细粒棘球绦虫果糖二磷酸醛缩酶的生物信息学分析及其表达与活性检测

目的利用生物信息学方法分析细粒棘球绦虫果糖二磷酸醛缩酶(EgFBPA)的结构和功能特征,并利用基因工程技术进行克隆、表达、纯化,获得活性蛋白。方法利用多种生物信息学软件分析EgFBPA的拓扑结构、生物学以及免疫功能特征;用限制性内切酶EcoRⅠ和HandⅢ对重组质粒FBPA/P-blue酶切FBPA目的基因片段,亚克隆入表达载体pET30a,筛选重组克隆并测序,将测序正确的重组质粒转化入BL21(DE3)感受态细菌,用异丙基-β-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白;用Ni-NTA柱纯化重组蛋白,并建立酶反应体系,通过NADH(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)的变化测定重组蛋白EgFBPA的酶催化活性。结果 EgFBPA基因全长1 092bp,编码363个氨基酸,软件分析其等电点(pI)为8.34,分子质量单位为39.8035ku。亚细胞定位分析该蛋白为无信号肽的细胞质蛋白,属于稳定蛋白;结构域和保守功能域的预测,FBPAI的激活位点为VYLEGTLLKPN(222aa-232aa),并含有TIMβ/α筒状结构(6aa-346aa),二级结构以α-螺旋和环状结构居多,无跨膜区,有10种类型的活性位点。经PCR、双酶切和测序证实pET30a(+)-EgFBPA构建成功。SDS-PAGE检测重组质粒表达产物分子质量与预期相符,且具有可溶性;Bradford法测定蛋白浓度为(0.50±0.02)mg/ml。酶活性检测Ni-NTA柱纯化后的FBPA具有良好的酶促活性,且存在量效关系。结论生物信息学预测EgFBPA可能是潜在的药物靶点。重组质粒Pet30a(+)-FBPA在大肠埃希菌BL21中成功表达,表达产物具有酶促活性,为进一步研究其生物学功能及药物靶点奠定了基础。     

马钱子生物碱类成分经皮给药后在小鼠体内的药动学研究

目的 考察马钱子碱、马钱子总生物碱和优化马钱子总生物碱凝胶剂经皮给药后在小鼠体内的药动学过程。方法 建立测定小鼠血浆中马钱子碱质量浓度的HPLC法,比较含相同剂量（10.8 mg/kg）马钱子碱各凝胶剂经皮给药后,马钱子碱的血药浓度,并对结果进行药动学拟合。结果 经皮给药后马钱子生物碱类成分的药动学行为均符合二室模型。优化马钱子总生物碱凝胶剂能显著增加马钱子碱的体内吸收,相对生物利用度显著提高,AUC_0→t是马钱子碱凝胶剂的1.74倍,是马钱子总生物碱凝胶剂的1.89倍,其他药动学参数无显著差异。结论 以优化马钱子总生物碱经皮给药,可有效改善单体马钱子碱和总生物碱的体内药动学行为,有利于对马钱子碱的减毒增效。     

某三级甲等儿童医院医务人员对高警示药品的认知现状及影响因素分析

目的 了解某三级甲等儿童医院医务人员对高警示药品相关知识的掌握情况,为规范高警示药品的管理及提高临床用药安全提供参考.方法 采用随机抽样法选取南京医科大学附属儿童医院245名临床医务人员为研究对象,以调查问卷形式评价其高警示药品相关知识得分情况、培训情况及相关知识调查,并利用多因素logistic回归分析医务人员对高警...     

丙型肝炎病毒感染致2型糖尿病机制的研究进展

丙型肝炎病毒(HCV)感染是影响全人类的高发的感染性疾病。HCV感染除了会造成极大的感染率和病死率外,更为严重的是HCV可导致终末期器官损害。糖尿病是由遗传和环境因素共同作用而引起的一组以糖代谢紊乱为主要表现的临床综合征。近年来越来越多的研究发现,糖尿病患者的HCV感染率显著高于普通人群,而慢性丙型肝炎患者2型糖尿病的患病率也显著高于正常人。     

我院361例儿童药品不良反应报告分析

目的:了解我院儿童药品不良反应(ADR)的发生情况及特点,为临床合理用药及药品安全性评价提供参考。方法:采用回顾性研究方法,对我院2014年上报至国家药品不良反应监测中心的361例ADR报告进行分析和归纳。结果:361例ADR主要集中在6岁以下患儿(68.98%);涉及16类药品、96个品种,主要为抗感染药物(60.11%),其次为中药(13.02%)、抗肿瘤药物(5.26%);给药途径主要为静脉给药(85.32%);临床表现主要为皮肤及其附件损害(73.96%),其次为全身性损害;医师和药师为ADR报告的主体,ADR类型主要为一般ADR(98.61%)。结论:应重点加强儿童群体ADR的监测,关注儿童专科用 药ADR,强化临床药学监护,以促进临床安全合理用药。     

痰热清注射液治疗小儿支气管肺炎疗效和安全性的系统评价

目的：系统评价痰热清注射液治疗小儿支气管肺炎的疗效和安全性,为临床治疗提供循证依据。方法：计算机检索Cochrane Library,Embase,Pubmed,CBM,CNKI,VIP和Wanfang等数据库,查找以痰热清注射液为干预措施治疗小儿支气管肺炎的随机对照试验（RCT）,检索时限均从建库至2015年6月。研究者按照纳入与排除标准独立筛选文献、提取资料并进行方法学质量评价后,采用RevMan5.2软件进行统计分析。结果：共纳入19篇文献,合计1 943例患者。Meta分析结果显示,痰热清注射液联合西医常规疗法在临床总有效率[OR=3.76,95% CI（2.68,5.28）,P<0.000 01],退热时间[MD=-1.28,95% CI（-1.51,-1.05）,P<0.000 01],咳嗽消失时间[MD=-1.72,95% CI（-2.13,-1.31）,P<0.000 01],肺部啰音消失时间[MD=-1.55,95% CI（-1.95,-1.15）,P<0.000 01],X线片恢复正常时间[MD=-2.33,95% CI（-3.19,-1.47）,P<0.000 01]及平均住院时间[MD=-1.89,95% CI（-2.65,-1.12）,P<0.000 01]等方面均优于对照组。纳入的19项研究中痰热清的不良反应表现轻微,均无严重不良反应发生。结论：基于当前的临床证据,在常规治疗的基础上联用痰热清注射液治疗小儿支气管肺炎可以提高疗效,且较为安全。但由于纳入的研究质量有限,尚需设计更多严谨的、大样本的随机双盲对照试验加以验证。     

南昌市三级公立医院信息公开情况调查

目的:了解南昌市三级公立医院信息公开的变化趋势,分析存在的问题,为促进公立医院信息公开提出合理建议.方法:依据政策文件中的医院信息公开目录制定调查表,采用内容分析法和追踪调查,通过医院实地观察及浏览医院官方网站,对2016年及2019年南昌市20家三级公立医院的信息公开状况分别用中位数(四分位间距)和均数(标准差)进行...     

浅谈应用内窥镜行桥小脑角手术与术后并发症的护理

近年来在耳神经外科桥小脑角手术中为了扩大暴露,减少术中误判,增加手术的安全性,在手术中配合应用内窥镜,是目前国内外开展的一项新技术。此类手术的开展不仅需要医生有娴熟的技术,而且需要术前的充分准备和术后的严密观察护理,以提高手术效果,减少并发症的发生。...     

细粒棘球绦虫GAPDH蛋白的生物信息学分析及其重组表达纯化和酶活性检测

目的 以生物信息学预测细粒棘球绦虫甘油醛3-磷酸脱氢酶(EgGAPDH)编码基因及其编码蛋白的结构和功能,利用大肠杆菌原核表达系统高效表达EgGAPDH重组蛋白,体外检测其酶活性。方法 运用各软件对EgGAPDH的理化性质、保守功能域、系统发生树和二级结构、三级结构等方面进行分析后,将EgGAPDH基因亚克隆于表达载体pET30a(+),转化入E.coli BL21(DE3)感受态细菌,表达、纯化重组蛋白,并利用底物3-磷酸甘油醛测定重组蛋白EgGAPDH的酶催化活性。结果 EgGAPDH cDNA序列长度为1 011 bp,编码一个336个氨基酸的蛋白。该GAPDH蛋白理论相对分子质量为36 128.3 Da,等电点为8.44,具有GAPDH蛋白家族的两个功能结构域,富含6种类型的特定功能位点。成功构建的原核表达载体pET30a(+)-EgGAPDH在E.coli BL21(DE3)中高效表达,且发现表达产物主要以可溶形式分布于裂解上清,制备甘油醛3-磷酸脱氢酶纯品并通过酶活检测显示其具有高效酶活性。结论 EgGAPDH基因可在原核系统中获得有酶催化活性的高效表达,为进一步研究其在糖代谢中的功能奠定了基础。     

小儿双侧前庭神经炎1例报告

小儿一侧前庭神经炎临床少见 ,而双侧同时发病更为罕见。笔者曾遇 1例现报告如下。患者男 ,5岁 ,因头晕、走路不稳 15天 ,于 2 0 0 2年 1月 8日来我院就诊。患儿发病突然 ,难以说明头晕性质 ,无耳鸣 ,听力无改变。且于患病前 1周有感冒史。查体 :血压正常 ,心、肺、腹 ( - ) ,自发性眼震可疑 ,神经体征阴性。听力检查 :纯音测听 0 .2 5～ 8k Hz双耳均正常 ,前庭冷热水试验 44℃、3 0℃及 4℃分别灌注双耳 ,均未引出眼震 ,植物神经反应不明显 ,X线内听道摄片正常。诊断为双侧前庭神经炎。入院后给予 ATP2 0 mg、辅酶 A5 0 U、胞二磷胆碱 2…