特异性反义寡核苷酸抑制白血病细胞株HLA—DPB1基因表达

反义寡核苷酸可以特异性地抑制基因表达，将ＨＬＡ０ＤＰＢ１特异性反义寡核苷酸加入细胞培养基中，对ＨＬ－６０和Ｋ５６２白血病细胞株由γ－干扰素诱导的ＨＬＡ－ＤＰＢ１表达有特异性抑制作用。当反义寡核苷酸浓度在４０μｇ／ｍｌ时，１小时后即出现ＨＬＡ０ＤＰＢ１基因表达抑制现象，持续时间达４８小时，７２小时后表达又逐渐恢复；反义寡核苷酸抑制基因表达有很高的特异性，在ＨＬＡ－ＤＰＢ１表达完全被封闭的情况下，与它     

PCR和SSO探针分析HLA－DQ位点的基因型探讨

用ＰＣＲ－ＳＳＯ方法对４２名汉族常人ＨＬＡ－ＤＱＡ、ＤＱＢ位点多态性等位基因进行了基因型分析。结果发现，ＤＱＡ位点有２０种基因型，ＤＱＡ０１０１／０１０３占２１％，ＤＱＡ０１０１／０５０１占１１．９％。ＤＱＡ０１０１／０１０３、０１０１／０５０１和０１０１／０６０１三种杂合子基因型占研究人数的４２．８％。ＤＱＢ位点２１种基因型，以ＤＱＢ０６０１／０６０４ｂ为最高，占１９％，ＤＱＢ０６０１／０４０２和ＤＱＢ０６０１／０３０１各占１１．９％。只一例ＤＱＢ０６０１／０６０１为纯合子基因型。     

转导野生型p53的K562细胞出现生长抑制和凋亡

把重组有编码野生型p53的逆转录病毒载体转导到p53蛋白缺失的K562细胞,以观察野生型p53蛋白在K562细胞表达后对K562细胞增殖和凋亡的影响。应用RT-PCR和Western印迹杂交方法检测K562细胞p53表达,应用流式细胞仪计数检测细胞的增殖,采用梯形DNA和细胞形态学方法检测细胞凋亡变化。研究结果表明:感染pLXSN-p53病毒24小时后,K562细胞p53表达阳性,K562-p53细胞的生长受到抑制,少数细胞进入凋亡状态。结论提示,野生型p53可促进p53表达阴性的K562细胞生长抑制与凋亡。     

从同一外周血标本制备总RNA和DNA

在基因水平的临床研究中,常需要从人外周血白细胞中提取染色体DNA,以研究其基因的缺陷,或者制备细胞总RNA,以研究某基因的表达。需要同时了解基因的结构改变和功能异常时,从一份病人外周血或骨髓中同时分离出染色体DNA和细胞总RNA,无论从标本的来源、提取简便等方面考虑都是临床分子生物学研究的一个很实际的问题。 由细菌或培养细胞中同时分离DNA和PNA的方法已有报道。郭传海等介绍一种从小量样本同时提取RNA和DNA的方法,其提取总RNA采用异硫氰酸胍超离心法。最近我们参照汪洛等制备培养细胞总RNA的简便方法建立了由血细胞临床标本同     

护理继续教育现状分析及对策探讨

通过对北京三所三级甲等综合性医院在岗护士进行问卷调查,搜集有关护理人员基本情况和继续教育方面的资料并进行分析,结果表明大多数临床护士年轻、学历低、缺乏新知识和学习机会,根据这一现状并借鉴国外护理继续教育经验和临床需求,提出探讨性建议:提高对护理继续教育重要性的认识,进一步完善护理继续教育体制,建立激励机制等,以期切实搞好护理继续教育,以利我国护理事业发展。     

转化生长因子-β1对脐血单个核细胞增殖周期及凋亡的影响

通过检测转化生长因子 β1 (TGF β1 )对脐血单个核细胞增殖周期及凋亡的作用 ,探讨其对造血进行负调控的机制。采用 5′ 溴脱氧尿嘧啶核苷 (BrdU)掺入法检测TGF β1 对细胞DNA合成的影响 ;应用Westernblot检测TGF β1 对G1 期细胞周期蛋白cyclinA ,cyclinD1,CDK2和CDK4表达的影响 ;用姬姆萨染色和流式细胞分析法检测TGF β1 对细胞凋亡的作用。结果表明 :①培养细胞加入 10 %胎牛血清 (FBS)和 1,2及 5ng ml的TGF β1 12小时后 ,BrdU的OD值与对照 (10 ?S)组相比有显著性差异 (P <0 .0 1) ;继续培养 2 4小时后 ,1ng mlTGF β1组的BrdU检测OD值与 10 ?S组相比无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,而 2ng ml和 5ng mlTGF β1 组的OD值与10 ?S组相比差异有显著性 (P <0 .0 5 )。②与对照组相比 ,2ng mlTGF β1 还可明显抑制cyclinA ,cyclinD1,CDK2和CDK4的表达。③与 2ng mlTGF β1 共培养 12和 2 4小时后 ,细胞出现凋亡特征性改变 ,凋亡率分别为14 .4 2 %和 31.98% ;而对照组未见明显形态变化 ,凋亡率分别为 4 .71%和 5 .76 %。结论 :TGF β1 可通过抑制造血细胞DNA的合成和G1 期细胞周期蛋白的表达 ,从而阻止细胞进入S期 ,抑制细胞增殖。TGF β1 还可促进造血细胞凋亡 ,因而是一个重要的造血负性调控因子。     

髓性白血病细胞p53基因表达下调

以反转录—半定量ＰＣＲ法分析了正常人、白血病细胞株以及髓性白血病患者的白细胞ｐ５３ＲＮＡ的表型。结果发现，正常人外周血及骨髓白细胞都有ｐ５３ｍＲＮＡ的中度表达（ｐ５３ｍＲＮＡ／β－ａｃｔｉｎｍＲＮＡ的比值外周血为０．７８８±０．０９２，骨髓为０．７８１±０．０３２），ＨＬ６０及Ｋ５６２细胞株则无正常ｐ５３ｍＲＮＡ表达，而２１例髓性白血病患者的骨髓白细胞ｐ５３ｍＲＮＡ的水平均有明显降低（ｐ５３ｍＲＮＡ／β－ａｃｔｉｎｍＲＮＡ＝０．４３３±０．１８１，Ｐ＜０．０１）。这一现象的分子机制及其临床意义尚有待深入探讨     

基因工程与优生

是遗传的基本单位。它由双链DNA组成(有些病毒基因是RNA，如甲型肝炎病毒、艾滋病病毒等)。具体说基因是由一段具有一定核苷酸序列、一定组织结构的双链DNA组成，其中的编码序列，编码一种特定的蛋白质。酶蛋白也是由基因编码的。从分子水平观察生物体的表现它也是由蛋白质的酶决定的。例如血红蛋白其结构蛋白是珠蛋白，它的氨基酸序列上发生突变就会得遗传性贫血病一地中海贫血：皮肤的黑色，是由酪氨酸酶催化酪氨酸产生的黑色素所致，如果该酶发生突变，失去功能不能产生黑色素，就会得一种遗传病一白化病。其蛋白水平的表现称为分子表型，这是由于基因发生突变所致，分子表型是由其基因决定的，相对于分子表型的基因类型称为基因型。     

宫腔镜联合中药灌肠治疗输卵管粘连的临床观察

目的 :观察因输卵管粘连引起不孕症应用宫腔镜联合中药保留灌肠使输卵管通畅及受孕的疗效。方法 :12 0例患者随机分成A、B两组 ,于月经干净 2～ 3天 ,使用宫腔镜行双侧输卵管通液或疏通术。A组同时加用中药保留灌肠 ,每晚 1次 ,直至受孕 (经期停用 )。结果 :A组输卵管通畅率及受孕率分别为 6 8 33%和 5 3 33% ,显著高于B组的 6 0 % (P <0 0 5 )和 4 1 6 6 % (P <0 0 5 )。结论 :使用宫腔镜疏通术联合中药保留灌肠能显著提高输卵管通畅率及受孕率     

接受肾移植妇女生的小孩

肾移植后母体生下的小孩,文献报道60例左右,指出婴儿出生时体重低,肾上腺功能不全,内脏畸形、染色体异常,新生儿期淋巴细胞减少,HB感染等。作者等经过长期的随访发现他们和出生于健康母体的小儿并无特别注目的差异。本文介绍5例这类4至9.5岁的小儿,探讨新生儿期及后来的生长情况。