人His6-IFNγ/TNFβ(His6γ-TNFNβ)融合蛋白(包涵体)的分离、纯化与复性研究

应用pET28(含T_7lac启动子和His6-tag)质粒,将人γTNFβ融合基因与之组建成pETγLT表达质粒,并转化于E.coliBL21(DE3).本文对pETγLT/ BL21(DE3)工程菌的His6-γTNFβ重组产物进行了诱导表达,分离纯化的研究.结果表明,该工程菌用LB培养基在37℃扩增至OD_(590)为0.5左右,加IPTG(终浓度为1mmol/L)诱导5小时,此时His6-γTNFβ的表达量可占菌体总蛋白的45%.重组产物绝大多数以IBs形式存在于菌体中.工程菌经反复超声破碎、高速离心,得IBs粗制品后,再经含2mol/L脲的缓冲液洗涤可得到相对纯净的IBs.然后用7mol/L脲变性溶解IBs,离心取上清,进行Ni~(2 )-Sepharose 6B柱一步法亲和层析,可得到电泳纯度为95%的His6-γTNFβ,经稀释复性和用凝血酶切去His6-tag的产物,其细胞毒活性为(1.2～2.0)×10~7U/mgp,抗病毒活性为(6.0～6.6)×10~6U/map.     

大肠水疗对大肠癌变及其复发影响的临床研究

目的研究大肠水疗对大肠癌变及复发的影响。方法将60例大肠癌患者及60例大肠癌前病变患者，分别随机分为研究组与对照组各30例，观察大肠水疗前后血清肿瘤相关物质(TSGF)、T抗原试验、粪便潜血试验及癌胚抗原((2EA)测定等四种指标的变化。结果大肠水疗后，患者血清TSGF、T抗原试验、便潜血试验及(；EA测定等四种指标均有明显的好转，其差异具有统计学意义。结论大肠水疗，不仅在理论上，而且在临床实践中能够降低大肠癌发病及其复发的几率，从而提高大肠癌患者的生存率。     

脐带异常与新生儿Apgar评分及分娩方式的关系

脐带是连接胎儿与胎盘的带状器官,是妊娠期母体与胎儿之间气体交换、营养物质供应和代谢产物排出的重要通道,若脐带结构发生改变或机械性受压,则可造成胎儿胎盘供血障碍,导致胎儿宫内窘迫,甚至死亡,同时使难产率、剖宫产率增加。常见脐带异常情况有:长度异常,缠绕,脱垂,打结,扭转及帆状附着。本文主要探讨其中较常见的3种与新生儿Apgar评分的关系,以便寻找行之有效的方法来减少脐带异常所带来的不良后果,指导临床决定分娩方式。1材料与方法自2002年7月至2005年3月,我们收集了分娩时无脐带异常者50例为对照组;脐带绕颈≤1周为Ⅰ组,脐带绕颈2…     

糖尿病肾病辨证分型与肾功能及血清Ⅳ胶原相关性研究

糖尿病肾病是糖尿病最典型的微血管并发症和最重要的死因之一.近年来,随着糖尿病在全世界范围内增加,糖尿病肾病的发生率也在迅速增长;而且糖尿病肾病患者从出现微量白蛋白到临床糖尿病肾病,到出现肾功能损害,直至终末期尿毒症,呈不断进展趋势.     

儿童康复科医院感染情况调查

青岛市妇女儿童医疗保健中心儿童康复科主要收治脑瘫、精神发育迟滞的患儿 ,对其进行神经康复治疗和训练。是医院感染的最高发科室。医院感染的发生直接影响患儿康复训练的正常进行 ,同时增加了患儿的痛苦和其家庭的经济负担。为了解康复科医院感染的特点 ,对 2 0 0 1- 0 6 / 2     

受区带蒂筋膜包绕耳大神经移植治疗面神经缺失性损伤

目的 评价带蒂筋膜包绕耳大神经移植治疗面神经缺失性损伤的临床疗效。方法 耳源性与外伤性面神经缺失损伤7例，取带蒂的颞肌筋膜或腮腺咬肌筋膜，在移植的耳大神经下方包绕移植神经和两端吻合口形成管筒，将移植神经首尾颠倒行束膜缝合。结果 4例耳源性面瘫，神经移植术后随访2．0～2．5年，面神经功能由Ⅳ级3例，Ⅴ级1例，恢复至Ⅲ级3例，Ⅵ级1例；3例外伤性面瘫神经移植术后随访2年，面神经功能由Ⅵ级恢复均达Ⅲ级。结论 受区带蒂筋膜包绕耳大神经移植，提供血运良好的神经修复与再生的生物学环境，促进术后面神经功能的恢复。     

灯盏花注射液佐治病毒性心肌炎临床分析

病毒性心肌炎系指病毒侵犯心肌，引起心肌细胞变性坏死和间质炎症，导致不同程度的心功能障碍和周身症状的疾病。随着病毒学的深入发展，本病的发病率近年来明显增长，在小儿心肌炎中占有重要地位，占住院患儿的6％左右。因此，笔者对患有病毒性心肌炎的儿童，在常规治疗的基础上．加用灯盏花注射液治疗病毒性心肌炎，取得满意的疗效。报告如下。     

桂枝茯苓丸在妇科的应用

笔者运用桂枝茯苓丸加味改汤剂广泛应用于妇科疾病屡收良效。现介绍如下。1　盆腔炎　白某 ,女 ,44岁。 2 0 0 3年 1 0月2 2日初诊。小腹痛 2年 ,加重 3d。LMP :2 0 0 3年1 0月 1 0日 ,量正常 ,色暗 ,有血块 ,白带黄 ,无臭味。 5年前做子宫肌瘤剔除术。现症 :小腹两侧疼痛 ,有坠胀感 ,腰骶部酸痛 ,呈进行性加剧 ,附件区压痛 ,舌质暗、苔黄稍腻 ,脉滑数。妇查 :宫颈轻度糜烂 ,B超 :慢性盆腔炎。中医诊断 :湿阻血瘀型腹痛 ;西医诊断 :盆腔炎。治以活血化瘀 ,解毒利湿 ,消症散结。处方 :桂枝、桃仁各 1 0g ,茯苓、丹皮、赤芍、金银花各 1 5g …     

不同褪黑素治疗方案对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠内源性神经干细胞增殖的影响

目的 探讨不同褪黑素治疗方案对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠脑内源性神经干细胞（NSCs）增殖及远期组织学的影响,以寻求褪黑素治疗的较优方案。方法 将96只7日龄Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组、缺氧缺血性脑损伤（HIBD）组、单剂量即刻褪黑素治疗（SDIT）组及7日连续褪黑素治疗（7DCT）组（n=24）。HIBD大鼠模型采用分离并电凝大鼠右侧颈总动脉,低氧舱（氧气浓度为8%±0.01%）内缺氧2 h的方法建立。造模后7 d,采用增殖细胞核抗原（PCNA）/巢蛋白（Nestin）免疫荧光双标法检测各组大鼠侧脑室室管膜下区（SVZ）及海马齿状回（DG）区内源性NSCs的增殖情况（n=8）;采用Western blot法检测各组大鼠脑Nestin蛋白的表达水平（n=8）。造模后28 d,采用苏木精-伊红染色（HE）和尼氏染色法观察海马CA1区的组织病理学及锥体细胞数的变化（n=8）。结果 免疫荧光染色结果显示：SDIT组和7DCT组PCNA⁺Nestin⁺DAPI⁺细胞数均较HIBD组增加,且7DCT组显著多于SDIT组（P < 0.01）;Western blot结果显示：SDIT组与7DCT组Nestin蛋白的表达水平均显著高于HIBD组,且7DCT组显著高于SDIT组（P < 0.05）;HE染色结果显示：SDIT组及7DCT组细胞损伤减轻;尼氏染色结果显示：SDIT组和7DCT组锥体细胞数均较HIBD组增加,且7DCT组显著高于SDIT组（P < 0.01）。结论 SDIT和7DCT均可促进HIBD新生大鼠脑内源性NSCs的增殖,减轻远期组织学损伤,且7DCT疗效优于SDIT。