UF-100尿流式细胞仪应用于脑脊液细胞计数

目的 建立流式细胞仪计数脑脊液标本细胞的快速、准确、直观的检测方法并验证该方法的可行性.方法 无菌条件下采集患者脑脊液标本,使用UF-100流式细胞仪分别对117例脑脊液标本中红细胞与白细胞数计数,并与采用镜检法检测相同脑脊液标本所得的结果用统计学方法进行比较.结果 流式细胞仪法与镜检法计数脑脊液中的血细胞结果差异无显著性.结论 流式细胞仪计数脑脊液中的血细胞快速、结果准确且重复性好,适合临床常规检测脑脊液标本.     

氧化苦参碱对小鼠急性免疫性肝损伤的干预效果研究

目的观察氧化苦参碱对ConA诱导的小鼠急性免疫性肝损伤的干预效果。方法将Balb/c小鼠100只随机分为4组:正常对照组(A组)尾静脉注射生理盐水0.3ml,氧化苦参碱对照组(B组)腹腔注射氧化苦参碱注射液60mg/kg,1次/天,连续2天。肝损伤组(C组)尾静脉注射ConA 12.5mg/kg,氧化苦参碱干预组(D组)在制作肝损伤模型的同时,给予氧化苦参碱注射液,方法和计量同B组。于造模8小时、24小时和72小时观察肝的组织学;IL-1、TGF-β1免疫组化变化;检测血清ALT、AST值,并对结果进行分析。结果①C组肝脏组织结构破坏严重,D组各时间段的肝组织结构损伤程度均轻于C组;②IL-1、TGF-β1免疫阳性细胞表达D组高于C组。③血清ALT、AST值C组和D组均高于A组和B组,P(0.01,尤其是8小时时,D组高于C组。但24小时和72小时各项指标趋于下降。结论氧化苦参碱具有抗急性免疫性肝损伤的功能,但早期使用可能会产生一过性肝功能损伤。     

VF超促周期妇女血清及卵泡液中血管

目的检测血管内皮生长因子(VEGF)在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)超促排卵周期中不孕妇女血清及卵泡液中的水平。方法收集IVF治疗的187个因输卵管因素年龄24～38岁的不孕妇女在促性腺激素(Gn)注射日、人绒毛膜促性腺激素(HCG)注射日的血清和卵泡液,用酶联免疫方法测定VEGF在血清和卵泡液中的水平。结果 HCG日血清VEGF的水平明显高于Gn启动日(135.36±1.87)ng/L与(70.34±1.33)ng/L(P<0.01);随着年龄的增长卵泡液VEGF的水平呈上升趋势(r=0.493,P<0.01)两者呈正相关;获卵数≥20个患者单个卵泡中VEGF的水平低于获卵数≤5个的患者(1299.63±43.70)ng/L与(2460.23±548.45)ng/L,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论随着促排卵过程中卵泡的发育,血清中VEGF的水平明显增多;随着年龄的增加VEGF在卵泡液中的水平明显升高。     

枸杞多糖对精原干细胞体外增殖的影响

背景：精原干细胞移植对不育具有潜在的临床应用价值,体外建立精原干细胞的培养系统获得数量较多的精原干细胞,仍是目前研究中亟待解决的问题。 目的：观察枸杞多糖对精原干细胞体外增殖的影响。 方法：采用两步酶消化法获取出生4~6 d雄性C57BL/6小鼠睾丸Sertoli细胞与精原干细胞,将精原干细胞接种在Sertoli细胞饲养层上,再加入枸杞多糖或联合细胞因子添加到细胞培养液中。1周后以流式细胞仪检测细胞周期及细胞活性率,并检测各组精原干细胞GFRa-1、Thy-1、c-kit的阳性率。 结果与结论：单独加入枸杞多糖后精原干细胞数量明显增加,增殖明显,联合加入胶质细胞源性神经营养因子与白血病抑制因子精原干细胞增殖更加明显(P < 0.05)。并发现体外培养1周后的精原干细胞仍保持其睾丸组织内的精原干细胞特征,大多仍维持在未分化状态。表明在枸杞多糖或枸杞多糖联合胶质细胞源性神经营养因子及白血病抑制因子作用下,可促进精原干细胞体外增殖。     

体外受精-胚胎移植91个周期妊娠结局分析

目的 对体外受精-胚胎移植（IVF-ET）91周期妊娠率影响因素进行分析。方法 对本中心2003年9月至2005年10月进行体外受精／卵胞浆内单精于注射-胚胎移植（IVF／ICSI-ET）的91个周期的资料进行整理,用方差分析和χ^2检验进行统计学处理。结果 ①不孕病因之间及不孕时间的长短对妊娠率无显著性影响;②35岁以下组的成熟卵数、受精卵数、卵裂数、优质胚胎数也多于35岁以上组,组间差异显著;获卵数和移植胚胎数均多于35岁以上组,组间差异非常显著;大于35岁年龄段的妊娠率较低,但无统计学意义;③妊娠与未妊娠组患者的受精卵数、优质胚胎数有显著性差异,而平均年龄、获卵数、成熟卵数、卵裂数和内膜厚度无显著性差异;④IVF＋ICSI受精周期的ICSI受精率、卵裂率和优质胚胎率均明显优于IVF,存在非常显著性差异;IVF＋ICSI周期的临床妊娠率57．1％。结论 年龄是影响获卵数、成熟卵数、受精卵数、卵裂数以及优质胚胎数的最主要因素;卵子质量是影响周期妊娠率的关键因素;IVF＋ICSI受精是预防和应对IVF受精不良或不受精、提高妊娠率行之有效的方法。     

胶原盘状结构域受体2基因缺失对小鼠卵巢功能的影响

目的利用胶原盘状结构域受体2(Discoidin domain receptor 2,DDR2)基因缺失小鼠,研究DDR2缺失对卵巢功能的影响,探索DDR2缺失小鼠不孕的原因。方法①阴道脱落细胞涂片结合改良巴氏染色法检测DDR2基因缺失纯合子(SLIE)与野生型(WT)小鼠动情周期的差异。②PMSG+HCG促排卵后在体式显微镜下计数排卵数量差异,HE染色法观察SLIE小鼠与WT小鼠促排卵后卵巢与子宫形态及结构的差异。结果①成年SLIE小鼠缺乏明显的动情期,绝大多数处于动情间期,缺乏规律的动情周期。②促排卵实验发现,SLIE小鼠促排卵数量显著减少;③排卵后黄体生成早期,SLIE小鼠子宫壁薄,体积小;卵巢切片中没有黄体生成;子宫切片HE染色显示子宫内膜薄,腺体及间质增生不明显,未见分泌粘液,未能进入分泌期。结论DDR2缺失导致卵巢对促性腺激素的反应能力降低,促排卵后黄体生成障碍。     

肿瘤生育与女性癌症患者的生育力保存

随着年轻癌症幸存者人数的不断增加,生育力保存问题显得更为重要。针对这种现状,一个新兴的医疗领域——肿瘤生育正在兴起。本文就女性放化疗中生育力保护的建议路径、常用的生育力保护技术及其效果进行综述。     

早期嗅觉剥夺对SD鼠发育的影响

目的:为了揭示嗅觉发生及其对发育的影响,进行了早期嗅觉剥夺对SD鼠发育影响的研究.方法: 本实验以出生3.5d SD乳鼠应用三氯甲烷滴注法定量定点破坏嗅黏膜,采用神经行为学方法评估其与正常对照组SD鼠的行为学差异,并进一步结合形态学研究揭示嗅脑发育及嗅觉发生的变化.结果: 3.5d乳鼠的早期嗅觉剥夺使乳鼠发育明显迟缓,不能趋利避害;嗅小球消失.结论: 嗅觉及嗅脑对个体整体发育具有重要的调节作用,早期嗅觉剥夺能够使嗅脑结构发生变化,改变嗅脑脑区神经元的突触连接方式.     

传统及改良冻存法对人胎肝细胞保护效果的比较

目的:比较传统及改良冻存法对人胎肝细胞保护效果,建立一种适合于人胎肝细胞冷冻保存的方法。方法:实验于2006-07/11在广州医学院进行。①人胎肝组织取自中期终止妊娠胎儿(20周,经胎儿亲属知情同意及医院伦理委员会批准)。冷冻保护液包括A液(DMEM培养液含1.5mol/L乙二醇 体积分数为0.2胎牛血清);B液(A液 0.1mol/L蔗糖)两部分。②传统冻存法:用0.025%Ⅰ型胶原酶消化胎肝组织,分离、收集消化后的胎肝细胞。胎肝细胞在A液、B液中分别渗透平衡20min后,在冷冻保护B液中经液氮蒸汽冷平衡5min后迅速入液氮冻存,1周后复苏培养观察。③改良冻存法:胎肝组织在A液、B液中分别渗透平衡20min后,在冷冻保护液B液中经液氮蒸汽冷平衡5min后迅速入液氮冻存,1周后复苏,入DMEM培养液37℃孵育1h,胶原酶消化胎肝组织,分离、收集消化后的胎肝细胞培养观察。④新鲜分离的胎肝细胞做为对照组。⑤复苏后分离所得胎肝细胞用锥虫兰染色评估细胞活率,并记录贴壁时间,观察集落生长情况。结果:①锥虫兰染色结果显示传统冻存法复温后的胎肝细胞活率为(73.8±2.2)%,明显低于新鲜分离的胎肝细胞活率(89.2±3.6)%及改良冻存法所得胎肝细胞活率(82.5±4.2)%(P<0.01)。②贴壁情况观察发现新鲜胎肝细胞与改良冻存法胎肝细胞于培养24h开始贴壁,而传统冻存法胎肝细胞贴壁时间滞后48h。③新鲜胎肝细胞及改良冻存法胎肝细胞于第3天出现生长集落(细胞数>10为一个集落),传统冻存法胎肝细胞在第5天出现生长集落,集落的数量低于改良冻存法及对照组(P<0.01)。结论:改良冻存法可避免冻存前损伤,提高细胞对冷冻的耐受性和冻存复温后细胞的活率。     

FSH干预对小鼠玻璃化冻融移植卵巢血流重建的影响

目的观察小鼠卵巢玻璃化冻融中卵泡刺激素（FSH）干预对移植48h卵巢血流重建的影响及相关机制。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢分为新鲜对照组（FCG）、玻璃化冻存对照组（VCG）,0.3IU·mL-1FSH干预玻璃化冻存组（FSH-VG）,采用卵巢异体肾被膜下移植技术,于移植48h通过卵巢形态学观察、荧光血管灌注、EdU检测细胞增殖情况、免疫组织化学及western-blot方法观察并分析血流重建的影响因素。结果小鼠玻璃化冻融卵巢移植48h,与VCG比较,FSH-VG血流灌注较广,且达到卵巢近中央部;FSH-VG组正常卵泡百分比明显高于VCG组（P〈0.01）,VCG组闭锁卵泡百分比明显高于FSH-VG组（P〈0.01）,增殖细胞主要为卵巢间质细胞。FSH-VG组CD34、PCNA蛋白表达高于VCG（P〈0.01）。结论玻璃化冻融过程中的FSH干预可加速小鼠卵巢冻融后移植的血流重建,CD34及PCNA表达上调。