T淋巴细胞对人骨髓造血细胞体外扩增的负调节作用

采用抗CD3或抗CD8单克隆抗体的补体细胞毒方法体外清除人骨髓MNC(单个核细胞)中的T淋巴细胞和用流式细胞技术(FACS)分析细胞表面标志,观察人骨髓T淋巴细胞对造血细胞增殖的负调节效应.将MNC加入含多种造血生长因子的培养基进行液态扩增并检测其CD34+细胞绝对数、粒-巨噬集落(CFU-GM)和多向祖细胞集落(CFU-GEMM)形成能力.结果表明,抗CD3,抗CD8或抗CD3+抗CD8单抗清除T淋巴细胞的骨髓MNC,其细胞总数经造血生长因子刺激培养20天分别扩增了75.8,79.6和77.4倍,明显高于对照组(67.0倍).体外培养6天时CD8清除组CD34+细胞的扩增最高可提高17.82%.上述3个清除组的CFU-GM产率分别为173.67±18.90,165.33±26.58和170.33±21.50,对照组79.67±8.33.这3个清除组与对照组比较差异显著(P＜0.05).上述3个清除组的CFU-GEMM产率分别为431.33±34.56,370.33±42.10和386.67±10.02,对照组为177.67±26.86.这3个清除组与对照组比较P值分别为＜0.002,＜0.05和＜0.005.此研究结果提示骨髓中T淋巴细胞可以抑制造血细胞的体外扩增、CFU-GM和CFU-GEMM产率,其作用机制有待进一步探讨.     

原发性高血压病人α-adducin多态性与盐敏感性

原发性高血压病人α－ａｄｄｕｃｉｎ多态性与盐敏感性［英］／ＣｕｓｉＤ…∥Ｌａｎｃｅｔ·—１９９７，３４９·—１３５３～１３５７肾钠转运异常可能与高血压有关。Ａｄ－ｄｕｃｉｎ是发现于肾小管的一种α／β异二聚体蛋白，它通过肌动朊细胞骨架的变化调节离子转运...     

金荞麦提取物对WM239迁移的抑制作用及WM239与Huvec共培养体系N-Cadherin磷酸化的影响

目的:探讨金荞麦提取物对WM239细胞穿越内皮细胞过程中N-钙黏附分子的影响。方法:采用苏木素方法测定金荞麦提取物对HUVEC和WM239细胞增殖的影响,筛选合适的金荞麦提取物浓度;利用Transwell迁移实验,测定金荞麦提取物对WM239细胞迁移能力的影响;流式细胞术(FCM)测定金荞麦提取物对HUVEC和WM239细胞共培养体系N-cadherin表达的影响;免疫共沉淀实验测定金荞麦提取物对N-cadherin胞内段磷酸化及其与β-catenin结合的影响;Western blot检测金荞麦提取物对Src活化的影响。结果:金荞麦提取物浓度在25～100 mg/L之间对WM239和HUVEC的增殖无明显抑制作用。金荞麦提取物在此药物浓度范围内可对WM239细胞的迁移能力有较强的抑制作用。金荞麦提取物对共培养细胞N-cadherin表达量几乎没有影响,但可导致p-Src蛋白的表达减少,N-cadherin胞内段的磷酸化减低,引起N-cadherin与β-catenin的解离减少。结论:金荞麦提取物可抑制WM239的增殖和迁移能力,减少Src蛋白的活化,降低N-cadherin胞内段磷酸化水平及N-cadherin与β-catenin的解离。     

白藜芦醇的抗肿瘤效应机制

白藜芦醇是一种天然多酚类化合物,具有多种生物学作用,包括神经保护作用、心血管保护作用、抗炎及抗肿瘤作用等.近年来白藜芦醇抗肿瘤作用日益受到关注,其抗肿瘤机制可能是预防肿瘤的发生、延缓肿瘤的发展、促进肿瘤细胞凋亡及抑制肿瘤细胞的侵袭等.     

苏木素染色法在细胞介导的细胞毒效应中的应用

目的:建立苏木素染色测定免疫效应细胞介导的细胞毒效应的方法:。方法:采用苏木素染色法观察人贴壁肿瘤细胞系Hep2的增殖活性,测定了人NK细胞系NK92、NKL和YT对SGC7901、Hep2细胞的细胞毒效应,新西兰白兔CTL细胞对VX2细胞的细胞毒效应。同时与MTT比色法及CCK-8比色法进行比较。结果:NK92、NKL和YT三种效应细胞对SGC7901和Hep2细胞杀伤6h或16h后,在效靶比分别为10:1、5:1、2.5:1和1.25:1时,三种方法:所测结果:均具有良好的效靶关系,且杀伤趋势基本一致。6次苏木素染色法测定NK92对SGC7901和Hep2细胞的细胞毒效应结果:显示CV<8%,MTT比色法测定结果:CV<12%,前者具有更好的重复性。苏木素染色法和MTT比色法所测兔CTL杀伤效应结果:一致,线性关系明显。结论:苏木素染色法用于免疫效应细胞对贴壁肿瘤细胞系的细胞毒效应测定,具有特异、稳定、简便、经济等优点。     

梅毒患者外周血Th1/Th2类细胞因子mRNA表达及临床意义

为探讨Th1和Th2类辅助性T细胞在梅毒发病中的作用,我们以IFN-γ和IL-2代表Th1类细胞因子,IL-4和IL-10代表Th2类细胞因子,通过RT-PCR方法检测了一、二期梅毒患者和正常对照组外周血单个核细胞(PBMC)中Th1和Th2类细胞因子mRNA表达水平.     

水中涕灭威及其代谢产物高效液相色谱测定方法研究

涕灭威(Aldicarb),商品名 Temik,是一种高效、内吸、广谱性的杀虫、杀螨、杀线虫的氨基甲酸酯类农药。水中涕灭威(AS)残留量及其代谢产物涕灭威亚砜(ASO)、涕灭威砜(ASO_2)的测定方法,国内外报道的主要有气相色谱测定法和高效液相色谱测定法。本文采用活性炭富集水中痕量 AS、ASO、ASO_2,洗脱后进     

rhIL-6对血小板低下豚鼠的实验性治疗

IL-6是目前较有前途的促血小板再生的细胞因子之一,为了证实国产rhIL-6在该领域的应用价值,本文较系统地观察了rhIL-6对血小板低下豚鼠的治疗作用.通过抗血小板血清和致死剂量辐射两种方式分别建立了两种豚鼠血小板低下模型,发现rhIL-6可提高豚鼠外周血血小板数量,尤其是在致死辐射豚鼠模型中发现豚鼠死亡与血小板急剧下降有关,并可延缓豚鼠血小板的降低速率、延长其生存期提高生存率,提示rhIL-6确实是一种明显促进血     

重组人白细胞介素21表达条件的探讨

目的探讨重组人白细胞介素21工程菌诱导表达的最佳条件。方法用摇瓶发酵的方法探索不同诱导条件(诱导温度、诱导时间、接种量I、PTG浓度等)对目的蛋白质表达的影响。结果该工程菌表达目的蛋白质的最佳温度是42℃;高密度接种更有利于目的蛋白质的表达。结论建立了BL21/pET-30a(+)-IL21工程菌最佳诱导表达条件,为重组人白细胞介素21的制备奠定了基础。     

BRMS1 mRNA和CD44V6 mRNA在子宫内膜癌组织中的表达及意义

目的：探讨乳腺癌转移抑制基因 （breast cancer metastasis suppressor 1,BRMS1） mRNA和CD44V6 mRNA的异常表达与子宫内膜癌侵袭及转移的关系.方法：采用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）法,检测42例子宫内膜癌、12例子宫内膜不典型增生和 15例正常子宫内膜组织中BRMS1 mRNA和CD44V6 mRNA的表达情况,分析其与各种临床参数的关系.结果：1）子宫内膜癌患者的BRMS1基因表达率为37.5%,明显低于不典型增生的75.0%和正常内膜的86.7%;与临床分期（χ^2=4.978）、肌层浸润深度（X^2=5.299）及淋巴结转移（χ^2=4.200）均密切相关,P值均＜0.05; 2）子宫内膜癌患者的CD44V6基因表达率为69.0%,显著高于不典型增生的16.7%和正常内膜的0,P＜0.01; 与临床分期（X^2=5.802）及淋巴结转移（X^2=5.570）均密切相关,P值均＜0.05;3）BRMS1与CD44V6 mRNA的阳性表达率之间无相关关系,肯德尔相关系数为0.069,P＞0.05.结论： BRMS1和CD44V6 mRNA的异常表达是子宫内膜癌发生发展、浸润转移的重要分子学改变,同时检测两者可作为临床预测和评估其侵袭及转移的重要参考指标.