EGCG对低氧诱导下胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对低氧培养下人胃癌SGC7901细胞增殖、凋亡的影响及其机制.方法 将人胃癌细胞株SGC7901进行传代培养,并采用氯化钴（CoCl2）建立低氧模型,实验设空白对照组（常氧组）、低氧对照组及低氧加不同浓度的EGCG组.分别采用MTT法检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;RT-PCR和Western blotting检测细胞低氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子-A（VEGF-A）的表达.结果 低氧条件下,低浓度EGCG短时间内（24 h）对SGC7901细胞生长无明显抑制作用（P〉0.05）;但随着浓度的升高和作用时间的延长,EGCG可抑制低氧SGC7901细胞的增殖（P〈0.01）,100 μg/mL EGCG作用72 h后,其抑制率可达（76.3±2.9）%.流式细胞仪检测显示,EGCG在低氧环境下可呈时间-剂量依赖性地诱导胃癌细胞凋亡（P〈0.05或P〈0.01）.EGCG可明显抑制低氧诱导的HIF-1α和VEGF-A蛋白的表达（P〈0.05或P〈0.01）,并下调VEGF-A mRNA表达（P〈0.05或P〈0.01）,但对HIF-1α mRNA的转录无明显影响（P〉0.05）.结论 低氧条件下,EGCG可抑制胃癌细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调低氧诱导的HIF-1α和VEGF-A的表达有关.     

Smad4基因沉默对胰腺上皮内瘤变细胞基因表达谱影响的初步研究

抑癌基因Smad4失活可使由Kras基因突变启动的胰腺上皮内瘤变（PanIN）细胞发生恶性转化,但其具体机制尚未阐明。目的：探讨Smad4基因沉默的PanIN细胞（PanIN—S细胞）基因表达谱的变化,分析Smad4基因沉默致PanIN细胞增殖和恶性转化的可能分子机制。方法：通过RNA干扰沉默PanIN细胞的内源性Smad4基因表达以构建PanIN—S细胞．小鼠全基因表达谱芯片筛查PanIN细胞与PanIN-S细胞的基因表达谱差异．实时荧光定量RT—PCR验证基因芯片筛选出的细胞周期相关差异表达基因。结果：基因芯片共筛选出237个差异表达基因,其中148个基因在PanIN—S细胞中表达上调,89个表达下调。差异表达基因主要涉及细胞周期、增殖、凋亡、黏附、转录活性等。实时荧光定量RT．PER验证示细胞周期相关基因p27、p19、细胞周期蛋白（cyclin）D1表达在PanIN细胞与PanIN—S细胞间存在显著差异,与基因芯片筛选结果一致。结论：PanIN-S细胞p27、p19和cyclinD1基因表达发生明显改变．可能参与了PanIN—S细胞的增殖和恶性转化。     

负压技术治疗复杂性和难愈性创面疗效观察

目的 了解负压创面治疗技术(NPWT)治疗复杂性和难愈性创面的效果.方法 选择2005年9月-2008年11月因复杂性和难愈性创面入住笔者单位治疗的67例患者,按随机化方法分为负压治疗组35例和常规治疗组32例.负压治疗组患者创面给予压力-16.63 kPa行24 h间断吸引,或以-10.64 kPa压力行24 h持续吸引.常规治疗组患者创面覆以凡士林纱布并加盖等渗盐水湿纱布及干纱布.比较2组患者治疗时间、手术次数、治疗费用及治愈方式. 结果负压治疗组患者在治疗时间、手术次数、治疗费用上均明显低于常规治疗组(P<0.05).负压治疗组治愈方式以自行愈合(40.0%)及游离皮片移植后愈合(40.0%)为主,常规治疗组则以带蒂组织瓣移植(66.7%)和游离皮片移植(23.3%)后愈合为主. 结论与常规治疗相比,NPWT治疗复杂性和难愈性创面后可缩短患者住院时间,降低手术难度,减少手术次数及治疗费用等,值得推广.     

面部皮肤恶性肿瘤扩大切除术后局部皮瓣的修复

皮肤恶性肿瘤好发于面部,由于面部是人体重要的形态器官,在临床上治疗时既要彻底,又要兼顾形态,避免继发畸形,并有利于辅助治疗.2004年1月～2011年1月,我们对109例面部皮肤恶性肿瘤患者在行扩大切除术后采用局部皮瓣修复,效果满意,报道如下.     

miRNA⁃199a⁃5p在热损伤人皮肤成纤维细胞中的表达及其功能研究

目的：观察热损伤人皮肤成纤维细胞中miRNA?199a?5p表达量的变化，以及对皮肤成纤维细胞增殖、迁移、侵袭功能的影响。方法：分别用人皮肤成纤维细胞株（HSF）隔水52 ℃水浴30 s、60 s制造细胞热损伤模型，对比观察细胞热损伤状态；用四甲基偶氮唑盐（MTT）检测热损伤24 h、48 h后细胞的增殖率；用qRT?PCR检测热损伤24 h、48 h后细胞miRNA?199a?5p表达量的变化情况；用划痕和Transwell测试细胞的迁移、侵袭功能；用模拟物提高热损伤细胞中miRNA?199a?5p的表达量，检测热损伤细胞的增殖和侵袭情况。结果：52 ℃ 30 s可以很好地制造人皮肤成纤维热损伤模型；与对照组比较，热损伤后miRNA?199a?5p表达量下调［24 h，（2.67±0.35）%，P＜0.001；48 h，（18.42±0.44）%，P＜0.001］，细胞增殖显著受到抑制［24 h，（17.10±3.21）%，P＜0.002；48 h，（25.93±1.74）%，P＜0.001］，细胞的迁移功能显著下降［（35.35±7.07）%，P＜0.001］，侵袭功能亦被显著抑制［（57.14±9.52）%，P＜0.007］。通过模拟物提高热损伤细胞中miRNA?199a?5p的表达量后，细胞的增殖显著上调［（136.55±6.14）%，P＜0.003］，细胞的侵袭能力增强［（196.88±15.63）%，P＜0.003］。结论：热损伤人皮肤成纤维细胞中miRNA?199a?5p的表达量与细胞增殖、迁移和侵袭正相关，提高热损伤细胞中miRNA?199a?5p的表达量可以帮助热损伤细胞快速转归。     

介绍一种简易网状皮制作法

我们在制作网状皮时,除使用三用轧皮机外,还采用了将各种大张皮反铺缠绕于绷带上用手术刀刺孔的方法,孔之间距及行距均为1cm,如采用纵横交错刺孔也可取得同样效果。用自体皮和生理盐水浸泡后的冻干猪皮各10张,各边长均为10cm,用上述方法制成网状皮拉开后各边长平均为13cm 和12cm,扩大面积为69cm~2和44cm~2。我们认为这种方法在基层医院无轧皮机、皮源充足、不需扩大多少倍数的情况下,是一种简     

经楔前叶入路显微手术切除侧脑室三角区脑膜瘤3例

1对象与方法我科对3例侧脑室三角区脑膜瘤行经楔前叶入路显微手术切除,术后无并发症发生。其中男1例,女2例;年龄分别为38、42、54岁。临床表现为头痛1例,头痛加记忆力减退1例,体检发现1例。肿瘤大小分别为3.4、3.7、4.0cm。     

聚乙二醇修饰重人白细胞介素—2及其生物学特性

采用聚乙二醇活性酯化学修饰重组人白细胞介素－２及修饰后复性制得修饰产物ＰＥＧ－ｒＩＬ－２，ＰＥＧ－ｒＩＬ－２系列研究，经ＳＤＳ－Ｐ；ＡＧＥ和ＣＴＬＬ－２短期细胞２培养结合＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定，ＰＥＧ－ｒＩＬ－２分子量为２５ｋＤ，生物活性保留６９．７％；采用ＬＤＨ释放法测定证实ＰＥＧ－ｒＩＬ－２激活的ＬＡＫ细胞对人体肝癌细胞ＢＥＬ－７４０２和Ｋ５６２细胞的杀伤作用和ｒＩＬ－２相近甚至强于ｋＩＬ－     

天花粉蛋白对胃癌多药耐药细胞的细胞毒和诱导凋亡作用

目的研究天花粉蛋白(TCS)对胃癌多药耐药细胞细胞毒和诱导凋亡作用,探讨其治疗胃癌多药耐药的可能性.方法采用生长曲线、MTT、电镜、TUNEL染色和流式细胞仪等技术,研究TCS对胃癌多药耐药细胞SGC-7901/VCR和MKN-45/VCR的增殖抑制和诱导凋亡作用.结果 TCS明显抑制胃癌多药耐药细胞SGC-7901/VCR和MKN-45/VCR的生长,其作用与对其本细胞的抑制作用相近.TCS对SGC-7901/VCR和MKN-45/VCR细胞有较强的细胞毒作用,TCS对SGC-7901和SGC-7901/VCR的IC50分别为28.6μg/mL和35.3 μg/mL;对MKN-45和MKN-45/VCR的IC50分别为和10.67μg/mL和14.61μg/mL.TCS作用于MKN-45细胞后,光镜和电镜下能见到典型的细胞凋亡形态学特征:细胞核染色质致密浓缩,染色质断裂、凋亡小体形成等.TUNEL检测显示耐药细胞凋亡指数为2.8%～11.5%,流式细胞仪DNA直方图上出现典型的亚二倍体"凋亡峰",耐药细胞凋亡率在4.73%～21.5%,细胞凋亡与TCS作用时间和浓度相关.结论 TCS对胃癌多药耐药细胞有较强的细胞毒和诱导凋亡作用,具有治疗胃癌多药耐药的潜在价值.     

比目鱼肌肌瓣修复小腿胫前中、下段软组织缺损

目的 探讨应用比目鱼肌肌瓣修复小腿胫前中、下段软组织缺损合并胫骨开放性骨折和(或)骨髓炎的有效性.方法 2007年5月至2011年12月,应用远侧端为全部、近侧端为内侧部的蒂在上端的比目鱼肌肌瓣修复8例小腿胫中、下段软组织缺损合并胫骨开放性骨折和(或)骨髓炎患者,缺损面积为8 cmu×6 cm～12 cm×10cm,其中5例合并慢性骨髓炎,3例合并开放性骨折并发急性骨髓炎.比目鱼肌肌瓣表面以大张中厚皮片覆盖,供瓣区直接闭合.结果 8例患者所移植的比目鱼肌肌瓣,以及覆盖其上的大张中厚皮片均全部成活,且肌肉组织覆盖可靠、骨折愈合,术后随访2～54个月,小腿外形和功能均满意.结论 比目鱼肌肌瓣是修复小腿胫前中、下段软组织缺损合并胫骨开放性骨折和(或)骨髓炎的有效和可行的方法,供区损伤小,修复效果好.