阳离子脂质体LipofectinTM对WT1反义核酸在K562细胞的摄入和胞内分布的影响

目的探讨阳离子脂质体LipofectinTM对WT1反义寡核苷酸(反义核酸)细胞摄入和胞内分布的影响. 方法采用阳离子脂质体介导WT1反义核酸转染K562细胞,应用流式细胞仪、荧光显微镜分别观察反义核酸的细胞摄入和胞内分布,RT-PCR检测处理前后WT1 mRNA表达水平. 结果 (1)脂质体提高K562细胞对反义核酸的摄入,细胞摄入率达70.9%,平均荧光强度提高6倍以上;脂质体介导转染反义核酸时其细胞浆中类核内体或溶酶体中的点状结构较非脂质体处理时大,胞核内有明显的荧光物质分布;(2)脂质体介导WT1反义核酸可下调WT1 mRNA水平. 结论阳离子脂质体可提高反义核酸的细胞摄入并改变其胞内分布,这可能是它增强反义核酸生物活性的机制.     

同种反应性自然杀伤细胞在小鼠主要组织相容性复合物半相合骨髓移植中的作用

目的研究同种反应性自然杀伤(NK)细胞在小鼠主要组织相容性复合物(MHC)半相合骨髓移植(BMT)中对宿主粒细胞和T细胞的清除、造血重建、植入及移植物抗宿主病(GVHD)的影响。方法以(C257BL／6×BALB／c)BCF_1(H-2~(d/b+))为供鼠,BALB／c(H-2~d)为受鼠建立小鼠MHC半相合BMT模型。根据照射剂量及NK细胞处理的不同将受鼠分为8．5 Gy对照组及7,6和5 Gy实验组。 8．5 Gy对照组进一步分为单纯照射组和BMT组,7,6及5 Gy实验组均进一步分为单纯照射组、BMT 组、非同种反应性NK(non-alloNK)细胞组及同种反应性NK(alloNK)细胞组。以外周血白细胞和血小板计数、受鼠型粒细胞及T细胞计数、H-2~(d/b+)细胞表达水平以及病理学检查等指标评价同种反应性 NK细胞的预处理作用。结果8．5 Gy单纯照射组生存期为(6．00±0．82)d,其他组生存期均大于60 d,各组均未观察到GVHD的临床及病理学表现;alloNK细胞组造血重建明显快于其他组(P值均< 0．05);移植后1天各照射剂量alloNK细胞组骨髓及脾细胞中受鼠型H-2~(d+)粒细胞和T细胞明显减少, 与相同照射剂量BMT组及non-alloNK细胞组比较差异有统计学意义(P值均<0．05);7,6和5 Gy alloNK细胞组供鼠H-2~(d/b+)细胞植入率显著高于相同照射剂量BMT和non-alloNK细胞组(P值均< 0．05)。结论alloNK细胞在小鼠MHC半相合BMT中具有清除受鼠体内残存粒细胞和T细胞、提高供鼠细胞植入和促进造血重建的作用,且不引起GVHD。     

脐带间充质干细胞鞘内注射治疗脊髓小脑性共济失调

背景：脊髓小脑性共济失调是以小脑共济运动障碍为主要临床表现的遗传性变性疾病,迄今为止缺乏有效的药物治疗。目的：观察脐带间充质干细胞鞘内注射治疗脊髓小脑性共济失调的临床疗效。方法：38例脊髓小脑性共济失调患者给予脐带间充质干细胞鞘内注射治疗,1×106/(kg?次),1次/周,4次为1个疗程。38例患者共接受52个疗程治疗,其中27例接受1个疗程治疗,8例接受2个疗程,3例接受3个疗程。采用世界神经病联合会国际合作共济失调量表(ICARS)对患者治疗前后神经功能进行评定,分值越高表示神经功能缺损越严重,采用日常生活能力量表(ADL)对患者治疗前后的日常生活能力量进行评估,分值越低,日常生活能力越强。治疗后对患者进行随访。结果与结论：38例脊髓小脑性共济失调患者52个疗程治疗总有效率为84.6%。治疗结束1个月与治疗前比较 ICARS及ADL评分均明显降低(P<0.01)。有效患者行走不稳、站立不稳、运动迟缓、上肢精细动作障碍、书写困难、构音障碍、眼球运动障碍等临床症状得到改善。治疗后常见的不良反应有头晕(1例),腰痛(2例),头痛(1例),发热(2例),均在1-3 d内消失。在中位随访39个月(11-59个月)治疗过程中,无治疗相关的不良反应发生。有效患者疾病稳定时间在1-19个月,平均(5.95±4.84)个月。结果表明脐带间充质干细胞鞘内注射治疗是安全的,可在一定时间内一定程度上改善脊髓小脑性共济失调患者的临床症状,延缓疾病进展,多疗程治疗有助于多数患者神经功能的进一步改善。     

恩度联合化疗一线治疗老年晚期肺鳞癌的临床研究

目的观察抗肿瘤新药重组人血管内皮抑素注射液（恩度）联合吉西他滨、顺铂一线治疗老年晚期肺鳞癌的疗效,探讨其对血管内皮生长因子（VEGF）的影响和心脏毒性的耐受。化疗前和化疗后第3周及第6周采用ELISA法测定血清VEGF的水平。方法45例老年晚期肺鳞癌患者接受恩度联合吉西他滨和顺铂方案治疗,每3周为1个周期。用药1周期后评价毒性,2周期后评价疗效。结果总共完成的治疗周期数为156个,平均3．44个周期,完全缓解为8．89％（4／45）,部分缓解为40．00％（18／45）,总有效率为48．89％,疾病控制率为82．2％（37／45）。化疗后3周,血清VEGF水平明显下降,较化疗前比较差异有统计学意义（P〈0．05）;化疗后6周血清VEGF水平显著下降,与化疗后3周比较差异有统计学意义（P〈0．05）。G3,4级的毒性主要是血液学毒性。有3例患者出现严重频发房性早搏和相关症状。肌钙蛋白升高,LEVF降低。9例在治疗后出现了心电图变化,表现ST—T段改变和I度房室传导阻滞以及窦性心动过速,行心脏彩超及心肌酶谱、肌钙蛋白等检查均无异常。6例出现了轻至中度血压升高。化疗后患者生活质量QOL评分高于治疗前（P〈0．05）。结论恩度联合吉西他滨和顺铂方案一线治疗老年晚期肺鳞癌疗效可靠,可以抑制肿瘤的生长和转移,抑制血管内皮生长因子的表达。心血管的毒性可以耐受,该方案毒性低、安全性好。     

皮损内注射聚肌胞治疗扁平疣的疗效观察

扁平疣是皮肤科门诊较为常见的临床疾病之一，好发于青少年面部，病程相对较长，影响美容甚至导致心理健康问题。我们分析自2002年起采用聚肌胞注射液皮损内注射治疗的31例临床资料完整的扁平疣患者，报告如下。     

Frey术式治疗合并胰管结石慢性胰腺炎12例临床分析

慢性胰腺炎是以反复发作的上腹部疼痛伴不同程度胰腺内外分泌功能减退或丧失为特征的胰实质和胰管的不可逆慢性炎症.     

抑制性杀伤细胞受体在NK细胞和T细胞上的表达及其与急性移植物抗宿主病的关系

 目的 研究异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）患者移植前后外周血NK及T细胞上4种抑制性杀伤细胞受体（CD158a、CD158b、NKB1和CD94／NKG2A）的表达及其与急性移植物抗宿主病（aGVHD）的关系。方法 采用流式细胞术检测NK及T细胞上抑制性杀伤细胞受体的表达。结果 NK细胞上CD158a和CD158b的表达于移植后3～4个月、NKB1和CD94／NKG2A的表达于移植后2个月恢复移植前水平。移植前后CD158a和NKB1在CD+3 T细胞上持续低水平表达;移植前CD158b和CD94／NKG2A在CD+3 T细胞上的表达水平较高,且主要表达于CD+8 T细胞上,移植后其在CD+8 T细胞上的表达增加。CD+8 T细胞上CD158b的表达在发生Ⅰ度aGVHD时显著增高,与无aGVHD组及Ⅱ~Ⅳ度aGVHD组相比,差异均有统计学意义（P均＜0.05）;在发生Ⅱ~Ⅳ度aGVHD时增高不明显,与无aGVHD组相比,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 CD158b在CD+8 T细胞上高表达可能有助于降低T细胞同种反应性,减轻aGVHD的程度。     

醇质体在经皮给药方面的应用

对一种新型经皮给药载体——醇质体进行综述研究分析.根据近10年国内外文献,总结醇质体的制备方法、性质、促透机制及应用进展.醇质体性质稳定,制备简单,包封率高,适用于各种性质的药物,与普通脂质体相比,显著提高了透皮速率,能传递药物至皮肤深层,增加药物在皮肤深层的滞留量.醇质体的制备工艺简单,可以包载各种类型的药物(包括水溶性、脂溶性、两亲性以及蛋白多肽类),并能达到较高的包封率.与普通脂质体相比,醇质体可以携带药物到达皮肤深层,并提高其经皮吸收速率;与传递体相比,醇质体更稳定;醇质体还可制成凝胶、贴剂、乳膏等方便临床用药的制剂,因而在局部用药和药物经皮吸收方面具有很好的应用前景.