副黏病毒F蛋白融合活性位点中病毒特异性氨基酸基因突变分析

目的 了解副黏病毒融合蛋白(F)融合活性位点中的病毒特异性氨基酸在细胞融合中的作用.方法 以新城疫病毒(NDV)和人副流感病毒(hPIV)为例,在已确定的F蛋白融合活性位点中对病毒特异性氨基酸进行定点突变,然后将突变体F基因与同源或异源的血凝素.神经氨酸酶(HN)基因共转染BHK21细胞后,在真核细胞中表达.Giemsa染色和指示基因法检测细胞融合功能,荧光强度分析(FACS)检测F蛋白的表达效率.结果 在NDV F的突变体中,N150D-L152D的融合功能达到野毒株的46.31%;而N257D-N258D-Q259E、G271D-N272D和Q279E-Q281E的融合活性却几乎消失,分别只有野毒株的1.25%、3.14%和2.23%;N296D-N297D的融合功能是野毒株的97.68%.在hPIV F的突变体中,D143A-E145A的融合功能达到野毒株的32.63%;E223Q-K224A几乎不能形成合胞体,其融合活性只有野毒株的1.91%;K263A-R265A、D268A-D270A和R475A-R476A的融合功能分别是野毒株的14.63%、19.52%和28.95%.FACS结果表明,NDV F的N257D-N258D-Q259E、G271D-N272D和Q279E-Q281E突变体及hPIVF的E223Q-K224A突变体F蛋白在细胞表面几乎没有表达;其余所有突变体F蛋白的表达效率与野毒株相比,基本不变.结论 对于NDV F来说,N257、N258、Q259、G271、N272、Q279、Q281对NDV F的特异性细胞融合功能起重要作用;N150和L152也起一定的作用,但是N296和N297却没有作用.对于hPIV F来说,E223和K224对hPIV F的特异性细胞融合功能起非常重要的作用;D143、E145、K263、R265、D268、D270、R475、R476的作用也很重要.     

眼外肌麻痹126例病因分析

我们收集了1999年4月至2005年10月在我院住院的126例眼外肌麻痹患者，就其发病原因进行了分析，现将结果报告如下。     

肾综合征出血热病毒基因型和流行特点分析

目的探讨山东省汉坦病毒(HV)主要流行株的基因型和流行特点。方法采集山东地区有代表性的鼠肺标本，应用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)扩增技术及核苷酸序列测定方法对免疫荧光抗原阳性的标本进行HV G2基因扩增并测序，与原有山东毒株一起进行同源性分析、系统发生树分析。结果山东省新分离18株HV均为汉城(SEO)型，与以往山东SEO型HV有较高同源性，在95．7％以上，属于同一亚型。山东省汉滩(HTN)型HV同源性较低，在77．9％以上，属于不同亚型。结论山东省HV是以SEO型为主的SEO和HTN混合型疫区。SEO型基因变异率低，有较高的稳定性。而HTN型HV变异率高，稳定性差。     

酵母表达的风疹病毒E1在ELISA检测中应用

目的将毕赤酵母表达系统中表达的E1糖蛋白作为包被抗原,建立一种优于病毒作为包被抗原的风疹病毒(rubellavirus,RV)抗体ELISA检测方法。方法将重组包膜糖蛋白(E1)抗原和风疹病毒分别作为包被抗原,用间接ELISA法检测90份临床血清标本,同时用晶美(JINGMEI)进口分装试剂盒和德国RECI公司试剂盒进行检测;将RECI试剂盒作为金标准,计算另外三者检测结果的特异性、灵敏性和符合率;比较他们之间的差异有无统计学意义,特别是重组抗原与病毒抗原作为包被抗原检出RV抗体阳性率的差异有无统计学意义。结果重组蛋白重复性实验结果经统计学处理,P>0·05,差异无统计学意义;RECI试剂盒与重组抗原、病毒抗原的检测结果差异有统计学意义(P<0·05);重组抗原与病毒抗原的检测结果差异有统计学意义(P<0·05),作为包被抗原,重组抗原优于病毒抗原。结论用毕赤酵母表达的RVE1重组蛋白作为包被抗原进行ELISA检测优于病毒作为包被抗原,具有广阔的应用前景。     

搭建灵活多样的实践教学平台 加强预防医学本科生创新能力培养

SARS的流行不仅暴露了我国公共卫生领域存在的诸多问题，而且也反映了我国现行的预防医学教育已经不能满足现代公共卫生事业发展对高级预防医学专业人才的需求。我们必须改变这种单一的、整齐划一的培养模式，积极探索多渠道、灵活多样的培养途径，着力培养学生的创新能力。     

风疹病毒检测方法研究进展

风疹是由风疹病毒(rubella virus,RV)引起的急性呼吸道传染病.我国虽然已将其列入监测管理疾病.但风疹疫苗接种尚未列入计划免疫范畴.RV最严重的危害是经垂直传播导致胎儿先天性感染,未感染过RV的孕妇,以孕期3个月内感染Rv对胎儿危害最大,可引起胎儿死亡或出生后表现为先天性心脏病、耳聋、白内障、智力发育低下等畸形,称为先天性风疹综合征(CRS).近年来,优生优育日益受到重视,RV感染作为出生缺陷监测中的重要内容,需要较高水平的检测方法.现就RV检测方法研究进展综述如下.     

风疹病毒济南地方株的生物学特性

研究了风疹病毒济南地方株,标准株G0S_(-10),疫苗株RA_(27/5)的某些生物学特性,结果表明,济南地方株在BHK_(21)细胞上病复发展迅速,产生细胞融合,细胞病变初期血凝素滴度最高,冻融次数和温度可影响血凝活性,绵羊和鸽子红细胞与一日龄的鸡红细胞对风疹病毒同样敏感。     

用指示基因法定量分析副粘病毒包膜糖蛋白所致的细胞融合

目的建立一种定量分析副粘病毒包膜糖蛋白融合细胞功能的方法。方法　将Vtf\|7重组痘苗病毒感染BHK21细胞后，分别转染待测基因DNA和Pg1nt7β-galDNA，16h后将两个细胞群混合，37℃15h后用NP-40裂解细胞，取上清进行显色反应，在SOFTMAX软件支持下用ELISA自动测定仪在570nm测吸光度A值。结果　指示基因法与细胞计数法有密切相关关系，r=0.9890(P＜0.01)；与面积判断法的符合率达100%。最佳主要反应条件包括16mmol/L底物浓度；显色反应20～25min；1μgDNA转染量；每种细胞群接种1×10     

两种微量ELISA法检测风疹病毒抗体的比较

建立两种微量ELISA 法测定风疹病毒抗体,与HI 试验有良好的相关关系,二者总符合率88.9%,阳性符合率95.2%,与HI 相比,ELISA 法简便、快速、敏感。     

不同风疹病毒株的结构多肽肽图分析

对风疹病毒GOS-_(10)、RA27/3、JR_(11)、JR_(23)的结构多肽肽图分析表明,GOS-_(10)、RA27/3两株的多肽有相同的肽图,而JR_(11)、JR_(23)株与前两株的肽图有差异,JR_(11)、JR_(23)株之间也略有不同。由此可见,济南地区存在着不同风疹病毒株的流行。