HIV-HCV合并感染者血清HCV RNA的定量检测

人类免疫缺陷病毒(HIV)与丙型肝炎病毒(HCV)传播途径相同，二者可以合并感染。据报道，在美国和欧洲有约30％的HIV感染者合并有HCV感染，而在吸毒人群中HIV—HCV的合并感染率高达60％～90％。国外研究显示，HIV感染会对HCV的病程造成影响，加快肝硬化的进程提前进入肝功能衰竭；而HCV又会加速HIV引起的CD4细胞破坏，促进HIV复制，使HIV进展到艾滋病(AIDS)相关疾病及死亡的时间缩短。目前，国内对HIV—HCV合并感染的研究报道较少。为了探索国人HIV—HCV合并感染对两种疾病的相互影响，     

人血清白蛋白微小基因的构建

人血清白蛋白（Alb）是人血浆中的主要蛋白质成分，由肝脏合成后分泌到血液中，具有运输脂类物质、维持血浆渗透压和增强机体免疫力等多种生物功能。临床上广泛应用，几乎全部来源于人血，由于血源受限及血液中可能存在肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒等各类病原的污染，限制了Alb的临床应用。用基因工程技术生产重组人血清白蛋白是有发展前景的。因此构建人血清白蛋白的微小基因，为利用乳腺生物反应器生产A1b打下基础。     

丙型、乙型肝炎双重感染与单纯丙型、乙型肝炎的临床特点(附90例配对分析)

为了探讨丙型肝炎病毒(HCV)、乙型肝炎病毒(HBV)双重感染的临床特点,实验室指标的变化规律及转归,本文收集了我院1989年12月～1991年12月经血清病原学诊断的丙型、乙型肝炎双重感染(双重感染组)     

TLMV5′非编码区基因的克隆与序列分析

目的　调查TTV阴性的非甲～庚型肝炎患者中TTV -likeminivirus(TLMV)感染情况 ,对TLMV5′非编码区 (5′NCR)部分基因进行分子克隆与序列分析。方法　采用巢式PCR技术检测5 3例TTV阴性的非甲～庚肝炎患者血清TLMVDNA ,对PCR产物进行克隆、测序和分析。结果　 5 3例病例中TLMVDNA阳性 37例 (6 9 8% ) ,对其中 8株TLMV基因克隆测序 ,并与Takahashi报道的TLMV序列 (GenBankAccessionNo ab 0 2 6 930、ab0 2 6 931)比较 ,其核苷酸序列同源性在 6 4%～ 83%之间。结论　在TTV阴性的非甲～庚肝炎患者中存在TLMV感染。TLMV5′NCR基因变异性较大。TLMV的致病性及其与非甲～庚肝炎的关系尚有待进一步研究     

艾滋病患者外周血T细胞亚群CD28、HLA-DR分子的表达及其临床意义

人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)感染致使机体免疫功能缺陷和免疫细胞异常激活。为了了解艾滋病进展中不同T细胞亚群上CD28和HLA-DR分子的表达特征以帮助判断艾滋病(AIDS)的病情进展．我们观察了43例艾滋病患者外周血,此二分子在CD4^ 、CD8^ T细胞上的表达情况,现报道如下：     

CD4+CD25+调节性T细胞对肺结核患者特异细胞免疫的调节作用

目的　探讨调节性T细胞对结核患者特异性细胞免疫的调节作用及其在结核病发生中的意义。方法 采用免疫磁珠从健康对照和结核患者外周血单个核细胞中分离CD4⁺CD25⁺调节性T细胞,观察其对结核患者外周血免疫反应,包括细胞增殖反应和细胞因子IFN-γ及IL-10分泌的影响。结果 体外消除CD4⁺CD25⁺调节性T细胞没有显著影响健康对照PBMC对BCG抗原的增殖反应,但可以显著增强结核患者PBMC对BCG抗原的细胞增殖反应、细胞因子IFN-γ及IL-10的分泌。分离的CD4⁺CD25⁺调节性T细胞能显著抑制结核患者CD4⁺CD25^-T细胞对BCG抗原及抗-CD3的细胞增殖和细胞因子IFN-γ分泌;CD4⁺CD25⁺调节性T细胞也抑制BCG刺激的CD4⁺CD25^-T细胞IL-10的分泌,但不影响抗-CD3刺激的IL-10分泌。结论 CD4⁺CD25⁺调节性T细胞可能通过抑制结核患者特异性细胞免疫应答促进肺结核病的发生发展。     

ECLIA定量检测HBsAg及HBeAg与HBV-DNA相关分析

目的探讨电化学免疫发光法(ECLIA)定量检测HBeAg和HBsAg,并分析与DNA(HBV-DNA)含量之间的相关性,为临床提供诊断治疗依据。方法筛选乙肝病人标本500份,以荧光定量PCR法检测HBV-DNA(以HBV-DNA>500 copies/ml为阳性),按DNA含量不同分9组,同步以ECLIA检测HBeAb、HBeAg、HBsAg。结果HBeAg的含量(IU/ml)与HBV-DNA的含量(copies/ml)成正相关(r=0.99),在HBV-DNA 5×102~1×106copies/ml时,HBV-DNA的阳性率比HBeAg高(P<0.05),在HBV-DNA大于1×106copies/ml时,HBV-DNA的阳性率与HBeAg相比差异无显著性(P>0.05);HBV-DNA在500~1×106copies/ml之间,HBeAb有较高的阳性率,并随着HBV-DNA含量增加而逐渐下降。HBsAg的含量COI(cut off index)与HBV-DNA含量呈负相关(r=-0.94)。结论ECLIA的HBeAg定量检查可指示病人的传染性强弱,但尚不是最可靠的指标;HBeAg阴性、HBeAb阳性不是传染性消失的可靠指标;HBsAg的定量检测意义不大。     

SEN-V非编码区基因的克隆与序列分析

自 1997年Ｎｉｓｈｉｚａｗａ发现输血传播病毒 (ＴＴＶ)后 ,认为与非甲 庚型肝炎有关 ,但随着进一步的研究发现ＴＴＶ与 (ＴＬＭＶ)作为肝炎病因 ,即使存在 ,也非常有限。最近 ,又发现了一种新的与ＴＴＶ相似的小ＤＮＡ病毒ＳＥＮ病毒[1] ,对此研究较多的是ＳＥＮＶ Ｄ和ＳＥＮＶ Ｃ/Ｈ ,它们与输血后非甲 庚型肝炎关系较密切 ,有报道急性输血后非甲 庚型肝炎中的ＳＥＮ Ｖ阳性高达 92 % ,但对其他人群的研究表明不到 6 %的ＳＥＮ Ｖ感染与肝炎有关。关于ＳＥＮ Ｖ的临床意义及其与非甲 庚型肝炎的关系目前尚不清楚。我们根据Ｔａｋｅｊｉ…     

应用荧光定量PCR技术检测HBV DNA低拷贝样品及临床意义分析

目的：观察荧光定量PCR技术对HBVDNA低拷贝样品检测的情况并探讨其临床意义。方法：采用荧光定量PCR和改良PCR法对一系列不同拷贝数的临床标本平行进行检测。结果：在电泳分析时PCR产物的亮度与样品的拷贝数呈正相关，〉10^3copies／ml的样品能经PCR扩增得到明亮的特异产物条带，10^3copies／ml的样品也可得到特异的弱条带，但10^2copies／ml的样品无法检测到特异产物，并有明亮的引物聚合体产生。结论：荧光定量PCR技术的检测准确下限为10^4copies／ml，10^3copies／ml的样品检测时存在很大的随机性，这种条件下的样品并不能用荧光定量PCR的方法进行准确检测，应该采用其他更灵敏的方法。     

慢性乙型肝炎患者血清转化生长因子β1与CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T淋巴细胞的关系

目的 调查慢性乙型肝炎患者转化生长因子β1(TGF β1)与CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T淋巴细胞异常的关系.方法 将实验对象分为慢性乙型肝炎(CHB)患者、无症状HBV携带者(AsC)、乙型肝炎恢复者、正常人对照4组.通过流式细胞术分析外周CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T淋巴细胞的表型和频率以及实时荧光定量PCR分析Foxp3表达水平;并通过酶联免疫吸附法检测血清中TGF β1水平.根据数据不同采用方差分析或秩和检验进行统计学分析.结果 CHB或AsC组外周CD4~+T淋巴细胞中CD4~+CD25~+Foxp3~+T淋巴细胞频率以及CD4~+CD25~+T淋巴细胞中Foxp3 mRNA表达水平显著高于正常人对照组,差异有统计学意义(P<0.05).CHB患者和AsC血清中TGF β1水平显著高于正常人和乙型肝炎恢复者,并与CD4~+CD25~+Foxp3~+T淋巴细胞频率存在显著正相关(r=0.78,P<0.01).结论 CHB和AsC患者TGF β1与CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T淋巴细胞增高有密切关系.