应用Ki-67单克隆抗体评估人脑肿瘤的增殖特性

Ki-67是一种抗增殖细胞核抗原的鼠的单克隆抗体,处于G_1、S、G_2及M期的细胞均可被标染。本文采用免疫组化方法,利用Ki-67单抗对40例脑肿瘤冰冻切片及4个胶质瘤体外细胞系的生长率进行了检测,结果发现: 1 标记的Ki-67阳性细胞百分率与肿瘤的病理组织学分型及分级有关;     

pcDNA3/TCRγV1真核表达载体的构建及表达

目的：构建含TCRγV1基因的真核表达质粒并检测其存小鼠骨骼肌中的表达。方法：从人淋巴瘤Jurkat细胞中提取RNA,用RT-PCR法扩增含BamH Ⅰ与Hind Ⅲ酶切位点的TCRγV1基因序列,将TCRγV1基因PCR产物插入pcDNA3后转化到大肠杆菌DH5α,阳性克隆酶切鉴定后测序分析。大量提取质粒,股四头肌注射法免疫小鼠,RT—PCR法检测小鼠肌肉巾TCRγV1 mRNA的表达。结果与结论：pcDNA3／TCRγV1重组质粒构建成功,并能在小鼠骨骼肌中表达。     

应用艾恒亚叶酸钙5-氟脲嘧啶方案(FOLFOX4)治疗晚期大肠癌35例疗效观察

目的评价改良的FOLFOX4方案治疗晚期大肠癌的疗效和毒性。方法艾恒（国产奥沙利铂）85mg／m^2静滴2hd1;亚叶酸钙（CF）200mg／m^2静滴2hd1-2,5-氟脲嘧啶（5-Fu）400mg／m^2静脉推注d1-2（或快速静脉滴入）,5-Fu600mg／m^2持续静脉滴注（CIV）22hd1-2,每14d为1周期（2周期后进行疗效评价）。结果全组35例患者,总有效率（CR＋PR）为57．14％,中位肿瘤进展时间（TTP）为8．1个月。主要不良反应为随累积剂量增加外周神经感觉异常、口腔黏膜炎、骨髓抑制、恶心呕吐和腹泻,但多为Ⅰ-Ⅱ度。结论改良的FOLFOX4方案治疗晚期大肠癌疗效较高,毒副反应可耐受。     

实时荧光定量PCR检测MMP-3 mRNA在大肠癌的表达

目的探讨大肠癌组织MMP-3 mRNA表达及其临床意义。方法用实时荧光定量PCR检测56例大肠癌组织及癌旁正常组织MMP-3 mRNA表达，分析MMP-3 mRNA表达与大肠癌临床病理因素之间的关系。结果癌组织和癌旁正常组织MMP-3 mRNA表达有显著差异（P〈0．05）。癌组织MMP-3 mRNA表达与淋巴结转移、组织学类型、血管侵犯、肝转移及肿瘤病理分期密切相关（P〈0．05），与肿瘤部位、肿瘤大小、及患者的性别和年龄等无关（P〉0．05）。结论MMP-3高表达同大肠癌生物学行为密切相关，可能与大肠癌的发生、发展及预后有关联。     

食管癌化疗前后AgNORs颗粒数变化与疗效的关系

本文对２２例食管鳞癌患者联合化疗前后活检或手术标本进行核仁形成区染色，比较同一患者化疗前后部细胞ＡｇＮＯＲｓ颗粒数，分析颗粒数变化与临床化疗的关系。结果显示１２例化疗有效者ＡｇＮＯＲｓ颗粒数均明显减少，化疗无效者颗粒都无明显变化。     

全反式维甲酸对EC9706荷瘤裸鼠抑瘤作用的实验研究

目的：观察全反式维甲酸的体内抗肿瘤作用，探讨其体内抑瘤的作用机制。方法：采用裸鼠EC9706人食管癌细胞实体瘤模型进行体内抑瘤实验研究，应用全反式维甲酸10d后处死裸鼠，观察荷瘤裸鼠的肿瘤生长情况，测定肿瘤生长抑制率；HE染色对肿瘤组织进行细胞形态学观察，TUNEL法检测肿瘤组织中细胞凋亡，免疫组织化学法检测凋亡相关基因bax及bcl-2蛋白的表达情况。结果：全反式维甲酸对裸鼠EC9706人食管癌细胞实体瘤生长具有明显的抑制作用，抑瘤率达60％以上。组织学观察及TUNEL检测结果显示，肿瘤组织中散在凋亡细胞和凋亡小体。免疫组织化学检测结果显示，凋亡相关基因bax蛋白表达增加，bcl-2蛋白表达下降。结论：全反式维甲酸具有较强的体内抗肿瘤作用，作用机制与诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

人MT1H 基因对肺腺癌细胞A549 增殖的影响及其机制

 目的 研究外源性人金属硫蛋白1H（MT1H）基因稳定转染对肺腺癌细胞A549生长的影响及其机制。方法 构建MT1H基因真核表达质粒pcDNA3．1（-）-MTIH，以脂质体法转染A549细胞，经G418筛选，获得阳性单克隆细胞。用RT-PCR和Western blot技术检测转染前后MT1H mRNA和蛋白表达，MTT实验检测其增殖能力的变化，流式细胞仪分析细胞周期时相分布。然后RT-PCR检测cy-clinD1的表达。结果 MT1H在A549细胞中获得表达。与未转染组和空质粒转染组比较，pcDNA3．1（一）～MT1H转染组细胞增殖速度明显增快，G0／G1期细胞减少，S期细胞增多，cyclinD1 mRNA水平明显升高。结论 MT1H能够促进肺腺癌细胞A549增殖，可能和上调cyclinD1促使细胞进入S期增多有关。     

IL-2与TCRγ独特型DNA疫苗联合诱导小鼠特异性免疫反应

目的:观察白细胞介素 2 (IL- 2)与TCRγ独特型DNA疫苗诱导BALB/c小鼠抗肿瘤独特型免疫反应。方法: 24只 6~8周的健康纯系雄性BALB/c小鼠随机均分为 3组,在小鼠双侧股四头肌肌内注射 2. 5g/L盐酸布比卡因,每侧 50μl, 1次 /d, 5d后分组免疫。各小鼠分别于第 1周、2周、4周各免疫 1次,共 3次。①A组: 每次于股四头肌肌内注射pcDNA3. 1 100μg; ②B组:每次于股四头肌肌内注射pcDNA3. 1 TCRγ100μg;②C组:每次于股四头肌肌内注射pcDNA3. 1 -TCRγ100μg及IL 2 5μg。于末次免疫接种后第 5d将每组小鼠随机选 2只处死,分离出胫前肌,RT PCR法检测重组质粒在小鼠骨骼肌中的mRNA表达;间接免疫荧光法检测小鼠血清中抗体生成情况。结果:在pcDNA3. 1 TCRγ组及pcDNA3. 1- TCRγ+IL- 2组小鼠中用RT PCR法均检测到了重组质粒在肌肉中的mRNA表达。pcDNA3. 1- TCRγ组及pcDNA3. 1 -TCRγ+IL 2组小鼠血清中均产生了特异性抗独特型抗体。在第 6周时,pcDNA3. 1 -TCRγ组小鼠抗体滴度最高达 1160;pcDNA3. 1 TCRγ+IL 2组小鼠抗体的滴度最高达 1640, 2组差异有统计学意义 (P< 0. 01 )。结论:TCRγ表达载体pcDNA3. 1 -TCRγ可以诱导小鼠产生特异性抗淋巴瘤细胞独特型抗体;应用IL -2免疫佐剂可使TCRγ独特型DNA疫苗     

新争光霉素治疗中晚期癌近期疗效

争光霉素是属于碱性水溶性糖肽类抗癌抗菌素,自1971年鉴定投产以来,临床证明对鳞癌,特别是对头颈部鳞癌效果较好。经检定与日本博来霉素(Bleomycin)是同一类物质。但其主要组分不同,日本商品博来霉素的主要组分是 A_2,而争光霉素主要组分为 A_5,现此种单—A_5组分定名为“平阳霉素”,经实验证明对多种移植性动物肿瘤抑制率在90%以上,具有广谱抗肿瘤作