与之基本一致。99Tcm一survivinmRNA反义PNA在肿瘤组织内特异性浓聚,随时间延长,浓聚程度逐渐增加,1,2和4hT／NT值分别为2．70±0．28,3．44±0．35和4．21±0．63。无义PNA在肿瘤组织中稍有浓聚,但在4h内变化不大,4h时T／NT值（3．12±0．50）与反义组差异有统计学意义（t=2．918,P：0．019）。结论99TcmsurvivinmRNA反义PNA即刻标记率高,稳定性好,无需纯化即可用于显像,在肿瘤组织中特异性浓聚,对肿瘤的早期诊断有潜在价值。     

99Tc-MDP与帕米膦酸二钠对MDA-MB-231细胞增殖及凋亡作用的对比研究

目的观察^99Tc-亚甲基二膦酸盐（MDP）与帕米膦酸二钠对人乳腺癌MDA-MB-231细胞生长和凋亡的影响及其作用差异.方法不同剂量^99Tc-MDP与帕米膦酸二钠注射液处理细胞,采用细胞计数及四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测MDA-MB-231细胞增殖;流式细胞仪观察细胞凋亡、检测细胞周期及凋亡相关基因bcl-2与bax的表达.结果50 μmol/L ^99Tc-MDP与帕米膦酸二钠处理MDA-MB-231细胞48 h即可抑制其增殖,细胞存活率分别为45.9%和64.0%,差异有显著性（P＜0.05）;50μmol/L^99Tc-MDP与帕米膦酸二钠均可诱导细胞凋亡,用药后大量MDA-MB-231细胞被阻滞于G0/G1期和S期,细胞凋亡率分别为9.59%和5.96%,差异有显著性（P＜0.05）;50 μmol/L^99Tc-MDP即可使MDA-MB-231细胞凋亡相关基因bcl-2表达明显减弱,200 μmol/L帕米膦酸二钠可使bcl-2表达明显减弱,二者对bax表达无影响.结论^99Tc-MDP及帕米膦酸二钠均可抑制MDA-MB-231细胞增殖及诱导MDA-MB-231细胞凋亡,并调控bcl-2的表达;^99Tc-MDP作用强于帕米膦酸二钠.