HL60-pNL3.2报告基因热原检查法测定疫苗热原的适用性研究

目的 探讨HL60-pNL3.2报告基因热原检查法在水痘减毒活疫苗、流感病毒裂解疫苗、冻干甲型肝炎减毒活疫苗热原测定中的应用。方法 参照中国药典《体外热原检查法（报告基因法）》公示稿,计算3种疫苗最大有效稀释倍数（MVD）,干扰实验探讨3种疫苗对该方法测定热原是否存在干扰。参照中国药典2020年版通则9101对该方法测定3种疫苗热原进行方法学验证,用经验证的方法测定3种疫苗热原含量。结果 水痘减毒活疫苗、流感病毒裂解疫苗、冻干甲型肝炎减毒活疫苗MVD分别为1000、200和1000倍。在MVD范围内,内毒素（LPS）在3种疫苗中的回收率在52.5%~110.1%之间。方法学验证结果显示该方法用于3种疫苗热原测定,LPS浓度与其化学光强度（RLU值）相关系数（R2）均大于0.98;LPS 浓度在 1~250EU.mL-1范围内,回收率结果在 76.4%~192.8%之间。LPS浓度高于5 EU.mL-1时,重复性(cv%)均小于25%;该方法用于3种疫苗热原测定的检测限和定量限在0.05~0.13EU.mL-1之间。用建立的HL60-pNL3.2报告基因热原检查法测定3种疫苗热原含量,均低于内毒素限值。结论 该方法具有不使用动物、操作简单、快速、检测热原谱广,可对热原进行定量的优点,可用于水痘减毒活疫苗、流感病毒裂解疫苗和冻干甲型肝炎减毒活疫苗热原测定。     

针刺联合患侧面部闪罐治疗中风恢复期面瘫60例

目的：观察针刺联合患侧面部闪罐治疗中风恢复期面瘫的临床疗效。方法：选择上海市浦东新区浦南医院2021年1月至2022年9月治疗的中风恢复期面瘫患者60例,随机分为对照组和观察组,每组30例。两组患者均给予西医常规治疗,对照组另给予针刺疗法治疗,观察组在对照组治疗的基础上给予患侧面部闪罐治疗。观察两组治疗前后面部麻痹症状评分、患侧表面肌电图数值、面部神经功能评分、社会生活功能评分及临床疗效。结果：与治疗前比较,两组面部麻痹症状评分均显著下降,且观察组面部麻痹症状评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,两组表面肌电图数值均显著升高,且观察组表面肌电图数值高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,两组面神经功能评分均显著升高,且观察组面神经功能评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,两组社会生活功能评分均显著下降,且观察组社会生活功能评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组有效率为86.67%,对照组有效率为63.33%,观察组有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结...     

单宁酸及其纳米颗粒的药理作用研究进展

单宁酸（tannic acid）存在于五倍子等中药中,是一种简单的水解鞣质类化合物,是许多传统鞣质类药物的关键成分,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等药理作用,已获得美国食品药品监督管理局的安全认证,并被广泛应用于食品添加剂领域。经纳米化处理后,单宁酸的生物利用度和药效得以显著提高,从而赋予其更大的治疗潜力。在神经保护、抗氧化、抗炎、抗肿瘤等领域,单宁酸及其纳米颗粒表现出广泛的应用前景。通过综述单宁酸及其纳米颗粒在药理研究方面的最新进展,为进一步探讨其在促进人体健康方面的应用提供新思路。     

基于机器学习算法筛选胰腺癌诊断标志物及药物敏感性分析

目的 通过生物信息学方法和机器学习算法挖掘基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus, GEO)中胰腺癌的关键表达基因,探究胰腺癌的诊断标志物。方法 以GEO数据库获得的芯片数据集GSE15471、GSE16515作为训练组,GSE28735作为验证组,用于筛选出差异表达基因(Differentially Expressed Genes, DEGs)。利用套索算法(Least absolute shrinkage and selection operator, Lasso)与支持向量机的递归特征消除算法(Support Vector Machines with Recursive Feature Elimination, SVM-RFE)从DEGs中筛选出胰腺癌的关键表达基因,并在验证组中进行验证。采用受试者工作特征(Receiver Operating Characteristic, ROC)曲线的曲线下面积(Area Under Curve, AUC)评价关键表达基因的诊断效能。使用Kaplan-Meier生存曲线对关键表达基因进行预后生存分析。通过Cell...     

复方丹参片通过调控TGF-β1/Smad 通路及基质金属蛋白酶水平对肾纤维化大鼠的作用机制研究

目的基于TGF-β1/Smad 通路和基质金属蛋白酶水平探讨复方丹参片对肾纤维化大鼠的保护作用及相关机制。方法采用灌胃腺嘌呤（250 mg·kg-1）的方式制备肾纤维化大鼠模型。将大鼠随机分为正常组、模型组、氯沙坦组（0.09 g·kg-1）及复方丹参低（0.3 g·kg-1）、高（0.6 g·kg-1）剂量组。各组大鼠给予相应剂量灌胃给药,每日1 次,连续干预4 周。检测大鼠血清Cr、BUN 水平;采用HE 及Masson 染色法观察肾脏组织病理形态及纤维化程度;采用免疫组织化学法检测肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7 蛋白表达水平;采用Western Blot 法检测肾脏组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1 蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠血清Cr、BUN 水平明显升高（P＜0.05）;肾脏出现明显纤维化病变;肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、TIMP-1 蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）,Smad7、MMP-2、MMP-9 蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）。与模型组比较,低、高剂量复方丹参片均能明显降低大鼠血清Cr、BUN 水平（P＜0.05）;明显改善肾脏纤维化病变;降低肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、TIMP-1 蛋白表达水平（P＜0.05）,升高Smad7、MMP-2、MMP-9 蛋白表达水平（P＜0.05）。结论复方丹参片可能通过抑制TGF-β1/Smad 通路及提高基质金属蛋白酶水平来实现对肾纤维化大鼠的保护作用。     

荷叶黑茶提取物对内生湿热证患者肠道菌群及临床症候的影响

目的 研究荷叶黑茶提取物对内生湿热证患者肠道菌群、临床症状及糖脂代谢等相关指标的影响。方法 采用自身前后对照的方法,选取2022年4—7月江苏省第二中医院门诊内生湿热证患者23例,服用荷叶黑茶提取物(6 g/d),治疗1个月后评估其临床疗效和不良反应,并通过Illumina MiSeq平台对患者治疗前后的肠道菌群进行16S rDNA基因V3～V4可变区检测,运用QIIME、STAMP及LEfSe进行Alpha、Beta多样性分析,鉴定差异性菌属。结果 内生湿热症候经治疗显著改善(有效率>60%);体质量指数(BMI)、体脂率、腰臀脂肪比、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗(IR)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白(LDL-C)均较治疗前下降,差异有统计学意义(P<0.05);2例(8.70%)患者在服药期间有失眠症状;与治疗前相比,治疗后蓝藻菌门(Cyanobacteria)的相对丰度上升,拟杆菌门(Bacteroidetes)的相对丰度下降,差异有统计学意义(P<0.05);属分类水平上,罗斯氏菌属(Roseburia)、克雷伯氏...     

3种钝化剂施用下川芎主要部位生长和镉积累情况初探

目的:探索3种钝化剂对川芎生长和主要成分含量的影响及对川芎的降镉效果。方法:选取均匀地块,在川芎栽种前按照田间设计图向不同小区的土壤中施入不同浓度(高、中、低)的3种钝化剂(A、B、C),测定川芎生长指标、产量、根茎和叶片中镉及主要成分的含量。结果:3种钝化剂对川芎的株高、分蘖数和地上鲜质量等生长指标均有一定的促进作用;中、低浓度A钝化剂能极显著提高川芎的产量;A、B 2种钝化剂对川芎根茎和叶片均有一定的降镉作用;3种钝化剂对川芎的3种主要成分(阿魏酸、洋川芎内酯A、藁本内酯)含量影响差异无统计学意义。结论:A、B 2种钝化剂可以有效提高川芎的产量并降低川芎根茎和叶片中重金属镉含量。     

七氟醚对风湿性心脏病患者瓣膜置换术后认知功能的影响及作用机制

目的探讨七氟醚对风湿性心脏病患者心内直视瓣膜置换术后认知功能的影响及作用机制。方法选取中国人民解放军联勤保障部队第988医院2017年7月至2019年1月手术治疗的风湿性心脏病患者108例,根据麻醉方案不同分为两组(S组56例、P组52例)。P组给予丙泊酚全程靶控输注,S组给予七氟醚全程吸入麻醉。观察并比较两组患者术前1 d、术后3 d的认知功能(MMSE评分)及两组不同时间点[术前(T_1)、体外循环前(T_2)、体外循环后(T_3)、术毕(T_4)]血流动力学指标[平均动脉压(MAP)、中心静脉压(CVP)、心率(HR)]及不同时间点[麻醉诱导前(t_1)及主动脉开放2 h(t_2)、6 h(t_3)、12 h(t_4)、24 h(t_5)]心肌酶谱指标[心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、丙二醛(MDA)、肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)、超氧化物歧化酶(SOD)]和术后导管拔除时间、心脏自主复跳情况、心肌收缩力情况。结果两组术前MMSE评分差异无统计学意义; S组手术前后MMSE评分差值低于P组,差异有统计学意义(P <0. 05);两组患者T_1、T_2、T_3、T_4时间点MAP、HR、CVP比较,差异均无统计学意义(P> 0. 05); S组t_2、t_3、t_4、t_5时间点cTnⅠ水平低于P组,t_3、t_4、t_5时间点CK-MB水平低于P组,t_2、t_3、t_4时间点SOD水平高于P组,MDA水平低于P组,差异均有统计学意义(P <0. 05); S组导管拔除时间短于P组,心脏自主复跳率高于P组,心肌收缩力评分低于P组,差异均无统计学意义(P>0. 05)。结论七氟醚全程吸入麻醉有助于改善风湿性心脏病患者认知功能,其作用可能与抑制cTnⅠ、CK-MB、MDA水平及升高SOD水平有关。     

HL60-IL6法在注射用胶原酶和尿激酶热原检测中的应用研究

目的探讨HL60-IL6单核细胞活化反应法在注射用胶原酶和尿激酶热原检测中的应用。方法参照中国药典2015年版通则1193,确定注射用胶原酶和尿激酶最小有效稀释浓度。通过细胞增殖抑制试验、热原干扰试验和白介素-6(interleukin-6,IL-6)干扰试验探讨对HL60细胞生长,对热原和IL-6测定无影响的供试品浓度,进而确定适用于注射用胶原酶和尿激酶体外热原测定的HL60-IL6方法。用该方法对2批注射用胶原酶、19批注射用尿激酶供试品进行热原测定。结果注射用胶原酶最小有效稀释浓度为0.04U·mL^-1,当浓度≤60U·mL^-1时对HL60细胞生长无影响,浓度≤6 U·mL^-1时对IL-6和热原测定无影响。注射用尿激酶最小有效稀释浓度为100 U·mL^-1,当浓度≤1 000 U·mL^-1时对HL60细胞生长无影响,浓度≤500U·mL^-1时对IL-6和热原测定无影响。因此,适合HL60-IL6单核细胞活化反应法的注射用胶原酶和尿激酶浓度分别为6,500U·mL^-1。用该方法对供试品进行热原测定,结果均未检出热原。结论 HL60-IL6方法适用于注射用胶原酶和尿激酶热原测定。     

甲基化修饰抑癌基因MSX1抑制黑色素瘤细胞迁移和侵袭的研究

目的 探讨MSX1在黑色素瘤细胞系和组织中表达和甲基化及对黑色素瘤细胞A375迁移/侵袭的影响和机制。方法 qRT-PCR和免疫组织化学法分别检测MSX1在黑色素瘤细胞系和组织中的表达;甲基化PCR分析MSX1在黑色素瘤组织中甲基化;分别转染pcDNA3.1(+)-Flag-MSX1质粒(实验组)和pcDNA3.1(+)-Flag-Vector质粒(对照组)至A375细胞;Transwell迁移和侵袭实验检测MSX1对细胞迁移和侵袭的影响;RT-PCR验证MSX1对上皮间质转化及下游相关标志物的影响,免疫蛋白印迹实验验证MSX1对WNT/β-catenin信号通路的影响。结果 与色素痣组织和细胞相比,MSX1 mRNA和蛋白在黑色素瘤细胞和组织中表达下调(P＜0.001);MSX1甲基化水平表达上调,其甲基化程度明显高于癌旁组织和正常色素痣组织。过表达MSX1后抑制细胞迁移和侵袭(P＜0.001),而上皮间质转化及下游相关标志物表达受到抑制。过表达MSX1能抑制WNT/β-catenin信号通路及其下游细胞因子的表达。结论 MSX1在黑色素瘤组织中表达下调,能抑制Wnt/β-catenin信号通路参与黑色素瘤的进展。