3种玻璃化液对新生鼠卵巢的渗透反应及冻存效果的比较

目的:探索适宜新生鼠卵巢保存的玻璃化液和冷冻方案。方法:观察新生SD大鼠卵巢在预平衡液及3种玻璃化液中不同时间段的表面积变化,冻融后进行组织学观察和成年SD大鼠肾被膜下异体移植后在体活力分析。结果:新生鼠卵巢在预平衡液中出现渗透性脱水变化,移入EFS40(A组)、EG5.5(B组)、EG5.5/30(C组)3种玻璃化液中,再次剧烈皱缩。3min后,卵巢表面积分别为等渗液对照组表面积的63.2%、82.4%、70.8%。此脱水状态的卵巢玻璃化冻融后形态完整的卵泡百分率均与新鲜移植组(D组)无显著性差异(P>0.05);异体移植后,动情周期出现率和动情周期出现时间均与D组无显著性差异(P>0.05)。各冷冻移植组存活移植物均可见不同发育阶段的各级卵泡,但卵泡数目少于D组,移植20d时A组与D组间有显著性差异(P<0.05);移植60d时B组卵泡数少于D组,组间有差异(P<0.05);C组在各时间点上取材的卵泡数与D组均无差异(P>0.05)。结论:在预平衡液中15min、改良的EG5.5/30液中3min的二步渗透平衡法适宜新生鼠卵巢的玻璃化冷冻。     

创新五年制临床医学专业实践教学模式

为适应新医学模式的转变,宁夏医科大学从自身实际出发,针对五年制临床医学专业教学与市场需求脱节、基础与临床脱节、综合性实践技能培训少以及临床见、实习环节薄弱等问题,通过正确定位人才培养目标、优化实践教学内容、构建新型综合性实验课程、创新临床见实习教学方式等途径加强了临床医学专业实践教学改革,并对进行了有益探索。     

GDNF干预对化疗致精原干细胞耗竭小鼠生精细胞恢复效果的研究

目的：研究外源胶质细胞源性神经营养因子（ glialcell line - derived neurotrphic factor, GDNF）对化疗致不育小鼠生精细胞的恢复效果,明确GDNF促进在体精原干细胞再生的效果。方法：4周龄雄性C57小鼠腹腔注射白消安（30mg／kg）,注射后4周按601．Lg／kg体重剂量腹腔注射GDNF进行干预,每天一次连续注射7d。在干预后第4周收集睾丸,检测睾丸重量、通过HE染色检测生精小管中生殖细胞恢复情况;通过RT—PCR检测GDNF和SCF基因表达评价GDNF注射对小鼠精原干细胞微环境的影响。结果：在GDNF干预后第4周,睾丸重量明显得到恢复,生精小管中上皮细胞数量明显得到恢复,精原干细胞微环境中再生因子GDNF和分化因子SCF表达水平稳定。结论：GDNF干预可以促进化疗致精原干细胞耗竭小鼠睾丸中生精细胞数量明显恢复,且维持了精原干细胞微环境中再生分化调控的平衡关系。     

饮食干预对老年髋部手术合并高血压患者电解质影响的研究*

目的：探讨老年髋部手术合并高血压患者采取饮食干预对其电解质的影响效果。方法：按照随机抽样的方式选择我院收治的老年髋部手术合并高血压患者100例作为研究对象，纳入时间2013年1月—2016年12月，纳入研究对象临床资料完整，愿意配合研究，以随机数表法分组，每组50例。对照组患者按照围术期常规护理模式护理，观察组患者则加用针对性饮食干预，两组患者均随访半年以上，评价随访半年时疗效，检测护理前后电解质(钠、钾、镁、氯、钙)水平，调查患者对护理满意率，记录电解质紊乱发生率，并测评护理前后焦虑自评量表(self-rating anxiety scale, SAS)与抑郁自评量表(self-rating depression scale, SDS)评分，统计分析两组护理前后指标的变化情况。结果：随访半年时，观察组疗效总有效率高达92.00%，显著高于对照组(78.00%)(P<0.05)；两组患者护理前电解质水平差异无统计学意义(P>0.05)，护理后两组在钠、钾、镁、氯、钙水平上差异均有统计学意义(均P<0.05)；两组患者护理前SAS与SDS评分差异无统计学意义(P>0.05)，护理后观察组均显著低于对照组(P<0.05)；观察组患者对护理满意率为96.00%，显著高于对照组(80.00%)(P<0.05)；观察组电解质紊乱发生率为8.00%，显著低于对照组(22.00%)(P<0.05)。结论：老年髋部手术合并高血压患者加强饮食干预，除了可以改善疗效与护理满意率，还能更好地维持电解质水平，减少电解质紊乱发生，缓解负面情绪，值得借鉴。     

枸杞多糖对精原干细胞体外增殖的影响

背景：精原干细胞移植对不育具有潜在的临床应用价值,体外建立精原干细胞的培养系统获得数量较多的精原干细胞,仍是目前研究中亟待解决的问题。 目的：观察枸杞多糖对精原干细胞体外增殖的影响。 方法：采用两步酶消化法获取出生4~6 d雄性C57BL/6小鼠睾丸Sertoli细胞与精原干细胞,将精原干细胞接种在Sertoli细胞饲养层上,再加入枸杞多糖或联合细胞因子添加到细胞培养液中。1周后以流式细胞仪检测细胞周期及细胞活性率,并检测各组精原干细胞GFRa-1、Thy-1、c-kit的阳性率。 结果与结论：单独加入枸杞多糖后精原干细胞数量明显增加,增殖明显,联合加入胶质细胞源性神经营养因子与白血病抑制因子精原干细胞增殖更加明显(P < 0.05)。并发现体外培养1周后的精原干细胞仍保持其睾丸组织内的精原干细胞特征,大多仍维持在未分化状态。表明在枸杞多糖或枸杞多糖联合胶质细胞源性神经营养因子及白血病抑制因子作用下,可促进精原干细胞体外增殖。     

枸杞多糖对胎儿卵巢组织冷冻保存的影响◆

背景:抗氧化剂的应用对于提高卵巢组织冻存后的活力起着很重要的作用.目的:通过观察冷冻保存的胎儿卵巢组织异种移植到裸鼠肾被膜下的发育情况,探索枸杞多糖在卵巢组织冷冻保存中的作用.方法:实验分为4组.①新鲜移植组:取材后的新鲜胎儿卵巢组织直接进行移植.②冻存对照组:冷冻保护液为基液.③β-巯基乙醇组:冷冻保护液为基液添加100μmol/L β-巯基乙醇.④枸杞多糖组:冷冻保护液为基液添加400 mg/L枸杞多糖.对冷冻复温后的胎儿卵巢皮质块进行祼鼠的肾被膜下移植,并于移植后12周取材.结果与结论:各组在移植物的存活率上差异无显著性意义(P >0.05).在卵泡计数上冷冻对照组最低(P <0.05).在卵泡的存活率上,各组间差异均有显著性意义,其中以冷冻对照组最低,枸杞多糖组最高.β-巯基乙醇组和枸杞多糖组卵巢超微结构较冷冻对照组保存的好.提示400 mg/L的枸杞多糖和100μmol/L的β-巯基乙醇有利于卵巢组织的冷冻保存,并可显著提高冷冻卵巢组织移植后的存活率.     

热应激处理对精原细胞增殖的影响

目的了解热应激对小鼠精原细胞增殖情况的影响,探讨高温造成男性短期不育的机制。方法 8周龄雄性昆明白小鼠于43℃水浴中进行睾丸局部热应激处理15min,于一次性处理后1、12、18、25d以及35d通过PCNA免疫荧光组化法检测精原细胞增殖情况;于一次性处理后4、2、10、15、20d以及25d通过RT-PCR检测GDNF和SCF基因表达情况。结果在热处理后第12d和18d,精原细胞增殖系数分别为22%和75%,明显低于(P<0.05)对照组的93%;25d时,精原细胞增殖水平恢复至正常水平。GDNF mRNA的表达量在处理后4h到第15d显著下调(P<0.05);SCF mRNA的表达量在热处理后第4h到第10天显著下调(P<0.05)。结论睾丸局部热应激处理使得GDNF和SCF基因表达在处理后短时间内下调,精原细胞增殖短时间内抑制。     

卵巢摘除对急性肝损模型鼠脑血管内皮细胞凋亡的影响

目的研究卵巢摘除对于急性肝损伤模型鼠脑血管内皮细胞功能的影响。方法对去势(卵巢摘除)与未去势小鼠分别给与四氯化碳制备急性肝损伤模型,另设单纯卵巢摘除组及空白对照组;免疫组织化学法观察各组小鼠脑血管内皮细胞Bax及Bcl-2的表达。结果发现各组小鼠嗅脑及皮层等脑区毛细血管内皮细胞Bax阳性表达结果类似;而Bcl-2表达存在明显差异,急性肝损伤组嗅脑及皮层等各脑区毛细血管内皮细胞Bcl-2阳性表达呈强阳性;而去势+急性肝损伤组各脑区Bcl-2的阳性表达均偏弱。结论卵巢摘除或卵巢功能退化会影响脑血管内皮细胞应对化学毒性损伤时的抗凋亡功能,从另一个侧面揭示了卵巢相关激素的脑保护作用。