受精前卵细胞卵周腔显微注射法制备转基因动物

在医学实验动物模型、生物反应器、器官移植、禽畜活体内的基因表达调控、禽畜育种及品种改良等科学研究领域中,转基因动物技术有着广泛的应用前景[1]。目前转基因动物的制备,主要是在动物胚胎发育的不同阶段采用原核显微注射法、逆转录病毒载体法和胚胎干细胞法等技术,但...     

京尼平苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

【目的】研究京尼平苷（Geniposide,Gen）对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。【方法】采用开胸结扎冠状动脉左降支的方法,制备大鼠心肌缺血再灌注模型。40只大鼠随机分成5组：假手术组、缺血再灌注模型组、京尼平苷低剂量组、京尼平苷中剂量组、京尼平苷高剂量组,每组各8只。连续监测Ⅱ导心电图（ECG）,比色法检测血清中肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）含量,硫代巴比妥酸法测定心肌组织中丙二醛（MDA）含量,黄嘌呤氧化酶法测定心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）活力。【结果】与模型组相比,京尼平苷低、中、高3个剂量组显著降低ST-段抬高幅度（P〈0.01）、CK值（P〈0.01）、LDH值（P〈0.05）、MDA值（P〈0.05）,SOD值明显增高（P〈0.05）。【结论】京尼平苷能够明显减轻缺血再灌注对心肌细胞损伤程度,对心肌有明显的保护作用,其机制可能与其能够提高SOD活力、减少MDA生成有关。     

京尼平苷对大鼠前列腺成纤维细胞增殖的影响

【目的】研究京尼平苷对大鼠前列腺成纤维细胞增殖的影响,并探讨其机制。【方法】培养SD大鼠前列腺成纤维细胞,取对数生长期的细胞随机分成4组：对照组、京尼平苷10mg/L、20mg/L和40mg/L组。不同浓度的京尼平苷孵育大鼠前列腺成纤维细胞48h后,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,ELISA法测定Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原与转化生长因子β1（TGF-β1）蛋白的含量。【结果】与对照组比较,京尼平苷20mg/L和40mg/L可显著抑制大鼠前列腺成纤维细胞的增殖（P〈0.01）,促进其凋亡（P〈0.01）,同时减少TGF-β1的分泌和胶原的合成（P〈0.05或P〈0.01）。【结论】京尼平苷可抑制大鼠前列腺成纤维细胞的增殖,可能与其减少TGF-β1的分泌和胶原的合成、促进前列腺成纤维细胞的凋亡有关。     

中上段食管癌的外科治疗

目的探讨中上段食管癌的外科治疗方法。方法我院2000年至2008年胸外科手术治疗中上段食管癌500例,482例行根治术,8例姑息性切除术。左进胸420例,右进胸三切口80例,结果全组无手术死亡,总切除率为98．4％。术后胸腔内吻合口漏2例,颈部吻合口漏25例,术后出血3例。结论中上段食管癌治疗以手术为主,根据肿瘤部位灵活选择手术切口;手术治疗中吻合口重建是关键,术中仔细止血,术后对各种可能并发症的早期预防和及时有效处理仍是降低手术并发症发生率和病死率的关键。     

应用PCR快速制备细小病毒B19诊断芯片探针

目的 制备细小病毒诊断芯片探针。方法 利用Primer Premier5．0针对细小病毒B19基因保守区域设计PCR引物，将PCR产物克隆pMD-18T载体。结果 序列分析显示，PCR产物均为细小病毒B19特异保守基因。结论 利用PCR扩增产物制备诊断芯片探针是一种简便有效的方法。     

体外循环心内直视手术280例临床分析

目的:总结280例体外循环心内直视手术中的一些经验教训。方法:本组280例心脏病患者,均在低温体外循环下手术。结果:本组体外循环时间43～150min,主动脉阻断时间14～97min。3例瓣膜置换病人术中进行了二次转流,先心病人和心房粘液瘤病人术后恢复良好,痊愈出院,瓣膜置换术后,因出血再次进胸5例,其中心房切口出血2例,主动脉切口出血1例,纵隔心包引流管刺破心脏表面血管2例,因术后肾功能衰竭行血液透析1例,均痊愈出院。无1例死亡。结论:围术期准备,正确处理体外循环管理及心肌保护,加强术后监护及并发症的处理。     

HBV微环DNA重组质粒的构建及初步药效学实验

目的 构建HBV的治疗性微环质粒并进行体内外实验研究. 方法 采用聚合酶链式反应扩增HBV包膜蛋白preS2.S抗原基因和hIL-2-IFNγ融合基因,将2个基因分别克隆于ZY781载体,得到亲本质粒preS2.S/ZY781和hIL-2-IFNγ/ZY781,测序正确后,用阿拉伯糖诱导生成微环质粒pMCS2.S和pMCIIF. 转染微环质粒于COS-7细胞株,用酶联免疫吸附法定量法检测24、48、72 h时目的蛋白的表达情况.双质粒联合在体电脉冲注射BALB/c小鼠,4周后处死小鼠,检测特异性的体液和细胞免疫应答. 结果 微环质粒pMCS2.S和pMCIIF转染COS-7细胞后,目的蛋白HBsAg、白细胞介素-2、干扰素 γ在不同时间均有表达,在48 h达峰值,分别为(60.3±7.8)、(17.7±1.9)、(10.3±0.9) ng/ml. 微环质粒pMCS2.S能诱导小鼠产生HBsAb的抗体保护,佐剂pMCIIF可显著增强其免疫效果,在低剂量5μg/只就能诱导较强特异性细胞和体液免疫. 结论 成功构建了HBV微环质粒pMCS2.S及其佐剂微环质粒pMCIIF,其有较好的体内外活性.     

高脂血症患者血脂及载脂蛋白含量分析

高脂血症患者血脂及载脂蛋白含量分析傅明德，刘秉文，吴兆丰，方定志，张荣爵，刘宇，范萍，朱虹，王洪敏（成都华西医科大学载脂蛋白研究室，６１００４１）我们测定了成都地区２７８例年龄在５５．３±５．５岁的男性高脂血症患者血溏（ＢＳ）、血脂和各种载脂蛋白含量...     

肝素钙治疗不稳定性心绞痛疗效观察

不稳定性心绞痛容易衍变为急性心肌梗塞(AMI)，积极治疗不稳定性心绞痛十分必要。最近我们对不稳定性心绞痛病人在常规治疗基础上加用肝素钙，疗效显著，报告如下：