HBsAg、HSV-2gD双抗原真核表达载体的构建

目的利用简并引物PCR法及重叠PCR法构建HBsAg(S),HSV-2gD模拟抗原表位P6及天然抗原表位NP6,IL-18真核表达载体,并对其表达能力进行鉴定,为后期疫苗的研制奠定基础。方法采用简并引物PCR法扩增IL-18-P6(包括P6-IL-18)片段及IL-18-NP6(包括NP6-IL-18);根据GenBank(FJ589066.1)公布的S基因设计引物,扩增获得含有重叠区的S片段(包括S1,S2,S3,S4);采用重叠PCR法扩增三基因融合片段IL-18-P6-S,IL-18-NP6-S,S-P6-IL-18和S-NP6-IL-18,经纯化回收后将其克隆到原核载体pMD 18-T simple vector中,测序正确的目的片段插入真核表达载体pcDNA3.1(-),构建重组质粒pcDNA3.1-IL-18-P6-S,pcDNA3.1-IL-18-NP6-S,pcDNA3.1-S-P6-IL-18和pcD-NA3.1-S-NP6-IL-18,采用间接免疫荧光法检测靶基因的表达情况。结果成功构建了含有双抗原的真核表达载体pcDNA3.1-IL-18-P6-S,pcDNA3.1-IL-18-NP6-S,pcDNA3.1-S-P6-IL-18和pcDNA3.1-S-NP6-IL-18。脂质体介导真核表达载体转染CHO细胞,间接免疫荧光法检测细胞浆中有黄绿色荧光。结论构建的真核表达载体pcDNA3.1-IL-18-P6-S,pcDNA3.1-IL-18-NP6-S,pcDNA3.1-S-P6-IL-18和pcDNA3.1-S-NP6-IL-18能在CHO细胞中有效表达。     

脑白质疏松症

脑白质疏松症已作为神经影像学的术语，由于神经影像学的发展，在老年人群中发现越来越多的白质异常，文章对脑白质疏松症的临床表现，影像学特点，病理，发病机制，危险因素及临床意义作了综述。     

多项目联合检测在类风湿性关节炎诊断及活动度鉴别中的价值研究

目的 探讨淋巴细胞亚群、免疫球蛋白游离κ链、游离λ链、补体C3、C4以及其他常用检测指标在类风湿性关节炎(RA)诊断及其活动度判断中的价值。方法 选取2020年3月—12月在金华市中心医院住院的215例RA患者作为患者组,根据DAS28评分将RA患者分为活动期组(127例)和稳定期组(88例),同时期149例健康体检者作为正常组,比较研究组和正常组、RA活动期组和稳定期组类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸多肽抗体(抗CCP)、红细胞沉降率(ESR)、C-反应蛋白(CRP)、淋巴细胞亚群以及免疫球蛋白游离κ、λ链、补体C3、补体C4等指标水平,并采用ROC曲线评估其对RA的诊断和判别RA活动期的价值。结果 研究组215例,正常组149例,研究组Th细胞、Ts细胞、游离κ链、游离λ链、抗CCP、ESR、CRP、RF高于正常组,差异有统计学意义(P <0.05)。活动期组的年龄、Td细胞、C3、游离κ链、游离λ链、ESR、CRP等指标均高于稳定期组,差异有统计学意义(P <0.05)。当RF的临界值为16.5 U/ml时,AUC为0.993,敏感度为80.0%,特异度为94.6%,诊...     

中空栓剂的临床应用前景展望

<正> 栓剂的临床应用发展到现在已有400余年的历史。临床上常用的普通栓剂(CTS)系指药物粉末与基质混合制成的固体制剂,塞入腔道(直肠、阴道)后,基质逐渐溶化,药物亦逐渐溶出吸收而发生药理作用,从而起到局部止痒、抗痔、止血、消炎及全身的消炎、镇痛、解热、镇静、催眠等作用。随着科学技术的不断发展,近几年来各种新剂型不断出现,1984年从日本兴起的中空栓(HTS)新型栓剂较普通栓剂具有许多优点。现介绍如下:     

实验室运用模式的探讨

现代化实验室是医学院校培养综合型、高素质人才的必需硬件,随着知识经济时代的到来和社会主义市场经济体制的逐步建立,实验教学的改革势在必行,通过实验室的开放及多个实验室合作等方式形成的特色实验室对学科优势的形成具有奠基和促进作用。     

修眉术在提眉术中的应用

随着年龄的增长，面部皮肤渐渐老化松弛，上睑松垂出现“三角”眼，双眉下垂出现“八”字眉，双眼的神采被遮盖，甚至影响视野，出现忧伤垂老样貌，临床上通常采用提眉术来解决这类问题。自2006年8月至2007年11月，我们在为58例求美者行提眉术时，将修眉技术应用于术前切口线的设计，效果良好，报告如下。     

3例原发性胆汁性肝硬化诊断治疗体会

目的探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)诊断、治疗体会、注意事项。方法笔者2000年至今,对3例PBC患者进行不间断观察治疗。结果对3例PBC患者从诊断、治疗、注意事项、预后进行全方位观察,为PBC患者诊断、治疗、预后提供一管之见,治疗中患者症状控制良好,提高了生存质量,明显改善预后,值得临床推广应用。     

RP-HPLC梯度洗脱测定叶下珠中没食子酸的含量

叶下珠PhyllanthusurinariaL.为大戟科叶下珠属植物叶下珠的干燥全草,具有平肝清热、利水解毒的功效。现代药理实验证明,叶下珠具有抗乙肝病毒、保肝等作用[1]。没食子酸为其有效成分之一,是可水解鞣质的单体,具有抗病毒作用,在多种中药材中存在。然而,已报道的没食子酸测定方法对杂质干扰耐受力不强,重现性较差。没食子酸相对分子质量小,结构中带有羟基和羧基,极性很大,通常只适合用正相键和柱分析,但是正相柱使用成本高,不及反相柱普及率高,如何建立适合反相色谱柱分析的方法尤显重要。在反相柱上测定没食子酸含量,关键是增大流动相中水…     

红景天多对小鼠体内脾淋巴细胞转化反应及NK细胞活性的影响

首次选取西藏红景天中撮出的红景天多糖（ＲＰＰＳ），以环磷酰胺（ＣＹ）复制出免疫功能低下小鼠模型，观察了ＲＰＰＳ对小鼠外周血白细胞总数、血红蛋白含量、胸腺重量以及细胞免疫功能的影响。结果表明，ＲＰＰＳ对小鼠外周血ＷＢＣ及胸腺重量无显著影响，对外周血Ｈｂ含量的在正常小鼠有降低作用，而在免疫低下小鼠则有提升作用。ＲＰＰＳ可促进正常小鼠脾淋巴细胞转化反应及ＮＫ细胞杀伤活性，同时又可使免疫受抑小鼠上述指标逆     

喹诺酮类药物不良反应及药物相互作用

喹诺酮类药物是一种人工合成的抗菌药，已被临床广泛应用，随着喹诺酮类药物在临床的广泛应用，有关其应用所致不良反应的报道也日趋增多。笔者通过查阅文献总结其多年来不良反应报告及药物相互作用。发现该类药物在消华系统、肝肾、骨骼、皮肤、心脏、中枢系统等均有不良反应报告，并与多种药物发生相互作用。现概述如下。