严重烧伤后肠道损伤与肠源性高代谢的关系

目的　探讨烧伤后肠道损害与“肠源性高代谢”的关系。方法　在建立严重烧伤加清洁肠道动物模型的基础上 ,将 96只Wistar大鼠随机分为烧伤对照 (B)组和烧伤加清洁肠道 (SDD)组。观察了伤后 0～ 10d大鼠静息能量代谢率(REE)的变化 ,同时检测了伤后 0、1、3、5、7、10d血中内毒素 (LPS)、肿瘤坏死因子 (TNF)和二胺氧化酶 (DAO)的含量 ,并进行相关分析。结果　烧伤后两组大鼠的REE、TNF、LPS和DAO均明显高于伤前 ,两组相比 ,SDD组的REE、TNF和LPS较B组均有不同程度的降低 ,而DAO则明显高于B组。相关分析显示 ,REE同LPS和TNF呈显著正相关 (r1 =0 .77,P <0 .0 5 ,r2 =0 .81,P <0 .0 5 ) ,与DAO相关不显著 (r >0 .0 5 )。结论　烧伤后肠源性高代谢与血中炎症介质含量呈正比 ,但肠道损伤程度加重并不引起代谢率相应增加 ,二者不存在线性关系     

食管鳞癌患者远处转移部位与预后的相关性及生存分析

目的:探讨食管鳞癌患者远处转移部位与预后的相关性及生存分析。方法:从SEER数据库中提取2010年至2015年共439例食管鳞癌伴远处转移患者的临床资料,回顾性分析比较食管鳞癌远处转移部位与预后的相关性,通过χ2检验比较两组变量的差异,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,Log-rank检验进行单因素分析,COX回归进行多因素分析。结果:肺转移、骨+肺转移、肝+肺转移患者预后较好;骨转移、脑转移、骨+脑转移、骨+脑+肝+肺转移患者预后较差。单因素分析显示:年龄、原发灶部位、T分期、手术情况、多器官转移情况与食管鳞癌远处转移患者的预后有关（P＜0.05）;多因素分析显示:年龄、手术情况与多器官转移情况是影响食管鳞癌远处转移患者总生存时间（OS）的独立危险因素。结论:食管鳞癌伴远处转移的患者整体预后较差,但年龄在60~69岁区间、接受手术治疗与较好的预后相关。仅单器官转移的食管鳞癌患者中,骨转移、脑转移患者预后较差;合并多器官转移的患者中,骨+脑转移、骨+脑+肝+肺转移患者预后较差。     

Effect of early enteral and parenteral nutrition on visceral ischemic lesion of rat burn model

AIM:To compare the effects of early enteral nutrition and early parenteral nutrition on ameliorating visceral ischemia and relieving free radical damage.METHODS:66 Wistar rats were divided into 3 groups:control group (C),parenteral nutrition group(PN) and enteral nutrition group(EN),PN and EN groups made up of 30% TBSAⅢ degree bum model,We delivered nutrient solution with same calorie and calorie-nitrogen ratio via vein or enteral tract respectively.Blood flow of liver,kidney and change of SOD of heart,liver and kidney at 6,12,24,48,72h after burn were tested.RESULTS:Tissue blood flow and SOD of EN group were higher than those of PN group in many phase(P&;lt;0.05-0.01).CONCLUSION:Early enternal nutrition can relieve the increase of visceral vascular permeability and damage of oxygen free radical.     

RNA干扰抑制缺氧诱导因子1α表达对缺氧内皮细胞通透性的影响

目的 了解RNA干扰技术特异性抑制缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达对缺氧血管内皮细胞通透性的影响.方法 利用质粒pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR构建针对人HIF-1α基因的RNA干扰表达载体.将VE细胞分为正常对照组、缺氧组(置于含体积分数1%O_2的混合气体环境中缺氧处理6 h)、转染组、转染缺氧组(转染载体后再进行缺氧处理).采用RT-PCR法检测正常对照组、转染组HIF-1αmRNA表达,采用蛋白质印迹法检测4组细胞HIF-1α蛋白表达.荧光分光光度计检测单层VE细胞的通透性.将上述缺氧处理替换为HIF-1α特异性诱导剂1 mmol/L二甲氧乙二酰甘氨酸(DMOG),分为DMOG组、转染DMOG组、正常对照组、转染组,采用蛋白质印迹法观察各组HIF-1α蛋白表达.除通透性检测数据用荧光强度值表示外,其他数据用密度比值表示.实验结果进行组间两两t检验.结果 正常对照组细胞HIF-1α mRNA相对含量为0.765±0.069,转染组细胞HIF-1α mRNA相对含量为0.093±0.007,组间比较,差异有统计学意义(t=16.696,P<0.05).转染缺氧组细胞HIF-1α蛋白含量为0.591±0.029,显著低于缺氧组(2.612±0.259,t=13.415,P<0.05);转染DMOG组HIF-1α蛋白含量为0.566±0.008,显著低于DMOG组(3.243±0.551,t=6.975,P<0.05).缺氧组单层血管内皮细胞通透性(41.6±11.1)较正常对照组(9.4±1.5)显著升高(t=6.238,P<0.05),转染缺氧组单层血管内皮细胞通透性(13.3±4.5)显著低于缺氧组(t=5.430,P<0.05).结论 采用特异性针对HIF-1α基因的RNA干扰技术,能有效抑制内皮细胞HIF-1α表达,并明显抑制缺氧引起的血管内皮细胞通透性增强.     

谷氨酰胺对烧伤后大鼠肠道损伤及炎症反应的影响

目的探讨谷氨酰胺对烧伤后大鼠肠道损伤及炎症反应的影响.方法采用30%体表面积Ⅲ°烧伤大鼠模型,将88只Wistar大鼠随机分为烧伤对照组和烧伤后补充谷氨酰胺(GLN)组.两组大鼠采用等氮、等热量的营养支持,GLN组每天给予1.0 g/kg GLN,对照组给予等量的甘氨酸.观察烧伤前及烧伤后第1、3、5、7、10天大鼠静息能量消耗(REE)的变化,同时检测烧伤后血浆二胺氧化酶(DAO)活性及内毒素(LPS)、肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素-1(IL-1)的含量.结果烧伤后两组大鼠的REE、DAO、TNF、LPS和IL-1均明显高于烧伤前(P＜0.01),GLN组REE、血浆DAO活性及TNF、LPS和IL-1含量均明显低于对照组(P＜0.05,P＜0.01).结论口服GLN能减轻烧伤后肠道受损程度,降低烧伤大鼠血中炎症介质水平,从而降低伤后机体高代谢反应.     

Rho激酶对严重烧伤大鼠血清诱导的肠黏膜上皮细胞调控机制的研究

目的:观察烧伤血清刺激下肠黏膜上皮细胞通透性的变化及Rho激酶信号转导通路所起的作用。方法:常规培养肠黏膜上皮CaCO-2细胞,分为正常对照组、烧伤血清组和烧伤血清6 h Y27632组,以FITC-albumin荧光强度检测法检测人肠黏膜上皮细胞在未烧伤、1、2、6、12、24 h时相点通透性变化指标;采用Western blot法检测人肠黏膜上皮细胞中肌球蛋白轻链(MLC)、磷酸化MLC(p-MLC)和Rho激酶蛋白水平在6个时相点的变化及烧伤血清6 h Y27632组总MLC、p-MLC及Rho激酶蛋白水平表达。结果:严重烧伤后人肠黏膜上皮细胞通透性明显增加,并呈时相依赖性变化,6~12 h达到最高;p-MLC以及Rho激酶蛋白表达均明显增加。上述蛋白表达的增强可在加入Rho激酶特异性抑制剂Y27632后取消。结论:烧伤大鼠血清能诱导肠黏膜上皮细胞内Rho激酶激活、p-MLC表达增加及肠黏膜通透性增加,抑制Rho激酶活性能逆转这一作用。     

培养细胞SAA3启动子调控基因表达及对炎症信号的响应特性研究

利用构建的血清淀粉样蛋白启动子报告基因表达观察ＳＱＱ３启动子／增强子应用于调控目的基因在培养细胞株的表达及对炎症刺激的响应特性,探索ＳＡＡ３用于调控靶基因的可能性,方法：ｐＳＡＡ３ＣＡＴ３采用脂质体转当Ｕ９３７细胞,肝细胞株ＳＭＭＣ７７２１,４８ｈ后ＬＰＳ,重组ｒＩＬ－６＋ｒＩＬ－１、ａｎｄ ｋｔａ ｘｌｅｑｉｔｄ ｗｘ ｈ ｉｇｅ ａｔｙ ｆｍ ｋ,ｉｍｊ ｐｇ ｉ ｍ ｊｆｕｊＣＡＴｒ ｙｔｅ     

肠三叶因子在大鼠肠道中表达的实验研究

目的 研究肠三叶因子（ＩＴＦ）及其ｍＲＮＡ大鼠肠道的分布规律。方法 采用原位杂交、免疫组化等手段观察了ＩＴＦ及ＩＴＦｍＲＮＡ在大鼠肠道的表达并使用高效液相色谱仪检测了不同肠段ＩＴＦ的含量。结果 从十二指肠至结肠均有ＩＴＦ及ＩＴＦｍＲＮＡ表达，主要分布于肠绒毛杯状细胞，其中ＩＴＦｍＲＮＡ仅在杯状细胞的基底和边缘表达，其它区域的杯状细胞则呈ＩＴＦｍＲＮＡ阴性反应，同时发现部分其它部位的肠上皮细胞中亦有     

不同营养支持途径对烧伤大鼠肠粘膜上皮细胞周期的影响

目的：探讨肠道喂养及静脉营养对烧伤早期肠粘膜上皮细胞周期的影响。方法：66只烧伤大鼠随机分为肠道喂养组（EF组）及静脉营养组（PN组），分别采用灌喂和颈外静脉输入方法给予等氮、等热卡的营养液。每组设伤后6、12、24、48、72h5个观察时相点，每时相点6只大鼠，并设正常对照（6只）。采用流式细胞技术进行空、回肠粘膜上皮细胞周期分析，以Western blot法检测肠粘膜细胞周期蛋白D1、E及细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK）2、4的表达。结果：（1）肠粘膜上皮GO／G1期细胞百分比的变化：在空肠粘膜，伤后72h时EF组明显低于PN组（P＜0．05）；在回肠粘膜，6、12、48、72h时EF组与PN组比较，差异有显性意义（P＜0．05）；（2）伤后48．72h时EF组S期细胞百分比均显高于PN组（P＜0．05－0．01）；（3）肠粘膜细胞周期蛋白D1表达的变化：与对照值比较，EF组在伤后24h及PN组在伤后48h明显增高（P＜0．05），72h时EF组显高于PN组（P＜0．05）；（4）EF组肠粘膜细胞周期蛋白E的表达在伤后72h显高于对照值和PN组（P＜0．05）；（5）PN、EF组肠粘膜CDK2的表达与对照值比较以及PN、EF两组间比较，差异均无显性意义（P＞0．05），EF组CDK4的表达在72h明显增高（P＜0．05）。结论：烧伤后早期肠道喂养能加速肠粘膜上皮细胞周期的进程以及受损肠粘膜的修复与更新。细胞周期蛋白及CDK在其中起重要作用。