风疹病毒JR23株包膜糖蛋白E2的基因扩增与序列分析

目的：扩增风疹病毒（RV）JR23株包膜糖蛋白E2的基因片段，分析E2多二级结构特征及E2蛋白跨膜区结果，为研究E2基因结构与蛋白功能的关系。RV结构蛋白之间的相互作用奠定基础。方法：提取感染RV JR23株的BHK21细胞总RNA，利用RT－PCR方法扩增RV JR23株E2基因片段，将PCR产物测序；利用DNAstar软件分析JR23株E2多肽的二级结构特征；利用TmPred软件对E2蛋白的跨膜区进行预测分析。结果：利用BLAST软件分析测序结果，证明扩增产物为RV E2基因片段；DNAstar两个模型对E2多肽的α螺旋、β折叠等区域的分析有较大差异。尤其是β区，G－R模型的预测范围远大于C－F模型，二级结构中带电性与亲水区的分析结果与E2蛋白的已知功能相符；TmPred预测的有意义跨膜区有4个，少于实际值。结论：经RT－PCR扩增，扩增产物的RV JR23株E2基因序列片段，为进一步研究E2基因和蛋白结构与功能奠定基础，软件分析的结果与实际情况有差异，可能是成熟的E2蛋白与E1蛋白形成异二聚体，而部分改变了自身构象。     

风疹病毒JR23株对中枢神经系统感染的体内和体外实验研究

目的 研究风疹病毒（rubella virus)JR23株感染中枢神经系统（CNS）特性。方法 RV JR23株体外感染人胚脑神经细胞、腹腔感染Balb/c小鼠,观察JR23株在人脑神经细胞的增殖和对不同免疫状态小鼠CNS的感染及由感染导致的神经病理学特征。结果 RV JR23株在人胚脑神经细胞中无明显的致细胞病变作用,病毒在感染后的第72h达最高增殖滴度10^3TCID50/ml。病毒抗原主要分布在人脑神经细胞胞浆。各组小鼠感染RV JR23株后无明显CNS症状,地塞米松、环磷酰胺和药物未干预动物组CNS RV感染率分别为60％、90％、50％。受RV JR23感染的小鼠脑组织出现小灶性胶质细胞增生及神经元坏死。大脑全层均有病毒抗原的分布。 结论 RV JR23株在人脑神经细胞和Ballb/c小鼠脑组织中均能形成感染,感染为非杀细胞性。     

中药大黄抗病毒作用的实验研究

用乙醇提取中药大黄中的有效成分，然后在４种细胞培养上研究其抗病毒作用。结果表明，此药不仅毒性极低，而且能促进细胞生长；在Ｈｅｌａ，Ｈｅｐ－２，ＰＲＫ，ＢＨＫ＿（２１）细胞培养上均有明显的抗病毒作用，对水痘－带状疱疹病毒、单纯疱疹病毒的有效抑制浓度为１００ｍｇ／Ｌ，对风疹病毒Ｇｏｓ－１０株和ＪＲ＿（２３）株的有效抑制浓度分别为１００００ｍｇ／Ｌ和５０００ｍｇ／Ｌ，并有预防病毒感染和直接杀伤病毒的作用。提示中药大黄有良好的开发应用前景。     

北京等四城市妇女膳食结构及营养状况调查与分析

目的 :进一步深入研究不同城市妇女膳食结构及营养状况。方法 :按食物复制法要求被调查对象收集 2 4h摄取的食物 ,以中国的食物成分表为计算依据 ,用 2 0 0 0年修订的“推荐营养素摄入量 (RNI)”作为评价指标。结果 :四城市妇女膳食热量摄入量约占RNI的 80 % ;蛋白质的摄入量以上海市最低 ,仅占RNI的71% ,其它三城市均接近RNI;四城市妇女膳食钙的摄入量约占RNI的 5 0 % ;维生素摄入量除维生素E比较充足外 ,视黄醇当量、维生素B1、维生素B2 和维生素C的摄入量与RNI比较均偏低。结论 :对于钙和各种维生素的缺乏 ,应调整膳食结构加以改善。     

巨细胞病毒的形态学及结构多肽分析

对人巨细胞病毒的形态进行了观察,并对其结构多肽进行了SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果表明巨细胞病毒有23条结构多肽。分子量范围19k～112k。     

9－（N~（4′）取代乙醛缩氨基硫脲）腺嘌呤衍生物的体外抗病毒作用

为筛选有效的抗疱疹病毒药物，将新合成的９种９－（Ｎ４′取代乙醛缩氨基硫脲）腺嘌呤（ＴＳＣ－Ａ）在体外做了抗单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）试验。结果表明，当取代基为苄基和羟乙基时，抗病毒作用明显，最小抑毒剂量分别为４０μｇ／ｍｌ和２０μｇ／ｍｌ。提示苄基和羟乙基为活性基团，可能是化学结构的关键部位。当与无环鸟苷联合应用时，呈现出协同效应，６μｇ／ｍｌ和２μｇ／ｍｌ即有抗病毒作用。对ＴＳＣ－Ａ抗ＨＳＶ作用机理以及与无环鸟苷结合应用时产生的协同效应机理进行了探讨。     

双峰P波与冠心病－127例临床心电图分析

双峰Ｐ波与冠心病－１２７例临床心电图分析沈文锦，夏蓉，朱顺琼，王桂亭，林玲（解放军３０９医院北京１０００９１）异常双峰Ｐ波发生于风湿性心脏病二尖瓣病变。虽也可见冠心病及其他情况，但系统研究报道较少。本文通过１２７例冠心病患者临床心电图分析，探讨异常双...     

风疹疫苗及其联合免疫效果的研究

通过风疹疫苗及其联合免疫效果的研究,认为风疹减毒活疫苗试制W_2BS株有良好的免疫原性,接种后HI抗体的阳转率100%,GMT明显升高,临床反应轻微,单价风疹疫苗与麻疹、流腮、乙脑减毒活疫苗联合免疫时,其抗原性不受干扰,抗体滴度升高情况与单风疫苗相似。风疹疫苗试制W_2BS株对有一定水平风疹抗体(HI≤1:64)的人群,有明显的加强作用,是风疹再免有希望的疫苗株。     

风疹病毒JR23株糖蛋白E1在毕赤酵母表达系统中的表达和抗原性分析

目的在毕赤酵母表达系统中表达风疹病毒(rubella virus，RV)JR23株包膜糖蛋白E1，为研究E1蛋白的结构功能、开发基因工程疫苗和重组蛋白诊断试剂盒奠定基础。方法E1基因的表达质粒pGAPZαa-E1经AVRⅡ线性化后用LiCl法转化酵母菌，在YPD(含100μg／ml Zeocin^TM)平板上两次筛选，挑出单菌落，于液体YPD中培养，并在不同时间收集培养物，用SDS-PAGE和Western blot进行分析。结果SDS-PAGE显示E1重组蛋白在毕赤酵母中高效稳定表达，在48h时表达量达到最高，之后趋于稳定，上清和细胞中均有蛋白表达。Western blot结果表明，上清中的E1重组蛋白能够分别与抗RV的阳性血清和单克隆抗体反应，而细胞中的E1重组蛋白只能与抗RV的阳性血清反应，不能与单克隆抗体反应。这说明所表达的蛋白一部分在信号肽的引导下分泌出胞，并经过折叠形成了正确的构像，能够与单克隆抗体结合；而另一部分由于蛋白本身的跨膜区连在了细胞膜上没有分泌出去，没有形成能够被单抗识别的构像，不能与单抗结合。结论E1包膜糖蛋白在酵母菌中成功表达，且免疫反应性良好。     

BALB/c小鼠特异性免疫状况与中枢神经系统风疹病毒JR23株的感染

目的　探讨机体特异性免疫状况与中枢神经系统 (centralnervoussystem ,CNS)风疹病毒(rubellavirus,RV)感染的关系。方法　本研究选择BALB c小鼠 ,给予地塞米松和环磷酰胺药物后 ,经腹腔感染RVJR2 3株 ,于感染后第 2 1天检测动物的免疫功能 ,观察RV对CNS的侵袭性 ,分析两者之间的关系。结果　环磷酰胺药物组的动物细胞功能明显低于其他实验组 (P <0 0 5 ) ,地塞米松药物组、药物未干预的病毒感染组及阴性对照组之间差异无显著性 (P >0 0 5 )。CNS受染动物的细胞免疫功能明显低于CNS未受染动物 (P <0 0 0 1)。地塞米松、环磷酰胺和药物未干预动物组的CNSRV感染率分别为 6 0 % ,90 %和 5 0 %。各组感染动物RV特异性抗体生成差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　在机体尚未产生特异性抗体前 ,RV对CNS的感染与机体的细胞免疫状况有关