淮南地区矿工幽门螺杆菌vacA、cagA基因分布特征

[目的]研究淮南地区煤矿工人幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H.pylori)vacA、cagA基因分布特征。[方法]选择经胃镜及病理组织检查诊断证实有相关胃、十二指肠疾病的349名矿工为研究对象,取其胃窦部活检黏膜作H.pylori的分离培养,利用聚合酶链反应技术(PCR)测定分离培养出H.pylori菌株的vacA、cagA基因,并进行分型。[结果]349份样本中共分离培养出244株H.pylori菌株,其中慢性胃炎、萎缩性胃炎、胃溃疡及十二指肠溃疡幽门螺杆菌培养阳性率分别为61.61%(69/112)、61.54%(48/78)、75%(72/96)及87.30%(55/63);基因测定结果显示,244株H.pylori菌株临床分离株中,84.84%(207/244)含vacA基因,73.36%(179/244)含cagA基因;其中慢性胃炎、萎缩性胃炎、胃溃疡及十二指肠溃疡cagA、vacA基因检出率分别为66.67%(46/69)、50.72%(35/69)、85.42%(41/48)和70.83%(34/48)与93.06%(67/72)、84.72%(61/72)、96.36%(53/55)和89.09%(49/55),4种疾病间差异均具显著性(P<0.01)。进一步分型发现,慢性胃炎、萎缩性胃炎,胃溃疡及十二指肠溃疡患者中vacA 、cagA 分别为44.93%(31/69)、66.67%(32/48)、79.17%(57/72)、87.27%(48/55),差异具显著性(χ2=30.80,P<0.01)。vacA 、cagA 菌株主要多见于损害较严重的胃黏膜表面,如萎缩性炎症、炎性坏死等,23例腺体不典型增生的胃黏膜表面均为vacA 、cagA 菌株。[结论]淮南地区矿工H.pylori感染多为vacA 、cagA 菌株,vacA 、cagA H.pylori菌株为高毒力菌株,且与较严重的胃黏膜病理改变有关,可能是导致矿工慢性胃炎、消化性溃疡的重要因素,临床应充分重视H.pylori菌株毒力因子的监测。     

淮北地区不同生境中粉螨的生物多样性研究

目的探讨淮北地区不同环境粉螨群落结构。方法选取仓储环境(储藏物和/或地尘)、人居环境(卧室或学生宿舍中的床尘及地尘)和工作环境(纺织厂和/或制药厂工作车间中的地尘)等3类不同环境,采样点各40个,每个采样点各采集样本2份,每份l0g。过筛后留取尘渣,进行粉螨的采集、分类、鉴定及计数以及数据分析。结果3类不同环境共检获粉螨31种,隶属于7科21属,多样性分析结果表明:3类环境的粉螨平均孳生密度最高的是仓储环境,为57.2±6.2%,物种数为24,物种丰富指数为2.42,多样性指数为1.35,均匀度指数为0.97。结论3类不同环境中粉螨的孽十密度及多样性差异较大。     

淮北市仓储环境中粉螨种群组成及多样性分析

目的调查仓储环境中粉螨的孳生情况及多样性。方法采用直接镜检法和水膜镜检法分离粉螨,并进行计数、鉴定及数据分析。结果420份样本中339份检出粉螨,检出率为80.71%。粉螨密度差异较大,从1.5～286.2NO.g-1不等。共检获粉螨26种,隶属7科17属。多样性分析表明,丰富度指数(Rmargalef)为2.65,多样性指数(H′)为3.14,均匀度指数(J)为0.96。结论淮北市仓储环境中粉螨种类较多,污染严重,群落组成多样化,应引起重视。     

尘螨变应原Der f 2基因克隆及序列分析

目的:获得尘螨变应原Der f 2基因及其生物信息学资料.方法:提取粉尘螨总RNA,RT-PCR合成Der f 2的cDNA片段,回收PCR产物并连接至pMD19-T simple,经测序验证后亚克隆入表达载体pET-28a( ),转化大肠杆菌感受态细胞后提取质粒,双酶切鉴定.用ExPaSy,EBI,NCBI网站的在线软件对测序结果进行分析.结果:RT-PCR扩增获得了Der f 2 cDNA片段,酶切、电泳结果表明克隆和亚克隆获得成功.与参考序列相比,测序结果多了87 bp(77～163),但Blastn发现中国广州和德国Reinbek报道的序列中也含此87bp.同源性、相似性、序列比对及分子进化分析提示,该序列与中国广州和德国Reinbek报道的序列亲缘关系较近.推测该变应原由176个氨基酸组成,与附睾分泌蛋白E1具有同源性,信号肽位于1～17aa处,在6～24aa处有一跨膜螺旋.二级结构由a-螺旋(16.57%),延伸链(32.57%)和随机卷曲(50.86%)组成.结论:获得了粉尘螨变应原Der f 2编码基因及其分子特征,为进一步生产基因工程变应原用于临床诊治变态反应性疾病奠定了基础.     

无锡地区皮肤病患儿血清食物特异性IgG 的检测结果分析

目的:调查无锡地区皮肤病患儿血清食物特异性IgG阳性率及其流行特征。方法:回顾性分析2017年1月至2018年5月无锡市儿童医院皮肤科就诊患儿食物特异性IgG检测结果。结果:共纳入891例患者,其中湿疹364例,荨麻疹161例,特应性皮炎167例和过敏性紫癜199例;血清食物特异性IgG检测阳性率为72.8%,其中以特应性皮炎最高为80.2%,其他依次为荨麻疹(76.4%)、湿疹(72.3%)和过敏性紫癜(64.8%);食物特异性IgG阳性以鸡蛋(55.0%)、牛奶(34.1%)和小麦(7.7%)最多见,其他依次为大米(1.9%)和大豆(1.5%),余下9种食物均未发现阳性者。结论:在皮肤科就诊患儿中,血清食物特异性IgG阳性率高,建议对皮肤疾病患者进行食物特异性IgG检测,查找引起血清IgG升高的食物,对临床治疗具有积极的作用。     

粉尘螨变应原第3组分基因克隆及序列多态性分析

目的获得粉尘螨变应原第3组分(Der f 3)的编码基因并了解其序列多态性。方法根据GenBank已公布的Der f 3核酸序列设计引物,用RT-PCR扩增获得其编码基因,插入pMD19-T载体,进行序列测定和多态性分析。结果获得粉尘螨变应原Der f 3编码基因为780bp。5株Der f 3基因cDNA克隆的核苷酸序列与参考序列(GenBankNo.AY 283291,GenBank No.D63858,GenBank No.EU312162,GenBank No.EU312163)相比,有19处cDNA序列发生突变,但有7处突变至少在3个cDNA克隆中序列一致;推导出氨基酸序列后进行比对,有11处氨基酸序列发生变化,有4处与上述7个位点相一致。结论获得了粉尘螨变应原Der f 3编码基因且证明其序列具有多态性,为进一步开展相关研究奠定了基础。     

方格星虫多糖体外抗乙型肝炎病毒活性的研究

以HepG2．2．15细胞为研究模型，选用拉米夫定为阳性对照药物，采用Taqman荧光定量PCR检测细胞上清HBVDNA，ELISA检测培养上清液HBsAg、HBeAg水平的变化。采用MTT法观察它们对细胞生长的影响。发现方格星虫多糖的4个剂量组（250，125，62．5，32．3mg／L）和所观察的时间点（3、6、9d）对HBVDNA、HB—sAg、HBeAg表现出剂量与时间依赖的抑制作用（P〈0．05）。方格星虫多糖对HBVDNA抑制的半数抑制浓度为49．48mg／L，对HepG2．2．15细胞半数细胞毒性浓度为250mg／L，治疗指数为5．06。认为方格星虫多糖对培养2215细胞中呈剂量与时间依赖的抑制作用，具有较好的应用前景。