2型糖尿病患者载脂蛋白CⅢ基因多态性与高三酰甘油血症关系研究

目的探讨中国南通地区汉族2型糖尿病（T2DM）患者中高三酰甘油血症（HTG）是否与载脂蛋白CⅢ（apoCⅢ）基因启动子区T-455C和C-482T多态性有关。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性检测212例T2DM患者apoCⅢ-455和-482位点多态性的基因型和等位基因频率,同时检测相关生化指标。结果 apoCⅢT-455C和C-482T多态性位点之间存在强连锁不平衡（D＇〉0.7,r2〉0.6,P〈0.0001）。等位基因以常见等位基因-455T和-482C为主,-455和-482位点基因型均分别以杂合型-455TC和-482CT为主。此2个多态性位点等位基因和基因型频率在正常三酰甘油（NTG）组和HTG组之间差异均无统计学意义（P〉0.05）。-455CC和-455TC型患HTG的风险与野生型-455TT相比差异无统计学意义（P〉0.05）,比值比（OR）[95%可信区间（CI）]分别为0.79（0.31～1.99）和1.09（0.52～2.28）。-482TT和-482CT型患HTG的风险与-482CC相比差异也无统计学意义（P〉0.05）,OR（95%CI）分别为1.33（0.53～3.34）和1.65（0.78～3.51）。所有相关生化指标在这2个多态性位点各基因型之间差异也均无统计学意义（P〉0.05）。结论在中国南通地区汉族T2DM患者中,未发现apoCⅢ基因启动子区多态性与HTG有关联,与非T2DM人群中研究结果不一致。     

NCCLS文件中方法对比及偏差评估(EP9-A)的应用

NCCLS的标准化文件之一——EP9-A：用患者样本的方法比较和偏差的估计，为临床实验室评价一个实验室及生产厂家提供了对评价测定同一被测物的两种方法、试剂或仪器之间偏倚的实验设计，为减少检测结果的误差、保证检测结果的准确可靠，以实现结果之间的可比性提供实验依据，是临床工作者采用患者标本进行不同检测系统比较的标准化途径。     

凝血酶促进结肠癌SW480细胞生长的研究

目的探讨凝血酶对结肠癌SW480细胞增殖及细胞周期的影响。方法将20 nmol/L、100 nmol/L、500nmol/L的凝血酶作用于SW480细胞48 h,以未处理组（0 nmol/L）作为对照。CCK-8（cell counting kit-8）法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期变化;RT-PCR检测蛋白酶活化受体-4（protease-activated receptor-4,PAR-4）的mRNA表达;Western blotting检测NF-κB p50蛋白表达。结果在20-500 nmol/L浓度范围内,凝血酶可剂量依赖性的促进SW480细胞的增殖;细胞周期显示G0/G1期细胞百分数减少,S期及G2/M期细胞百分数增加,表明凝血酶可诱导细胞从G0/G1期向G2/M期发展,从而促进细胞增殖;随着凝血酶浓度的增加,PAR-4 mRNA及NF-κB p50蛋白含量也有不同程度的增加。结论在20-500 nmol/L浓度范围内,凝血酶可促进结肠癌SW480细胞的增殖,加速细胞周期进程;其作用可经PAR-4介导,并与NF-κB信号通路活化有关。     

不同精密度评价方法的比较及在临床血糖测定中的应用

目的：以临床血糖项目测定为例进行精密度评价,比较3种精密度评价方法的差异。方法选择2个具有医学决定水平的人混合血清作为实验标本,采用Advia2400全自动生化分析仪测定血糖浓度,分别根据方差分析、《用户对精密度和正确度性能的验证试验》（EP15-A2）和《定量测量方法的精密度性能评价》（EP5-A2）文件要求进行精密度评价实验。计算并比较3种精密度评价方法的变异系数（CV ）。结果选择低值和高值2个不同浓度的实验标本,按方差分析 CV为0．80％、0．73％,按照EP15-A2计算的 CV为0．81％、0．72％;按照EP5-A2计算的CV分别为1．25％、1．09％,均小于国家标准3．00％。EP5-A2方案计算的室内精密度与方差分析、EP15-A2方案的结果比较,差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论 EP5-A2方案计算的室内精密度大于方差分析和EP15-A2方案的结果,后两种方案在精密度的评价上无本质区别,实验室要进行更为严格的精密度评价需采用 EP5-A2方案。     

移动差值控制图评估临床实验室肌钙蛋白不确定度

目的运用控制图评估肌钙蛋白I(cTnI)测量不确定度。方法采用日本东曹AIA-1800全自动荧光磁微粒酶免分析仪测定cTnI控制品,1次/天,共30d;用Anderson-Darling法检验数据的正态分布性和独立性;建立单值-移动差值及指数加权移动平均值控制图及评估不确定度。结果 Anderson-Darling检验cTnI质控数据为正态分布性且具有独立性,结果测量不确定为(0.218±0.016)μg/L,(k=2)。结论移动极差控制图法可用来评估cTnI结果不确定度,本研究为临床实验室评价不确定度提供了新的思路。     

样品不同处理方法对PCR-微孔板杂交法检测TTV DNA的影响

自1997年底日本学者Nishizawa等[1]报道从输血后肝炎病人血清中分离出TTV以来 ,不少学者做了大量有关TTV的检测工作.目前国内外用PCR方法检测TTV的报告较多,但不同实验室检测的结果存在较大差异,可能与其检测方法特别是样品处理方法不同有关.我们比较了8种常规的DNA抽提方法,并建立了适合于PCR-微孔板杂交法检测TTV DNA的标本处理方法.     

血清肌钙蛋白I质控物的研究

目的评价自制血清肌钙蛋白I(cTnI)质控物均匀性和稳定性。方法按实验设计收集混合血清,分装-20℃贮存。参照CNAS-GL03《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》,对质控物的均匀性进行评价;运用恒温加速试验研究稳定性。结果质控物均匀性差异无统计学意义(P0.05)。恒温加速试验显示,血清cTnI降解随时间变化符合化学动力学一级反应,根据Arrhenius方程推测4℃贮存7d,-20℃贮存有效期为19个月;监测质控物9个月,与恒温加速试验结果一致。结论自制血清cTnI质控物均匀性、稳定性良好,可用于临床室内质量控制。     

悬浮阵列技术在研究与临床中的应用

悬浮阵列技术是一种以荧光编码微球为核心,集流式细胞、激光分析、高速数字信号处理等多种技术于一体的多指标并行分析技术平台,可一次同时准确定量检测100种不同的生物分子;具有高通量、高灵敏度,并行检测等特点;常用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体、配体识别分析等研究.     

凝集素亲和层析分析血清GGT寡糖链结构

目的用凝集素亲和层析法,探讨血清GGT在各种肝病时其寡糖链的变化,寻找出肝癌特异性GGT寡糖链结构,为进一步建立简易、特异的小柱亲和层析法分离肝癌特异性GGT奠定基础.方法以唾液酸酶水解GGT糖链末端的唾液酸,再用DSA和ConA亲和层析柱对各种肝病患者血清GGT进行洗脱,结合两种凝集素结合糖链的特性,分析其糖链结构.结果血清经唾液酸酶水解,再用两种凝集素亲和层析后,发现肝病患者GGT糖链结构均有所变化.N糖链天线数肝癌＞良性肝病＞正常人,糖链末端唾液酸量肝癌＞良性肝病＞正常人.肝癌病人出现和DSA强结合组分,该组分不被ConA结合.结论肝癌病人血清GGT可出现和DSA强结合的三天线或四天线N糖链,可利用这一特点建立检测肝癌特异性GGT的凝集素亲和小柱层析法.     

肿瘤坏死因子基因多态性与系统性红斑狼疮

肿瘤坏死因子 (TNF)是具有多种生物活性的细胞因子 ,已经证明TNF在许多疾病中 ,尤其是在自身免疫病中起重要作用 ,为了弄清TNF与这些疾病的关系 ,人们对TNF的基因多态性与转录及其与系统性红斑狼疮的关系进行了大量研究 ,认为TNF基因多态性在一定程度影响TNF的转录 ,这为探讨TNF基因多态性与系统性红斑狼疮提供理论依据。本文就TNF基因多态性影响转录及其与系统性红斑狼疮相关性作一综述