猪C_(19)酶联免疫吸附试验测定人血清循环免疫复合物的探讨

C_(1q)是补体系统的第一个成份,它能与被加热凝聚或同抗原结合后的IgG、IgM分子Fc段的CH_2或CH_3区结合,利用这一特性可进行循环免疫复合物(CirculatingImmune Complexes,简称CIC)检测。以C_(1q)为基础的试验是WHO所推荐的六种较敏感的CIC抗原非特异性检测法之一。由于现常采用的人C_(1q)存在某些缺点,故在一     

卡介菌多糖核酸和特异性免疫治疗对哮喘儿童免疫功能的影响

目的　研究卡介菌多糖核酸 (BCG PNA)和特异性免疫治疗 (SIT)对哮喘儿童IgE和细胞因子IL 4、IFN γ、IL 13、IL 12水平的影响。方法　用BCG PNA、SIT和两者联合治疗 36例哮喘儿童 ,治疗前后用酶联免疫吸附试验检测血清IgE和外周血单个核细胞产生细胞因子IL 4、IFN γ、IL 13、IL 12水平并分析其相互关系。结果　BCG PNA和SIT能明显改善哮喘儿童失衡的细胞因子网络 ,抑制IL 4、IL 13分泌 ,促进IFN γ、IL 12产生 ,降低血清IgE水平。 2种联合治疗对于降低IL 13、增高IFN γ有协同作用。结论　BCG PNA和SIT能增强Th1反应 ,降低Th2应答 ,调节Th1 Th2平衡     

P53基因对K562细胞增殖的影响

目的 观察恢复K562细胞的p53蛋白功能后该细胞的生物学行为的改变，探索用野生型p53基因治疗白血病的可能性。方法 以K562细胞为研究对象，电穿孔法转导野生型p53基因，RT-PCR和免疫细胞化学方法检测p53基因的表达，^3H-TdR掺入法检测细胞增殖，用流式细胞仪分别以TUNEL、annexin-V、细胞周期检测细胞的凋亡情况和细胞周期分布情况。结果 转染p53基因的K562细胞，出现明显细胞周期G1期停滞，增殖抑制率为24．17％，但用TUNEL、annexin-V和亚二倍体峰检测未发现与未转染p53基因组有凋亡细胞比例差异。结论 P53基因对K562细胞有一定的治疗效应，但不能诱导其发生凋亡。     

诱导痰细胞和白细胞介素8 白细胞介素9 嗜酸性粒细胞趋化因子在儿童哮喘发病中的作用

探讨诱导痰细胞和白细胞介素8(IL 8)、白细胞介素9(IL 9)、嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)在儿童哮喘发病中的作用及相互关系。 方法以2004年9月至2005年3月重庆医科大学附属儿童医院确诊哮喘的44例患儿为研究对象，其中急性发作期25例、缓解期19例，同时选10例因骨骼畸形入院的患儿作对照组，进行诱导痰的细胞分类检查和ELISA方法检测IL 8、IL 9、eotaxin。 结果哮喘患儿诱导痰细胞总数明显升高，急性发作期诱导痰中性粒细胞数明显高于缓解期和对照组，缓解期淋巴细胞数明显高于急性发作期和对照组，嗜酸性粒细胞各组间比较差异无显著性意义；哮喘患儿诱导痰IL 8、IL 9质量浓度与对照组比较有明显升高，且IL 8、IL 9质量浓度与中性粒细胞百分数呈正相关，eotaxin在各组间比较差异无显著性意义。 结论与成人过敏性哮喘不同，中性粒细胞在儿童哮喘的发病中扮演重要角色，IL 8趋化中性粒细胞聚集于气道，中性粒细胞在IL 9的作用下产生和释放IL 8，三者相互影响，共同参与哮喘的发病。     

儿童激素敏感性肾病综合征CD30~+细胞及TH2类细胞因子研究

目的:了解糖皮质激素敏感性肾病综合征(SSNS)患儿CD30阳性细胞及分泌白细胞介素4(IL-4),5,6的TH2细胞活化状态,进一步证实SSNS免疫异常模式。方法:流式细胞仪(FACS)检测SSNS与健康儿童CD30阳性细胞百分率、ELISA检测外周血单个核细胞(PBMC)培养上清中IL-4,5,6及血清IgE浓度;用SSNS患儿CD30细胞百分率与PBMC培养上清中IL-4,5,6及血清IgE作直线相关分析。结果:SSNS患儿CD30阳性细胞率、IL-4及血IgE(11.96% lg2.11 pg/ml,299 IU/ml)显著高于健康儿童(2.81% lg 1.37 pg/ml, 110 IU/ml)(P均0.05);SSNS患儿CD30阳性细胞百分率与IL-4及血IgE水平相关有显著性(r=0.94,P<0.01,r=0.74,P<0.01);与IL-5、IL-6水平无显著性相关(P<0.05)。结论:SSNS患儿CD30阳性细胞增加并不意味着存在TH2类细胞全面活化,SSNS患儿既有某些TH2类细胞因子(IL-4)升高,又有一些TH2细胞因子的降低(IL-5)或无变化(IL-6),本文资料不能证明SSNS发病与TH1/TH2失衡有直接关联。     

原发性肾病综合征患儿外周血Th17与CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞的水平

目的:观察原发性肾病综合征(PNS)患儿外周血Th17细胞和CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞(Treg)及其相关因子的水平和功能,初步探讨其在儿童PNS发病中的作用。方法:PNS患儿分为单纯型肾病(SNS)20例、肾炎性肾病(NNS)15例;同时以20例健康体检儿童作为对照组。采用流式细胞术(FCM)检测外周血单个核细胞(PBMC)中Th17细胞和Treg细胞比例;Real-time PCR法检测PBMC中RORC、IL-23p19和Foxp3 mRNA的表达;ELISA分别检测血清中IL-1β、IL-6、TGF-β1的水平。结果:SNS、NNS组患儿Th17细胞及RORC、IL-23p19 mRNA、IL-1β、IL-6的水平均明显高于正常组(P0.05),且NNS组患儿以上指标明显高于SNS组(P0.05);SNS、NNS组患儿Treg细胞、Foxp3 mRNA和TGF-β1水平的表达明显低于正常组(P0.05),其中两组疾病患儿血清TGF-β1的水平无统计学意义(P0.05),其余指标NNS患儿均明显低于SNS组(P0.05)。结论:Th17/Treg细胞功能失衡可能在儿童PNS的发病中起到重要作用,其失调程度可能与PNS的临床表现、对激素的敏感性、病理类型、及预后有关。     

血清甘露聚糖凝集素水平及与反复呼吸道感染关系的初步研究

目的　建立儿童血清甘露聚糖凝集素 (MBL)水平正常值参考范围 ,了解血清MBL低水平与反复呼吸道感染的关系。方法　用ELISA方法检测重庆地区 91例新生婴儿脐血MBL水平 ,2 6 3例学龄前儿童、1 6例成人血清MBL水平 ,并对学龄前各年龄组血清低MBL水平的儿童进行反复呼吸道感染的病史回顾。结果　新生儿脐血MBL水平为 ( 1 .71± 1 .6 0 ) μg/ml,成人外周血 ( 2 .2 6± 1 .56 ) μg/ml,两组比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5) ,学龄前各年龄组MBL水平分别为 ( 3.1 6±2 .0 0 ) μg/ml、( 3.1 9± 1 .88) μg/ml、( 3.30± 2 .0 5) μg/ml、( 3.6 9± 2 .2 2 ) μg/ml、( 2 .80± 1 .38) μg/ml,与新生儿比较明显增高 (P <0 .0 0 5) ,但学龄前期各组间比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5) ;1 6例血清低MBL水平儿童中 7例在 3岁前出现反复呼吸道感染 ( 4 3.7% ) ,主要感染方式为上呼吸道感染 ,血清MBL水平低于 1 0 0ng/ml组与血清MBL水平在 1 0 0～ 2 0 0ng/ml的儿童比较反复呼吸道感染频率有增多趋势。结论　新生儿期MBL水平可达成人水平 ,但明显低于学龄前各年龄组儿童 ,学龄前儿童组间比较没有显著差异 ;低血清MBL水平儿童在免疫脆弱阶段存在反复呼吸道感染的易患倾向 ,血清MBL水平下降时 ,呼吸道感染频率有增     

Mina基因单核苷酸多态性与儿童变应性哮喘关联研究

目的 研究Mina基因单核苷酸多态性(SNPs)与重庆地区汉族儿童变应性哮喘的相关性.方法 采用病例对照研究.基质辅助激光解吸电离飞行间质谱技术(MALDI-TOF)进行Mina位点基因分型,以观察各位点不同基因型和等位基因频率在哮喘组和对照组中的分布差异.显性和隐性遗传模型用来比较哮喘组和正常组rs4857304位点...     

特异性脱氧核酶对小鼠呼吸道合胞病毒感染的抑制作用

目的 研究特异性抑制呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)N基因的脱氧核酶DZ1133在小鼠体内对病毒复制和气道炎症的影响.方法 RSV感染BALB/c小鼠滴鼻给予DZ1133及其变异体、反义寡核苷酸AS1133,空斑形成实验检测肺组织病毒滴度,RT-PCR检测病毒mRNA表达,支气管肺泡灌洗液白细胞计数,ELISA检测TNF-α、IL-12、IFN-γ和IL-10水平,肺组织病理学分析炎症情况.结果 0.2、0.4 mg和0.8 mg DZ1133治疗组小鼠肺组织病毒滴度分别为(2.75±0.21)×105、(1.86±0.20)×105PFU/g和(1.02±0.22)×103PFU/g,与感染对照组小鼠(7.94±0.42)×105PFU/g比较明显下降(P<0.01),上述各剂量治疗组小鼠肺组织病毒mRNA表达与感染对照组比较分别下降30.51%、47.38%(P<0.05)和53.97%(P<0.01).0.4 mg DZ1133治疗降低RSV感染小鼠支气管肺泡灌洗液中白细胞总数,改善肺组织病理学损伤(P<0.05),对TNF-α、IL-12、IFN-γ和IL-10水平无显著性影响(P>0.05).结论 特异性脱氧核酶DZ1133在小鼠体内有效抑制RSV复制、减轻气道炎症,是有效的抗RSV途径.