糖皮质激素瘤内注射治疗婴儿血管瘤对免疫功能影响的研究

目的研究局部注射糖皮质激素治疗婴儿血管瘤对患儿免疫功能的影响。方法选择1岁以内血管瘤患儿30例,采用曲安奈德40mg／次及倍他米松磷酸钠5mg／次瘤内注射进行治疗。分别于治疗前及治疗后2周、4周、6周、8周、3个月、6个月测定血清IgA、IgG、IgM及C3含量。治疗前后2～4周测定淋巴细胞转化率。结果治疗后血清免疫球蛋白及补体C3含量无明显减少,治疗后血清IgA、IgG、IgM及C3平均值低于治疗前,经配对t检验,差异无统计学意义（P〉0．05）;治疗前后淋巴细胞转化率无明显变化,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论按本研究所用剂量瘤内注射糖皮质激素治疗婴儿血管瘤,患儿血清免疫球蛋白、补体C3及淋巴细胞转化率无明显变化,说明对患儿体液免疫及细胞免疫功能无明显影响。     

呼吸道合胞病毒感染后气道上皮细胞Toll样受体4的表达及其功能

目的 观察呼吸道合胞病毒(RSV)感染后气道上皮细胞Toll样受体4(TLR4)表达变化及其信号通路的功能,探讨RSV诱导气道炎症的机制.方法 体外培养人气管上皮细胞株9HTEo,以RSV感染复数为10感染上皮细胞,用半定量逆转录PCR(RT-PCR)检测TLRl～10 mRNA表达;用定量PCR检测TLR4 mRNA表达的动态变化;用流式细胞术检测TLR4蛋白表达及与细胞凋亡的关系;感染后再用TLR4激动剂脂多糖(LPS)刺激细胞,用酶联免疫法(ELISA)检测上清液中白细胞介素-8(IL-8)含量以观察病毒诱导表达的膜TLR4蛋白功能.RT-PCR和流式细胞术实验分为正常组和RSV感染组,用GraphPad 4.0统计软件进行配对t检验;实时定量PCR实验分为正常组、RSV感染组和紫外线灭活RSV感染组,采用Kruskal-Wallis检验分析;ELISA实验分为正常组、RSV感染组、单独LPS刺激组和RSV-LPS共刺激组,采用One-way ANOVA检验分析.结果 (1)RSV感染组TLR2～10 mRNA表达均上调(t值为3.49～14.47,P均＜0.05),以TLR2和TLR6变化最为显著;定量PCR结果提示:感染组TLR4 mRNA 3 h后开始增高(Kruskal-Wallis检测值=8.82,P＜0.05,n=6),紫外灭活RSV组TLR4 mRNA表达无明显变化;(2)流式细胞术结果表明:RSV感染组膜上TLR4表达比正常组增高(平均荧光强度:1.27±0.48,0.97±0.25,t:2.39,P＞0.05,n=10),感染组胞内TLR4表达比正常组降低(平均荧光强度:3.08±1.38,3.36±1.31;t=2.92,P＞0.05,n=10),感染组膜TLR4阳性细胞中(93.32±1.7)%为膜黏连蛋白-5阳性细胞;(3)RSV-LPS共刺激组培养上清液中IL-8含量明显高于单纯LPS刺激组(F=59.29,P＜0.01,n=3).结论 RSV感染后,上皮细胞TLR4mRNA和蛋白表达水平上调,与TLR4信号通路相关的IL-8分泌增加;TLR4与上皮细胞凋亡的关系提示TLR4及其信号通路可能参与了RSV诱导的上皮细胞急、慢性炎症反应.     

呼吸道合胞病毒感染断乳期小鼠后再感染的细胞因子变化及致病机制

目的研究呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染断乳期小鼠后再感染的致病机制及免疫应答特点。方法3周龄雌性C57BL/6小鼠随机分为PBS对照组、成年期首次感染组、再感染组。首次和再次感染后检测各组小鼠体质量,感染后第7天处死小鼠,行支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞计数及分类计数;病理切片HE染色后行肺组织炎症病理评分;ELISA法检测BALF中细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-17A)的变化。结果 RSV感染后小鼠体质量明显降低,感染后第7天再感染组体质量下降较成年期首次感染组明显;再感染组BALF中的细胞总数、嗜酸性细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞均显著高于PBS对照组及成年期首次感染组;成年期首次感染组及再感染组肺组织炎症病理评分明显高于PBS对照组,而再感染组明显高于成年期首次感染组;成年期首次感染组BALF中的IFN-γ较PBS对照组明显增加,而IL-4、IL-5、IL-17A较PBS对照组无明显变化;再感染组BALF中的IL-4、IL-5、IL-17A较PBS对照组显著增加,而IFN-γ无明显变化。结论 RSV再感染后病情较初次感染进一步加重,提示RSV反复感染可能导致支气管哮喘的发生。     

婴幼儿初次下呼吸道感染与血清ＩｇＧ亚类缺陷

目的　研究婴幼儿初次下呼吸道感染患者中血清IgG亚类变化情况。 方法　随机抽取 185例初次下呼吸道感染病儿 ,用ELISA法检测血清IgG及IgG亚类浓度。并与该地区健康小儿血清浓度进行比较。以低于参考值下限 ( x - 1.96s)者为IgG或IgG亚类缺陷 ,而高于 ( x 1.96s)者视为IgG亚类增高。 结果　 185例共检出 4 3例IgG缺陷 ,均有IgG亚类缺陷 ,而余下的 14 2例IgG正常者 ,发现IgG亚类缺陷 12 0例 ,检出率高达84 .5 %。其中 0～ 3月 4项、3项缺陷合计 2 9例 ,占该年龄段缺陷总数的 85 .3% ,在各年龄段中为最高比例。而IgG亚类缺陷中以IgG3缺陷最高 ,占 4 7.6 %。结论　婴幼儿初次下呼吸道感染伴有IgG亚类缺陷。年龄越小 ,越易出现IgG亚类联合缺陷。因而在检测Ig时 ,除注意总IgG外 ,还应注意IgG亚类水平。     

特异性反义寡核苷酸抗小鼠呼吸道合胞病毒感染的研究

目的 比较研究特异性抑制呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的反义核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,AS-ODN)和利巴韦林对RSV感染小鼠的治疗作用,寻求安全有效的抗RSV药物.方法 特异性ASODN和利巴韦林滴鼻治疗RSV感染BALB/c鼠,空斑形成实验检测肺组织病毒滴度,RT-PCR和免疫组织化学分析RSVmRNA和蛋白表达水平,支气管肺泡灌洗液(BALF)白细胞计数、肺组织病理学检查了解气道炎症和治疗副作用.结果 0.2、0.4 mg AS-ODN和0.8 mg利巴韦林能降低RSV感染小鼠肺组织病毒滴度,空斑抑制率分别为34.48%、46.75%和23.02%,与感染对照组比较差异显著(P＜0.05).0.4 mg AS-ODN抑制RSV mRNA和蛋白表达,抑制率分别为30.54%和29.41%,0.4 mg利巴韦林治疗降低17.65%的RSV蛋白表达.AS-ODN和利巴韦林都降低RSV感染小鼠BALF中白细胞总数,对肺组织病理性改变没有明显改善作用,与感染对照组比较差异不显著(P＞0.05).单独AS-ODN和利巴韦林滴鼻不会引发明显肺炎症病理损害.结论 AS-ODN在小鼠体内有比利巴韦林更强的抗RSV作用,经滴鼻治疗没有明显毒副作用,是安全而有效的抗RSV制剂.     

毛细支气管炎与婴幼儿哮喘的关系

部分毛细支气管炎 (毛支炎 )可反复发作发展为婴幼儿哮喘。本实验室观察Ｔｈ1/Ｔｈ2失衡与毛支炎的发病有一定关系[1] ,毛支炎发作期Ｔｈ1/Ｔｈ2紊乱的程度是否与其后发展为哮喘有关[2 ,3 ] 。本研究前瞻性选择 5 6例毛支炎患儿 ,随访观察 1ａ ,比较发展为婴幼儿哮喘症患儿 (简称哮喘组 ) ,在初发毛支炎阶段与无哮喘发生的单纯毛细支气管炎 (简称毛支组 )免疫指标变化 ,现报告如下。材料和方法一、对象　 1.毛支组 :5 6例急性期住院患儿 ,男 32例 ,女2 4例。平均年龄 5 .8个月。 16例有个人过敏史和 (或 )家族史 (简称特应症 ) ,均是喘息首…     

CD40L、可溶性黏附分子及MMP9在川崎病中的表达及意义

目的：研究T细胞CD40配体（CD40L）、血浆中可溶性E选择素（sE-selectin）、可溶性细胞间黏附分子1（sICAM-1）和基质金属蛋白酶9（MMP9）在川崎病中的表达及意义。方法：用流式细胞双色荧光标记技术检测20例川崎病急性期及静脉注射免疫球蛋白（IVIG）治疗后的患儿，19例正常对照，外周血T细胞表达CD40L阳性细胞率及平均荧光强度；用ELISA方法检测上述3组血浆中sE—selectin、sICAM-1和MMP9水平。结果：急性期川崎病组T细胞CD40L表达明显高于IVIG治疗后组（P〈0．05），川崎病患儿T细胞CD40L表达较正常对照持久；2例伴冠状动脉损害（CAL）的川崎病患儿急性期T细胞CD40L表达高于无CAL者。急性期川崎病组血浆sICAM-1、MMP9明显高于IVIG治疗后组，急性期川崎病患儿血浆sE—selectin、sICAM—1明显高于正常对照（P〈0.05）。川崎病急性期T细胞表达CD40L与血浆sE—selectin、sICAM-1、MMP9水平无明确相关性（P〉0．05）。结论：T细胞表达CD40L升高在川崎病血管炎及冠状动脉病变中可能起一定作用。血浆sE-selectin、sLCAM-1和MMP9水平可作为反映川崎病血管炎的指标。