眼睛蛇毒心脏毒素对大鼠心肌细胞收缩及细胞内钙离子的作用

目的 研究眼睛蛇毒心脏毒素（Cardiotoxin,CTX）对心肌细胞的形态、收缩幅度和细胞内钙离子（[Ca^2＋]i）的作用。方法 应用荧光计量法（以Fura-2／AM为荧光染料）及光学成像系统来测定单个心肌细胞[Ca^2＋]i和收缩幅度。结果 0．001～1μmol／L的CTX使心肌细胞由杆状变成圆形,药物的作用从第1分钟时开始,到第20分钟时趋于稳定。在电刺激存在的情况下,1μmol／L的CTX最初导致电诱导的[Ca^2＋]i和收缩幅度瞬间增加,接下来[Ca^2＋]i时程延长,最终细胞对电刺激不敏感、突然收缩、[Ca^2＋]i持续增高。在缺乏电刺激的情况下,1μmol／L的CTX可诱导Ca^2＋震荡波、持续性[Ca^2＋]i增高,这种作用与40mmol／L的KCl和10mmol／L咖啡因所引起的[Ca^2＋]i瞬间增加不同。结论 CTX作用初期使[Ca^2＋]i增高,使细胞[Ca^2＋]。超载,同时伴随细胞形状的改变。     

百草枯人工抗原的合成及抗体的制备

目的: 制备百草枯人工抗原和抗血清, 为建立酶联免疫吸附法提供技术储备.方法: 以4, 4'-联吡啶和碘甲烷为起始原料, 于暗处通氮气保护下合成了百草枯半抗原; 混合酸酐法偶联大分子蛋白载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)制备免疫抗原和包被抗原; 免疫新西兰大白兔, 制备多抗.结果: 合成的半抗原经HPLC-MS、 1HNMR和IR鉴定, 初步确定合成成功; 百草枯半抗原与BSA和OVA的结合比分别为19∶ 1和14∶ 1; 抗血清经间接ELISA法检测, 效价达1∶ 2.56×104, 经饱和硫酸铵沉淀法纯化后抗体的效价达1∶ 5.12×104.结论: 合成的百草枯人工抗原具有较好的免疫原性, 为百草枯酶联免疫检测(ELISA)试剂盒的研制提供了基础.     

醋酸地塞米松复合膜对兔口腔溃疡愈合的影响

为观察醋酸地塞米松复合膜对兔口腔溃疡愈合的影响 ,分别以生理盐水和谷固醇口腔溃疡膜作为空白对照和阳性对照 ,对溃疡创面的充血水肿情况进行了积分比较 ,并记录溃疡的愈合情况。结果显示 ,与空白对照组相比 ,醋酸地塞米松复合膜各组充血水肿明显减轻 ,溃疡面积明显缩小 ,愈合时间明显缩短 ( P<0 .0 1)。     

脑梗死合并感染患者血清ICAM-1含量的研究

细胞间粘附分子在发生脑动脉硬化的过程中起重要作用。近年来许多学者用抗可溶性细胞间粘附分子 (ICAM- 1)抗体治疗缺血性脑梗死动物模型发现可以大大减少脑梗死的面积 ,这些研究提示 ICAM- 1可能在缺血性脑损伤中起重要作用。本研究的目的在于使用双抗体夹心法 (EL ISA )测定急性脑梗死合并感染患者血清 ICAM- 1的变化及其规律并探讨临床意义。1　材料与方法1.1　临床资料　观察组为脑梗死合并感染患者 5 0例 ,男 2 6例 ,女 2 4例 ,平均年龄 6 7.3± 12 .2 4岁。单纯脑梗死组30例 ,均为单纯脑梗死患者 ,男 16例 ,女 14例 ,平均年龄6…     

血管紧张素II对培养乳鼠非心肌细胞DNA及蛋白合成的影响

Ａｎｇ Ⅱ作为一种独立于血液动力学及神经体液因子，对哺乳动物心脏细胞的直接作用尚未完全清楚。本实验中，我们观察了Ａｎｇ Ⅱ对培养心脏的非心肌细胞的作用，结果表明：在培养的非心肌细胞，Ａｎｇ Ⅱ引起蛋白合成、ＤＮＡ合成及细胞数目的明显增加，但不影响细胞的体积。Ａｎｇ Ⅱ在非心肌细胞诱导的ＤＮＡ合成受Ａｎｇ Ⅱ受体拮抗剂［Ｓａｒ＾１，Ｖａｌ＾５，Ａｌａ＾８］－Ａｎｇ Ⅱ完全抑制。这些结果提示：（１）Ａ     

Inhibitory effects of nifedipine on DNA and protein synthesis in cultured cardiac nonmyocytes of neonatal rats

观察硝苯地平（Ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ，Ｎｉｆ）对非心肌细胞生长和增殖的抑制作用．方法：以培养乳鼠非心肌细胞作为模型，用［３Ｈ］胸腺嘧啶核苷结合及［３Ｈ］亮氨酸结合的方法．结果：在血管紧张素Ⅱ存在的情况下，Ｎｉｆ１μｍｏｌ·Ｌ－１作用细胞７２ｈ，细胞的总蛋白及细胞数目明显减少．测得血管紧张素Ⅱ１，１０，１００，１０００ｎｍｏｌ·Ｌ－１在４８ｈ内，增加ＤＮＡ合成及蛋白合成．Ｎｉｆ１－１０μｍｏｌ·Ｌ－１均能够减少１００ｎｍｏｌ·Ｌ－１血管紧张素Ⅱ诱导的细胞ＤＮＡ合成及蛋白合成．结论：Ｎｉｆ可以直接抑制非心肌细胞的生长，该种作用与其抑制心肌肥厚有关．     

前胡丙素对培养心肌细胞~（45）Ca~（2＋）摄入及细胞内游离钙的影响

利用培养的乳鼠心肌细胞测定细胞４５Ｃａ２＋的摄入及细胞内游离钙的浓度。结果表明，前胡丙素（Ｐｒａ－Ｃ）１０－１００μｍｏｌ·Ｌ－１依浓度抑制４５Ｃａ２＿的摄入，并抑制由３０μｍｏｌ·Ｌ－１ＫＣｌ所引起的４５Ｃｓ２＋摄入的增加，同时Ｐｒａ－Ｃ１００μｍｏｌ·Ｌ－１对去甲肾上腺素所诱发的４５Ｃａ２＿摄入的增加也有抑制作用。Ｐｒａ－Ｃ１０μｍｏｌ·Ｌ－１和维拉帕米１０μｍｏｌ·Ｌ－１能抑制细胞外高钾（３０，５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１）引起的［Ｃａ２＋］ｉ的升高，同时Ｐｒａ－Ｃ３０ｍｏｌ·Ｌ－１和维拉帕米１０μｍｏｌ·Ｌ－１对去甲肾上腺素１０μｍｏｌ·Ｌ－１在无钙及含ＣａＣｌ２１．３ｍｍｏｌ·Ｌ－１的溶液中所引起的［Ｃａ２＋］，的增加也有抑制作用。提示前胡丙素对心肌细胞的作用与其阻滞钙通道有关。     

CaMKⅡ信号通路在黄芪多糖抑制异丙肾上腺素诱导心肌细胞肥大中的作用

目的从钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ(Ca2+/calmodulin-de-pendent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)信号通路角度探讨黄芪多糖(astragalus polysaccharides,APS)对异丙肾上腺素(isoprot-erenol,Iso)诱导心肌细胞肥大的保护作用及机制。方法原代培养大鼠乳鼠心肌细胞,应用Iso 10μmol·L-1诱导心肌细胞肥大,观察β受体阻断剂普萘洛尔及不同浓度APS对肥大心肌细胞的影响。用消化分离法及计算机图像分析系统测细胞体积;Bradford法测心肌细胞总蛋白含量;ELISA法检测细胞外液中IL-6和TNF-α的含量;RT-PCR法检测ANP mRNA的表达;Western blot法检测心肌细胞CaMKⅡδ蛋白的表达。结果普萘洛尔(propranolol,PRO)和APS均能有效抑制Iso诱导的心肌细胞肥大,表现为体积减小、总蛋白含量降低及ANP mRNA表达降低,并能有效减少炎症反应,表现为细胞外液中IL-6、TNF-α的含量明显减少,CaMKⅡδ蛋白含量减少,且APS的作用呈一定的剂量依赖性。结论黄芪多糖对Iso诱导的乳鼠心肌细胞肥大具有保护作用,其机制可能与抑制CaMKⅡ信号通路及减少炎症反应有关。