昆虫驱避剂驱蚊肤宁的高效液相色谱分析

目的 :建立紫外 -高效液相色谱法 ,测定驱蚊肤宁中N ,N -二乙基间甲苯甲酰胺(DEET)的含量。方法 :以YWGC18为反相柱 ,甲醇 -水 ( 2 - 1)为流动相 ,紫外检测波长为 2 5 4nm。结果 :驱蚊肤宁中DEET的回收率为 10 0 .10 % ,RSD为 0 .90 % (n =5 )。结论 :该法简便、快速、准确、可靠 ,适合于产品的质量控制。     

空气和空调器样本中SARS冠状病毒的检测

为研究SARS的传播途径,给医务人员防护提供依据。采用8级安德森空气微生物采样器对SARS病房中空气进行采样、收集空调器冷凝水和空调器滤网尘土标本,应用常规反转录套式PCR检测样本中SARS冠状病毒。结果,共检测40份样,检出阳性标本18份,阳性率为45%;其中空气标本36份,阳性15份,2份空调滤网尘土标本均为阳性,2份空调冷凝水标本检出1份阳性。随机挑选PCR阳性标本2份进行病毒分离试验,2份均为阳性。结果显示,检测SARS病房空气标本以及空调器冷凝水和空调器滤网尘土标本,均获得较高的SARS冠状病毒阳性率并分离到存活病毒。表明环境空气中存在活的SARS冠状病毒,推测SARS确有可能通过空气飞沫传播,本结果可供SARS病房的医护人员采取防护措施参考。     

载鼠疫亚单位疫苗多孔微球的制备及其免疫效果评价

目的制备载鼠疫F1抗原疫苗多孔微球,并评价其免疫效果。方法采用生物可降解高分子材料PLGA制备多孔微球,考察不同致孔剂对微球形态和孔隙率的影响,并将鼠疫F1抗原蛋白疫苗吸附到多孔微球上,分别于第0天和第21天肌肉注射免疫BALB/c小鼠,以其为实验组,分别以单独注射疫苗和单独注射多孔微球的小鼠为对照组。在第6、8、10周取血测定抗体滴度,并于第10周取血后皮下注射鼠疫杆菌攻毒（剂量：600×LD50）,攻毒后观察14d。结果 F1抗原多孔微球组抗体滴度明显高于对照组（P〈0.05）;攻毒后,F1抗原多孔微球组免疫的小鼠全部存活,且健康状况良好,而F1抗原对照组小鼠存活率为20%,多孔微球对照组小鼠全部死亡。结论多孔微球球形良好,孔隙率高,用作鼠疫亚单位疫苗载体可以明显提高其免疫效果。     

GPC-3蛋白N端可溶性片段多克隆抗体的制备及鉴定

目的:通过原核表达并纯化GPC3-N端蛋白及根据分析GPC3-N端蛋白可能的抗原表位合成多肽,免疫家兔获得抗-GPC3多克隆抗体,为深入研究GPC3基因的功能及其临床应用奠定基础。方法:将GPC3-N端基因片段亚克隆至pQE30原核表达载体,表达带有6-His的GPC3的融合蛋白质,纯化蛋白后免疫家兔;同时应用Goldkey软件预测分析GPC3蛋白N端可能的抗原表位,根据分析结果合成多肽命名为lw1,免疫家兔,获得抗-GPC3多克隆抗体,并鉴定其特性。结果:成功表达出GPC3-N端蛋白,用纯化后的蛋白及合成的肽免疫家兔,获得特异性兔抗多克隆抗体,通过间接ELISA,Western blot和免疫荧光技术证实该多抗能识别原核表达的外源性及HepG2细胞内源性GPC3蛋白。结论:通过两种方法获得的蛋白免疫家兔都能获得能特异识别GPC3蛋白的多克隆抗体,将为GPC3基因的功能研究提供研究工具,并为临床原发性肝癌的血清学早期诊断提供新的标记物。     

10株鹦鹉热衣原体菌株主要外膜蛋白基因的比较性研究

目的　进行比较性研究了 10株鹦鹉热衣原体菌株 ,分析其主要外膜蛋白 (MOMP)基因的限制性内切酶图谱和基因同源性。方法　接种鸡胚卵黄囊对菌株进行培养 ,收集培养物 ,通过聚合酶链式反应 ,扩增了 10株Cps的主要外膜蛋白基因 ,获得 10 5 8bp的片段 ,根据限制性片段长度多态性 (RFLPs)技术 ,利用AluⅠ酶切此片段 ,获得其限制性图谱。将此片段连入 pGEMT载体 ,进行基因测序。 结果　有 5株菌的MOMP基因完全相同 ,将它们与其它 5株比较 ,仅有个别碱基不同。提示MOMP基因是鹦鹉热衣原体中高度保守的序列     

一种快速简便的SARS冠状病毒RNA提取方法

目的　建立快速简便的SARS冠状病毒RNA提取方法。方法　采用异硫氰酸胍 玻璃粉法提取病毒RNA ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测SARS冠状病毒RNA。结果　 2 4例SARS患者的粪便和痰液标本同时采用异硫氰酸胍 玻璃粉法和QIAGEN公司的试剂盒提取SARS冠状病毒RNA ,其粪便标本RT PCR的阳性率分别为 83.3% (2 0 / 2 4 )和 10 0 .0 % (2 4 / 2 4 ) ;痰液标本RT PCR的阳性率分别为 16 .7% (4 / 2 4 )和 2 0 .8% (5 / 2 4 )。异硫氰酸胍 玻璃粉法RT PCR的阳性率与洗脱温度有关。结论　异硫氰酸胍 玻璃粉法提取SARS冠状病毒RNA简便、快速、经济 ,可用于临床。     

N—取代—2—呋喃丙酰胺类化合物的合成与驱蚊活性

合成了15个呋喃丙酰胺类化合物。化合物 S-1、S-3、S-12、S-13、S-2、S-5、S-7、S-10对白纹伊蚊(Aedes albopictus)有明显的驱避作用。其中前4个驱避作用超过 DEET,S-13作用最强,为 DEET的1.54倍。     

鼠疫耶尔森菌菌株91001的蛋白质组学初步研究

目的建立鼠疫耶尔森菌的蛋白质组学研究方法,获得鼠疫耶尔森菌的基本蛋白质组数据。方法以对人无致病能力的布氏田鼠疫源地菌株91001为研究对象,按照溶解性的不同分别收集菌体蛋白,以3种不同方法(Shotgun-LC-MS-MS,1D-LC-MS-MS和2D-MS)进行分析,将分析数据与基于91001菌株基因组全序列建立的蛋白质理论数据库进行比对,确定91001菌株本实验培养条件下所表达的蛋白组分。结果Shotgun-LC-MS-MS方法鉴定了971种蛋白,1D-LC-MS-MS鉴定了915种,而2D-MS方法则鉴定了233种蛋白质,三者合计为1193种蛋白质,占基因组预测CDS的28．7％(1193／4143)。结论不同的蛋白质组分析方法鉴定的蛋白质种类和数目都存在差异,为更全面地获得鼠疫耶尔森菌蛋白质组数据,有必要同时采取多种方法进行分析。     

“Amnipague”腰椎管造影30例体会

“Ａｍｎｉｐａｇｕｅ”腰椎管造影３０例体会西宁市第一人民医院王效义，李启旺，张育政椎管造影是检查椎管内病变的一种重要方法，观察其充盈和流动情况以明确脊髓的外形大小，椎管内有无梗阻，以及梗阻的部位，范围和性质等，脊柱造影的方法很多，目前临床应用较广的有...     

高效液相色谱法测定蒿甲醚含量方法的研究

目的：建立ＵＶ－ ＨＰＬＣ法测定蒿甲醚含量的方法。方法：用ＰＥ－ Ｐａｃｋ Ｃ１８（４．６ ×１５ｃｍ） 色谱柱，优选法选定冰醋酸－ 甲醇－ 水（１∶８５．４∶１３．６）为流动相，流速１．０ｍｌ·ｍｉｎ－１ ，柱温３０℃，检测波长２３０ｎｍ ，测定蒿甲醚含量。结果：蒿甲醚在１％ 冰醋酸甲醇溶液中，末端紫外吸收可转化为在２３０ｎｍ 处的最大吸收，并且这种转化迅速而稳定；蒿甲醚在１％ 冰醋酸甲醇溶液中不发生异构体转化，以稳定的β体存在。方法的精确度和精密度均符合要求。结论：本法可用于蒿甲醚片剂的含量测定。