带血管蒂筋膜瓣包裹组织工程骨修复兔桡骨缺损对降钙素基因相关肽和神经肽Y表达的影响

目的研究带血管蒂筋膜瓣包裹组织工程骨修复兔桡骨缺损对降钙素基因相关肽(CGRP)和神经肽Y(NPY)表达的影响。方法12只新西兰大白兔,每只动物均在左、右侧桡骨中段制作长1.5cm的骨与骨膜缺损,然后植入组织工程骨修复骨缺损,左侧采用带血管蒂筋膜瓣包裹组织工程骨(实验组),右侧仅放置组织工程骨(对照组)。于术后3、6、12个月分别处死4只动物,行免疫组化染色检测修复骨段内CGRP和NPY的表达,并用图像分析软件进行半定量分析。结果两组CGRP和NPY的表达量均随时间延长而增高(P<0.05),且各时间点实验组两者的表达均高于对照组(P<0.05)。3个月时两组CGRP阳性表达部位大致相同,多在血管和骨髓处,新生骨边缘和骨膜处也有少量阳性表达,而6和12个月时以骨膜处和血管周围最多。在各时间点两组的NPY阳性表达部位无明显差异,在灶状骨髓的血管周围表达最多,新生骨质边缘及骨膜处也有少量表达。结论与单纯组织工程骨植入相比,采用带血管蒂筋膜瓣包裹组织工程骨修复兔骨缺损在术后12个月内可以明显促进CGRP和NPY的表达。     

全自动免疫组化法与一代测序技术在检测人脑胶质瘤异柠檬酸脱氢酶1突变中的应用价值比较

目的:通过比较全自动免疫组化法与一代测序技术在检测人脑胶质瘤异柠檬酸脱氢酶1(isocitrate dehydrogenase 1,IDH1)基因突变中的优点和缺点,为临床检测脑胶质瘤IDH1基因突变提供有效的方案.方法:收集99例石蜡包埋的临床脑胶质瘤手术标本,采用全自动免疫组化染色机进行IDH1-R132H免疫组化...     

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂早期干预大鼠急性胰腺炎的疗效

目的观察急性胰腺炎大鼠血浆血管紧张素Ⅱ水平变化并探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂——缬沙坦(Valsartan)对其的早期干预作用。方法 54只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、急性胰腺炎组、缬沙坦干预组。采用胆胰管逆行注射法制做大鼠急性胰腺炎模型。缬沙坦干预组在制模后10 min给予缬沙坦 40 mg/kg。在病程不同时间点测定大鼠血清淀粉酶、脂肪酶、血浆血管紧张素Ⅱ水平,并观察胰腺组织病理学改变。结果急性胰腺炎组随病变进展,胰腺炎病理由水肿向出血坏死发展,血管紧张素Ⅱ水平持续升高。缬沙坦干预组血浆血管紧张素Ⅱ水平较急性胰腺炎组明显升高(P<0．05),其血清淀粉酶、脂肪酶水平,胰腺组织病理学评分较急性胰腺炎组明显下降(P<0．05)。结论早期应用缬沙坦可使急性胰腺炎大鼠血浆血管紧张素Ⅱ水平明显升高,对大鼠急性胰腺炎有一定的治疗作用。     

动静态不同牵张条件下大鼠骨髓间充质干细胞的增殖与分化

背景：在体外和体内关于细胞对于不同的机械牵张反应的大量研究表明,牵张能够刺激成骨。然而鲜有文献报道不同的牵张方式对于同种细胞的影响有何不同。目的：比较不同机械牵张方式对大鼠骨髓间充质干细胞的影响。方法：分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,应用自行研制的牵张装置对骨髓间充质干细胞分别施加动态、静态和模拟临床的混合牵张牵张刺激,分别检测3种刺激方式下骨髓间充质干细胞的增殖能力、碱性磷酸酶活性及Runx2基因的mRNA表达,并测量细胞骨钙素的分泌情况。结果与结论：静态牵张组与对照组相比,细胞增殖能力提高18．67％,碱性磷酸酶活性、Runx2表达及骨钙素分泌无明显差异：动态牵张组相对于对照组,细胞碱性磷酸酶活性提高60．33％,Runx2表达上升49．67％,细胞外骨钙素的分泌提高了48％,然而细胞增殖则受到了抑制;混合牵张组相对于对照组,细胞增殖能力稍有上升但无统计学差异,其对碱性磷酸酶活性、Runx2表达以及骨钙素的分泌有一定的促进作用,但没有动态牵张组明显。结果提示,静态牵张能够显著刺激骨髓间充质干细胞的增殖,而动态牵张对于刺激骨髓间充质干细胞成骨向分化作用更为明显,混合牵张方式对于细胞增殖及成骨分化均有一定的促进作用。     

磁共振波谱与胶质母细胞瘤特征分子的相关性研究

目的 探讨磁共振波谱(MRS)与胶质母细胞瘤(GBM)特征分子的相关性,为GBM的临床评估、个性化治疗方案的选择及预后评价提供依据.方法 回顾性分析本院60例经手术病理证实的GBM患者的1H-MRS表现,测量病灶实质区域的Cho/Cr、NAA/Cr及Cho/NAA值.同时,对60例患者的病理切片进行免疫组织化学染色,得到EGFR、IDH-1、P53、PTEN和NEFL特征性变化,根据染色面积进行评分.分析Cho/Cr、NAA/Cr及Cho/NAA与上述分子表达变化的相关性.结果 5个分子指标中,NEFL表达与Cho/NAA、Cho/Cr呈显著负相关(R2=-0.836,P＜0.001,R2=-0.427,P=0.001).ROC曲线分析表明当Cho/NAA值＜4.214时,GBM可能为神经元亚型的特异度和敏感度分别为89.5％和90.9％;当Cho/Cr值＜3.795时,GBM可能为神经元亚型特异度和敏感度分别为72.7％和73.7％.其余4个分子表达与1H-MRS代谢产物均无明显相关性.结论 1H-MRS参数可反映NEFL的表达,NEFL是GBM神经元亚型的特征性改变,因而1H-MRS可作为反映GBM神经元亚型的重要影像学标志.     

动静态不同牵张条件下大鼠骨髓间充质干细胞的增殖与分化

背景：在体外和体内关于细胞对于不同的机械牵张反应的大量研究表明,牵张能够刺激成骨。然而鲜有文献报道不同的牵张方式对于同种细胞的影响有何不同。 目的：比较不同机械牵张方式对大鼠骨髓间充质干细胞的影响。 方法：分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,应用自行研制的牵张装置对骨髓间充质干细胞分别施加动态、静态和模拟临床的混合牵张牵张刺激,分别检测3种刺激方式下骨髓间充质干细胞的增殖能力、碱性磷酸酶活性及Runx2基因的mRNA表达,并测量细胞骨钙素的分泌情况。 结果与结论：静态牵张组与对照组相比,细胞增殖能力提高18.67%,碱性磷酸酶活性、Runx2表达及骨钙素分泌无明显差异;动态牵张组相对于对照组,细胞碱性磷酸酶活性提高60.33%, Runx2表达上升49.67%,细胞外骨钙素的分泌提高了48%,然而细胞增殖则受到了抑制;混合牵张组相对于对照组,细胞增殖能力稍有上升但无统计学差异,其对碱性磷酸酶活性、Runx2表达以及骨钙素的分泌有一定的促进作用,但没有动态牵张组明显。结果提示,静态牵张能够显著刺激骨髓间充质干细胞的增殖,而动态牵张对于刺激骨髓间充质干细胞成骨向分化作用更为明显,混合牵张方式对于细胞增殖及成骨分化均有一定的促进作用。     

5氮杂胞苷联合干扰素-γ上调神经母细胞瘤细胞Caspase 8表达的研究

目的:应用去甲基药5氮杂胞苷(5AZA)和/或干扰素(IFNγ)诱导神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞Caspase 8的表达,并观察是否可以恢复NB细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的敏感性。方法:应用Western blot方法检测5AZA和/或IFNγ作用前后SY5Y细胞Caspase 8蛋白的表达;应用流式细胞术检测5AZA、IFNγ、TRAIL、5AZA和/或IFNγ+TRAIL、5AZA和/或IFNγ+Caspase 8抑制剂zIETD-FMK+TRAIL对NB细胞生长及凋亡的影响;应用比色法测定Caspase 8相对活性。结果:对TRAIL耐药的SY5Y细胞不表达Caspase 8,经5AZA和/或IFNγ处理后Caspase 8蛋白表达水平逐步增加;IFNγ与5AZA联合作用后其Caspase 8表达较单一用药明显增加。IFNγ和/或5AZA与TRAIL联用对SY5Y细胞有明显诱导凋亡作用。5AZA和/或IFNγ+TRAIL组的SY5Y细胞Caspase 8相对活性明显高于对照组、IFNγ组、5AZA组、TRAIL组及抑制剂组。结论:5AZA联合IFNγ可以明显上调NB细胞Caspase 8表达;表达Caspase 8的NB细胞对TRAIL的诱导凋亡作用敏感;TRAIL诱导NB细胞凋亡过程中伴随Caspase 8活性的增加。     

利用月经血建立的经血源性基质干细胞系

背景：经血源性基质干细胞被证实是一种新型的成体干细胞,目前国内关于其系统的建系方法报道极少。 目的：建立经血源性基质干细胞系,并鉴定其表型和多能性。 方法：收集健康成年女性的月经血,通过密度梯度离心法分离出经血源性基质干细胞进行培养,观察细胞的形态及增殖特性;采用CCK-8法检测各株细胞的增殖能力,定期收集细胞进行核型分析,采用流式细胞术检测细胞表面抗原CD34,CD38,CD44,CD45,CD73,CD90,CD105,Oct-4的表达,对细胞进行体外成脂和成骨诱导分化并鉴定。 结果与结论：成功从6名健康志愿者的经血中分离获得4株经血源性基质干细胞系。细胞呈现典型的梭状结构,具有46,XX核型,能在体外稳定迅速增殖,传代后大约48 h进入对数生长期,表达CD44,CD73,CD90,CD105及Oct-4,不表达CD38,CD34,CD45;成脂诱导22 d后油红O染色阳性,成骨诱导2周后茜素红染色阳性。实验表明经血源性基质干细胞具备扩增迅速、核型稳定、多潜能性等优点,通过建立经血源性基质干细胞系,为进一步的临床治疗应用以及科学研究奠定了基础。  中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

非小细胞肺癌胸水细胞块与组织学ALK检测的对比研究

目的:探讨非小细胞肺癌患者细胞学样本用于ALK基因断裂重组检测的临床价值。方法:收集具有组织学对照的细胞学样本102例,行免疫组化法,比较分析细胞块与组织块的ALK表达情况。免疫组化结果呈阳性的再行荧光原位杂交法检测ALK基因断裂重排情况。结果:组织块ALK免疫组化结果（+）、（++）、（+++）的共29例（阳性率为28.43%）;细胞块ALK免疫组化结果（+）、（++）、（+++）的共10例（阳性率为9.80%）。29例组织块和10例细胞块的ALK融合基因荧光原位杂交结果均阳性,荧光原位杂交结果与免疫组化结果一致（一致率为100%）。结论:细胞块ALK免疫组化的阳性检出率低于组织学结果,ALK荧光原位杂交结果与免疫组化结果一致。     

Caspase-8在TRAIL诱导神经母细胞瘤细胞凋亡中的作用

目的：应用干扰素(IFNγ)诱导神经母细胞瘤（neuroblastoma, NB）细胞caspase 8的表达并观察其是否可以恢复NB细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）的敏感性。方法：应用RT PCR方法检测IFNγ作用前后NB细胞caspase-8 mRNA的表达;应用Alamar Blue法及流式细胞术检测IFNγ、TRAIL、IFNγ+TRAIL、IFNγ+caspase-8抑制剂zIETD-FMK+TRAIL对NB细胞生长及凋亡的影响;应用比色法测定NB细胞caspase-8相对活性。结果：对TRAIL敏感的CHP212细胞表达caspase-8,且经IFNγ处理后caspase-8 表达水平逐步增加;对TRAIL不敏感的SY5Y细胞不表达caspase-8,IFNγ作用后其caspase-8 mRNA表达明显增加。IFNγ与TRAIL联用对SY5Y细胞有明显诱导凋亡作用。CHP212细胞caspase-8相对活性随TRAIL作用时间的延长逐步升高;IFNγ与TRAIL联合作用的SY5Y细胞caspase-8相对活性明显高于未加药物处理的对照组、IFNγ组、TRAIL组及抑制剂组。结论：表达caspase-8的NB细胞对TRAIL的诱导凋亡作用敏感,TRAIL诱导NB细胞凋亡过程中伴随caspase-8活性的增加。［中国当代儿科杂志,2010,12(11)：902-907］