糖尿病黄斑水肿的早期诊断和治疗

糖尿病黄斑水肿是引起糖尿病患者视力下降的主要原因之一,因此其早期诊断尤为重要。OCT、HRT、RTA等的出现,尤其是视网膜厚度、视网膜体积、水肿指数等客观评价黄斑水肿的量化指标,代表了近年视网膜成像技术的新进展。OCT良好的纵向分辨率可早期发现细微的黄斑区视网膜增厚,且技术已相对成熟,应成为黄斑水肿诊断的常规检查。激光光凝或(和)曲安奈德眼内注射以及玻璃体手术是目前治疗顽固性黄斑水肿的重要手段,其早期诊断有利于使治疗局限在局部光凝或眼内注射。     

新生儿颈内静脉穿刺置管术的应用解剖

目的为新生儿颈内静脉穿刺置管术提供解剖学基础.方法对15具30侧新生儿尸体标本的颈内静脉及相关结构进行解剖观测.结果颈内静脉外径左(5.6±1.7)mm,右(6.5±1.0)mm.颈内静脉与头臂静脉夹角左(114±8)°,右(145±9)°,颈总动脉与胸锁乳突肌前缘交点位于胸锁乳突肌前缘的近中点处,其交点平面以下颈内静脉长度为(2.7±0.5)cm,左、右头臂静脉和上腔静脉长度分别为2.4、1.4和1.8cm.结论新生儿颈内静脉下段口径粗大,与颈总动脉伴行毗邻清楚,变异较小.穿刺易在颈总动脉与胸锁乳突肌前缘交点稍外侧进针,插管长度左侧为7.0cm,右侧为6.0cm.     

头孢他啶联合左旋氧氟沙星对铜绿假单胞菌耐药基因突变时间研究

目的 了解头孢他啶联合左旋氧氟沙星对铜绿假单胞菌耐药基因突变时间的变化,为临床经验性治疗和合理使用抗生素提供依据. 方法 铜绿假单胞菌感染小鼠腹腔,采用琼脂稀释法测定单独应用头孢他啶和与左旋氧氟沙星联合使用对铜绿假单胞茵对头胞他啶的最低抑茵浓度(MIC)的变化,以此监测铜绿假单胞菌耐药突变时间,并通过分子生物学技术测定耐药基因产生情况. 结果 单独应用头胞他啶对感染小鼠的铜绿假单胞茵耐药突变时间为120 h,而头孢他啶联合左旋氧氟沙星对铜绿假单胞茵耐头胞他啶突变时间为168 h,比头孢他啶单用延长了48 h. 结论 联合用药可使耐药突变时间延长,有效地减少耐药茵产生.     

A族链球菌感染小鼠巨噬细胞初期大量诱生SOCS-1蛋白的机制研究

摘要:目的　本研究利用A族链球菌（GAS）感染小鼠巨噬细胞,来分析SOCS-1的表达情况,以此探索GAS进行免疫逃逸的可能机制。方法　同时培养RAW264.7巨噬细胞和C57小鼠骨髓巨噬细胞（BMDMs）,以感染复数（MOI）100∶1加入对数生长期GAS及经热灭活处理的GAS（70℃加热处理60 min）刺激RAW264.7及BMDMs巨噬细胞1 h,弃去细菌后,继续培养2,4,6,8,10 h,分别收集细胞,通过RT-PCR及Western blot 方法检测JAK/STAT通路的活化及SOCS-1的表达情况。结果　GAS感染RAW264.7及BMDMs细胞4 h后p-STAT1的水平明显高于热灭活组（P＜0.05）,6 h达到高峰,8 h后开始降低;同时,两组细胞SOCS-1基因的表达,GAS组4 h开始明显升高,6 h达到高峰,8 h开始降低;而热灭活GAS组SOCS-1基因在感染后6 h后开始升高,且升高的幅度明显小于GAS组（P＜0.05）。SOCS-1蛋白在GAS感染后6 h可以检测到,而热灭活GAS刺激细胞10h检测不到SOCS-1的表达。结论　GAS感染小鼠初期通过快速活化JAK/STAT通路引起SOCS-1的表达,以此来逃避机体的免疫攻击。     

pMD18-T作为A组轮状病毒VP7基因克隆载体的研究

目的:利用RT-PCR法从A组轮状病毒扩增基因片段VP7,再将产物重组于大肠杆菌pMD18-T载体,探讨pMD18-T作为A组轮状病毒VP7基因克隆载体的应用。方法:提取A组轮状病毒总RNA,通过RT-PCR扩增,获得目的基因片段VP7,进行分离纯化和回收,最后把纯化的VP7基因与pMD18-T载体进行连接,进行质粒抽提与鉴定。结果:成功将VP7基因连接到pMD18-T载体,转化感受态菌(DH5α),通过蓝白斑筛选得到DNA阳性重组子(载体+VP7基因片段),经DNA测序鉴定正确。结论:成构建功A组轮状病毒外壳蛋白VP7基因克隆载体,为进一步获得大量VP7基因以及研究和开发轮状病毒基因工程疫苗奠定基础。     

学龄前儿童乳牙龋的影响因素

1 临床资料 2003-01/04 采用分层整群抽样方法选择唐山市两所幼儿园2～6岁儿童共计598名. 采用面对面及电话个人访谈相结合的方式,对受检儿童的家长进行问卷式调查.     

冠心病合并糖尿病患者冠状动脉旁路移植术长期预后及危险因素的探讨

目的 探讨糖尿病及其合并症对冠状动脉旁路移植术长期预后的影响。方法 将226例连续行冠状动脉主路移植术的冠心病患者分为糖尿病组（116例）和非糖尿病组（110例），应用多变量分析方法分析两组患者术前及术后的临床特征，并随访术后总死亡率及心脏性死亡的发生率，探讨糖尿病组心脏性死亡的预测因素。结果 两组术前及术后的临床特征、既往心肌梗死病史及冠状动脉病变支数等差异无显著性。结果 两组术前及术后的临床特征、既往心肌梗死病史及冠状动脉病变支数等差异无显著性。平均随访3.5年总死亡率两组差异无显著性，但心脏性死亡的发生率糖尿病组明显高于非糖尿病组（15％与3％，P＜0.01）。糖尿病和术后低左室射血分数与心脏性死亡的发生率密切相关（95％可信区间1.29-15.20)。糖尿病组的心脏性主要是猝死、心力衰竭和心肌梗死。术后低左室射血分数、女性及糖尿病肾病是主要预测因素。结论 冠心病合并糖尿病患者冠状动脉旁路移植术长期预后不良，特别在低左室射血分数、女性及糖尿病肾病患者心脏性死亡的发生率高，预后差。应加强对糖尿病患者冠状动脉旁路移植术后心、肾功能障碍的治疗。     

JSH-23对人舌鳞癌细胞Tca8113增殖和凋亡的影响

目的 探讨JSH-23阻断NF-κB信号通路后人舌鳞癌细胞Tca8113增殖和凋亡的情况及NF-κB信号通路相关凋亡抑制基因Bcl-2的表达变化,进而为临床舌鳞癌的干预和治疗寻找新的药物提供实验依据.方法 采用体外培养人舌癌Tca8113细胞的方法,经不同浓度JSH-23作用不同时间后,用MTT法、RT-PCR及Western blot等方法检测JSH-23对Tca8113细胞增殖、凋亡的影响.采用SPSS13.0统计软件对数据进行方差分析及t检验.结果 Tca8113细胞经JSH-23作用后,增殖受到明显抑制,20 μmol/L JSH-23作用48 h时,抑制作用最为显著,细胞生长抑制率达到60.45％.同时,Bcl-2凋亡抑制基因表达减少,与对照组相比,JSH-23作用48 h后,Bcl-2表达显著减少47.85％,差异有统计学意义（P＜0.05）;Bcl-2蛋白含量也明显减少,作用48 h后,Bcl-2蛋白表达相对光密度值分别下降50.93％ （P ＜0.01）.结论 JSH-23作为NF-κB信号通路抑制剂,可以明显抑制人舌鳞癌细胞的增殖,同时显著下调Bcl-2基因及蛋白的表达.     

A族链球菌感染巨噬细胞激活TLR2及TLR4表达的研究

目的通过分析A族链球菌(GAS)感染巨噬细胞后TLR2及TLR4的活化情况,以此来研究GAS感染后产生炎症反应的信号通路,为GAS感染巨噬细胞的预防及治疗奠定基础。方法 GAS及热灭活GAS以感染复数(MOI)为100∶1感染小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞后1,2,4,6 h,提取总RNA采用real-time PCR技术检测TLR2/4的表达情况;同时GAS及热灭活的GAS注射C57小鼠腹腔,24 h后分离腹腔巨噬细胞并提取蛋白,利用Western blot及免疫荧光技术对TLR2和TLR4的表达量进行分析。结果巨噬细胞表面TLR2及TLR4在GAS感染后1 h活化不明显,但作用2 h后TLR2及TLR4表达明显升高(P<0.05),4 h时达到高峰,6 h后开始降低。热灭活GAS感染巨噬细胞TLR2的表达与GAS感染比较未见到统计学差异(P>0.05),但巨噬细胞表面TLR4的表达与GAS组具有明显的差异(P<0.05)。结论 GAS感染小鼠巨噬细胞可同时激活TLR2及TLR4受体,其中TLR4受体主要通过位于GAS表面及其分泌的活性蛋白成分激活,TLR2受体则主要由其菌体成分进行活化。     

重组乳酸杆菌中A组轮状病毒VP7基因表达

目的扩增A组轮状病毒VP7基因,构建pEDM27/5-VP7重组质粒,转化乳酸杆菌并分析VP7蛋白的表达及活性。方法通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)获得目的基因VP7,纯化后与pEDM27/5载体进行连接,转化乳酸杆菌,乳糖进行诱导表达,分别于4,8,12 h后,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹技术(Western blot)对产物进行分析测定。结果A组轮状病毒经RT-PCR扩增后,1%琼脂糖电泳检测可见一条约1.0 kb的特异性条带,与预期目的基因(VP7基因)大小相符;SDS-PAGE和Western-blot杂交分析发现,经乳糖诱导4,8,12 h后分别可见一条分子量约为28 kD蛋白带表达,经扫描分析,诱导后表达蛋白分别约占菌体总蛋白的2.30%,5.12%,5.38%,且随着时间变化而持续表达增加,并能与抗A组轮状病毒VP7蛋白特异结合。结论重组乳酸杆菌持续表达免疫活性A组轮状病毒VP7蛋白,为进一步研究乳酸杆菌作为轮状病毒基因工程疫苗的表达载体提供了基础依据。