改良的玻璃化液冻存乳鼠卵巢异体原位移植后生殖功能的恢复

目的 探讨一种改良的玻璃化液冻存乳鼠卵巢,复苏后进行异体原位移植,评价其对卵母细胞成熟、受精及胚胎发育潜能的影响。方法 乳鼠卵巢进行ED20和改良的EG5.5/30液玻璃化冻存,复苏后的乳鼠卵巢一部分酶解消化,通过荧光活力检测卵子的存活率;激光共聚焦显微镜观察α-tubulin的免疫荧光检测卵子内细胞骨架的变化。一部分乳鼠卵巢进行成年去势雌鼠的原位移植。标本随机分为新鲜组和新鲜移植组;ED20液冷冻组和ED20液冻融移植组;EG5.5/30液冷冻组和EG5.5/30冻融移植组。术后15 d,受体鼠同雄鼠合笼,统计移植6个月内的产仔情况;术后6个月,检测恢复动情周期的受体鼠雌二醇(E2)水平。结果 玻璃化冻融乳鼠卵巢后,ED20液冷冻组和EG5.5/30液冷冻组卵子存活率(87.0%,84.6%)低于新鲜组(92.6%)(P<0.05);冻融后卵子内微丝和微管结构受损,荧光强度均低于新鲜组(P<0.05);接受冻融卵巢原位移植的受体鼠可以实现自然产仔,但两冷冻液冻融移植组首窝产仔时间、平均每窝产仔数、产仔总数均较新鲜移植组差异有统计学意义(P<0.05)。结论 改良的EG5.5/30液冻存幼鼠卵巢复苏后异体原位移植同ED20液效果相似,受体鼠可诞生正常子代,但是生殖储备和生育力明显下降。     

卵巢移植对去势大鼠海马神经元数量和ER-β、NG表达的影响

目的:观察去势大鼠卵巢移植后海马神经元数量变化及雌激素受体β(ER-β)和神经颗粒素(NG)表达的变化,评价卵巢移植对中枢神经的保护作用。方法:成年雌性SD大鼠行双侧卵巢切除术(OVX)后,在肾被膜下移植出生3日内乳鼠的卵巢,于干预后的4、7、14、21 d和28 d,通过Nissl染色计数海马神经元的数量,采用免疫组化法观察海马神经元ER-β和NG蛋白的表达情况,并与OVX组和正常对照组比较。结果:与OVX组相比,卵巢移植组随移植时间的延长,海马神经元的数量逐步恢复;ER-β和NG蛋白的表达在海马各区均有所升高(P<0.05)。结论:卵巢移植可以防止海马神经元数量的减少,并促进ER-β和NG表达,发挥雌激素对中枢神经系统的保护作用。     

促卵泡刺激素干预改善绵羊卵巢组织玻璃化冻存后异种移植的效果研究

背景:卵巢皮质片移植是无血管吻合移植,因此,提高卵巢组织对冻存-解冻和移植后缺血的耐受力是提高冻存后移植物卵泡存活和延长功能寿命的关键环节.目的:观察促卵泡刺激素在玻璃化冻存过程中对绵羊卵巢组织形态和功能的保存效果,为成人卵巢组织的冻存提供技术方法.方法:BALB/c品系雌性裸鼠随机分为3组.均行羊卵巢皮质片裸鼠异位移植:①新鲜移植对照组,取材后即移植.②玻璃化冻存移植组,采用玻璃化冻存解冻后移植,所用液体均未添加促卵泡刺激素.③添加促卵泡刺激素的玻璃化冻存移植组,采用冷冻液、解冻液和培养液均添加促卵泡刺激素的玻璃化冻存后移植.移植后检测受体鼠动情周期恢复率、恢复时间、卵泡数和发育状况,于移植后4周取移植卵巢进行组织学观察、并行血清雌二醇水平分析.结果与结论:含促卵泡刺激素的玻璃化冻存移植组与新鲜移植组相比动情周期恢复率、每高倍视野卵泡计数差异均无显著性意义(P>0.05),卵泡计数高于未添加促卵泡刺激素的玻璃化冻存移植组(P<0.05);动情周期恢复需要的天数接近于新鲜移植组,明显短于未添加促卵泡刺激素的玻璃化冻存移植组(P<0.05).移植后4周,含促卵泡刺激素的玻璃化冻存移植组组织学观察见卵泡发育,未添加促卵泡刺激素的玻璃化冻存移植组仅偶见原始卵泡.含促卵泡刺激素的玻璃化冻存移植组与新鲜移植组相比血清雌二醇水平差异无显著性意义(P>0.05),显著高于未添加促卵泡刺激素的玻璃化冻存移植组(P< 0.05).结果提示,在玻璃化液中加入促卵泡刺激素可提高冻存绵羊卵巢组织移植后卵泡存活率.     

临床前基础医学综合实验课程的建设与思考

传统的以学科为中心的教学模式存在课程间横向联系松散,基础知识体系缺乏相互融合,不利于医学生临床疾病诊治技能的学习。建设一门适应五年制高等医学教育对实用型医学人才培养的基础医学综合实验课程是本研究目的。文章对五年制高等医学院校建设临床前基础医学综合实验课程的必要性和实施效果进行了分析和总结。     

组织胚胎学课程体系建设的实践与探索

结合本科和院校评估工作对组织学与胚胎学课程体系建设进行了一些改革,在教学思想、教学管理、教学改革、多媒体教学手段、病案讨论以及开展学生第二课堂,推行素质教育以及新时期学科教学改革的目标、学生创新素质的培养以及如何对教学效果进行综合评价等方面进行了一些创新性探索。     

β-巯基乙醇对培养胎儿卵巢组织异种移植效果的研究

目的探讨β-巯基乙醇(β-ME)对体外培养的卵巢组织的保护作用,寻找提高胎儿卵巢组织异种移植存活率的有效方法。方法取中晚期引产的死亡女胎,分别进行新鲜移植(对照组)或将卵巢组织在不含β-ME(培养对照组,β-ME0)、含100μMβ-ME(培养组,β-ME100)的培养液中新鲜培养3d后移植到裸鼠体内,从动情周期的恢复情况、组织学变化等方面比较各组移植物的活力。结果(1)β-ME0、β-ME100及对照组裸鼠动情周期的恢复率分别是62.5%、87.5%和33.3%,β-ME100组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。β-ME0、β-ME100组和对照组移植后动情周期开始天数为(25.20±4.49)d、(23.5±5.79)d和(12.75±1.5)d,两培养组均明显长于对照组(P<0.05);(2)异种移植后的组织学观察可见到存活移植物内有不同发育阶段的卵泡;卵泡计数β-ME100组(16.4±3.7815个/高倍视野)与对照组(4.0±2.8000个/高倍视野)比较差异有统计学意义,P<0.05。结论胎儿卵巢组织异种移植后卵泡可继续发育,经培养可提高移植物的活力,β-ME有利于提高移植物的存活率,促进卵泡的发育。     

骨科高压氧治疗160例临床护理

近年来，我们对32例肝硬化脾功能亢进患者行部分脾动脉栓塞治疗，经精心观察与护理，效果满意。现报告如下。1资料与方法1．1临床资料本组32例，男17例，女15例；32～76岁，平均52岁，45岁以下5例，45—55岁20例，55—76岁7例。均经CT／MRI／B超确诊为肝硬化、脾大。肝硬化病史5年以下3例，5～10年18例，10年以上11例；乙肝后肝硬化24例，丙肝后肝硬化5例，     

自我暗示法在护士自我减压中的应用

2007年1月～2008年3月,我们通过积极的自我暗示法来帮助护士自我减压,帮助其调整心态.经临床实践后,效果满意.     

乙二醇、丙二醇对胎儿卵巢冻存效果的影响

目的比较1.5mol/L的乙二醇和丙二醇两种低温保护剂对胎儿卵巢组织的保存效果。方法采用“一步降温法”对24～28周水囊引产的胎儿卵巢进行冻存,将解冻后的胎儿卵巢组织移植于去势裸鼠的双肾被膜下,分别于移植后2、4及8周取材,通过电镜观察及移植后的组织学、受体鼠血清雌激素水平测定和阴道脱落细胞涂片判断组织细胞活性。结果乙二醇对卵泡形态结构的保存优于丙二醇,后者在卵巢的部分区域可见不可逆性的冷冻损伤;乙二醇组动情周期恢复率为33.3%,移植后动情周期开始天数为(15.00±5.0)d,而丙二醇组动情周期恢复率为16.7%,移植后动情周期开始天数(23.50±6.26)d。移植2周后乙二醇组与丙二醇组的移植物存活率分别为83.3%、66.7%,两组受体鼠血清雌激素水平之间的差异具有统计学意义(P<0.05),异种移植8周后两组移植物的存活率分别为58.3%、33.3%。结论以1.5mol/L的乙二醇作低温保护剂行快速冷冻效果优于1.5mol/L的丙二醇。     

快速深低温冻存对新生大鼠卵巢组织免疫原性的影响

目的:探讨快速冻存法冻存新生大鼠卵巢器官的效果,以及冻存对卵巢抗原性的影响。方法:采用快速冻存法冻存出生1 d的鼠(新生鼠)卵巢组织,移植入同系去卵巢成年雌性大鼠的肾被膜下,利用免疫组织化学方法及Western blot检测观察移植物内CD8 和CD4 T淋巴细胞的浸润情况。结果:新生鼠卵巢组织移植后动情周期恢复率(66.67%)低于新鲜移植组(90.51%),但无显著性差异。各移植物内毛细血管丰富;有正常发育阶段的各级卵泡、间质腺及闭锁卵泡;CD8 和CD4 阳性细胞计数值及其蛋白表达明显低于新鲜移植组。结论:快速冻存法可有效地冻存新生鼠的卵巢;冻存降低新生鼠卵巢组织抗原性。