鸡胚脊髓背角神经营养物质的HPLC纯化分析

目的　纯化鸡胚脊髓背角内的神经营养物质。方法　采用 Sephadex G- 2 0 0凝胶过滤层析法分离鸡胚脊髓背角内的神经营养物质 ,以鸡胚背根神经节细胞培养结合 MTT法检测各洗脱峰液的神经营养活性。所得活性组分用高效液相色谱技术 (HPL C)进一步分离 ,同前用 MTT法检测各洗脱峰液的神经营养活性。结果　经层析获得三个洗脱峰 ,其中第 2洗脱峰液促进培养神经细胞生长的活性最强 (P<0 .0 1) ,提示 2峰洗脱液含有神经营养物质。 HPL C后获得 7个洗脱峰。经 MTT法测定各峰洗脱液对鸡胚 DRG神经细胞的生长活性发现 F峰有明显的神经营养活性 (P<0 .0 5 )。结论　通过分离纯化获得了有较强活性的神经营养物质。     

FGF,IGF和EGF在成体脊髓的分布（摘要）

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子（FGF）、胰岛素样生长因子（IGF）和表皮生长因子（EGF）在成年猫脊髓的分布。方法：取脊髓（T11）制作20цm厚冰冻切片，用FGF、IGF和EGF（效价：1：250）兔抗血清行免疫组织化学ABC法染色。观察FGF、IGF和EGF在正常脊髓中的分布以及亚细胞定位。结果：FGF的免疫阳性反应物主要分布于脊髓灰质神经元，胞浆染色，腹角较为明显，Ⅱ板层也有少量阳性细胞。背核神经元也有阳性；此外，神经突起及纤维亦有阳性染色。灰、白质内还见阳性胶质细胞，白质内血管也有阳性染色。相对之，IGF和EGF在脊髓的分布相似，免疫阳性反应物主要分布于灰质内各板层神经元，胞核染色明显，胞浆亦有浅染，灰质和白质内未见阳性胶质细胞。结论：成年猫脊，髓存在FGF，IGF及EGF，提示这些生长因子与成体脊髓功能有关。     

运动训练对肾上腺NF-KB表达的影响

探讨不同负重(轻负重占体重1%,中负重占体重3%,重负重占体重5%)对游泳大鼠肾上腺NF-ΚB表达的影响。方法 SD成年大鼠分为轻、中、重负重游泳组,长期游泳训练6周(每天1h)后处死各组大鼠(n=8/组),取肾上腺用RT-PCR检测NF-ΚB表达水平,用多因素方差分析进行统计学处理。结果肾上腺有NF-ΚB表达;中、重负重组肾上腺NF-ΚB表达水平与轻负重组比较明显减少(P0.05),差异有统计学意义。结论长期中、重度负重游泳训练导致肾上腺NF-ΚB下调。     

运动训练对肾上腺神经生长因子表达的影响

目的调查长期游泳训练对大鼠肾上腺(NGF)表达的影响。方法成年SD大鼠分为无负重组,轻负重组(体重的1%),中负重组(3%)和中负重组(5%)四组。用水槽进行长期游泳训练6周,每天1h。6周后取肾上腺用RT-PCR检测NGF水平。结果各组肾上腺均能检测到NGF mRNA,中度负重组肾上腺NGF表达水平明显下调,与其它两组比差异有统计学意义(P<0.05)。结论重度负重游泳导致肾上腺NGF表达下调,提示NGF在长期游泳训练对大鼠肾上腺可能有其生物学作用。     

qRT-PCR检测中通过β-Actin Ct值预测检测因子Ct值

目的：探讨qRT-PCR检测中β-Actin Ct值与检测因子Ct值检出率和相关性分析.方法：以32只成年SD大鼠脊髓为实验样本进行两次qRT-PCR检测,并分别测β-actin Ct值和PENK、CNTF、PDGF Ct值,随后进行独立样本T检验、卡方检验、一元线性回归分析.结果：两次qRT-PCR检测β-Actin Ct值无统计学差异（P＞0.05）;两次检测均显示β-actin Ct值小于20与β-act-in Ct值大于20对其他因子的检出率有显著性影响（P＜0.05）; β-actin Ct值与检测因子Ct值有显著的线性相关性,线性回归方程为y=-0.983＋0.708x（y：欲检测基因Ct值,x：实际测得β-actin Ct值）.结论：qRT-PCR检测中可通过β-Actin Ct值预测需检测因子的Ct值.     

体外培养神经干细胞NGF、BDNF和NT-3及其受体trkA、trkB和trkC的表达

目的检测体外培养神经干细胞（NSC）神经生长因子（NGF）,脑源性深营养因子（BDNF）,神经营养因子3（NT-3）及其受体trkA、trkB、trkC的表达．方法胎鼠海马神经干细胞培养并鉴定后,提取其总RNA,RT-PCR技术检测NGF、BDNF、NT-3及其受体trkA、trkB、trkC的表达情况．免疫组化染色观察i种生长因子在NSC的分布和亚细胞定位．结果RT-PCR显示NSC表达i种生长因子及其受体mRNA．免疫组化染色显示NSC表达i种生长因子蛋白,免疫阳性产物主要分布于细胞质．结论体外培养NSC表达NGF,BDNF,NT-3及其受体,提示三种因子对NSC发育和发挥生物学功能可能有重要作用．     

体外培养神经干细胞CNTF、TGF-β1和IGF-1的表达

目的研究培养神经干细胞（NSC）中CNTF,TGF-β1,IGF-1基因表达情况.方法取小鼠胎鼠海马,分离纯化培养NSC,提取总RNA,RT-PCR技术检测CNTF,TGF-β1,IGF mRNA的表达情况.结果培养NSC中各因子mRNA均有表达;CNTF,TGF-β1表达较强,IGF-1表达较弱.结论体外培养的NSC表达CNTF,TGF-β1含量较高,可能是应用其治疗神经疾病的理论基础.     

大鼠脊髓全横断后脊髓内NGF、NT3表达的变化

目的探讨大鼠脊髓全横断后不同时相（3、7、14、21天）脊髓内NGF，NT3表达的变化。方法采用免疫组织化学ABC法及阳性神经元计数，来检测脊髓全横断后不同时相NGF、NT-3的表达。结果（1）脊髓全横断后脊髓腹、背角NGF阳性细胞数均较正常增多（P〈0．05），尤以7天明显；脊髓全横断后脊髓腹、背角NT-3阳性细胞数均较正常增多（P〈0．01），尤以7天明显。结论NGF、NT-3表达的变化可能与脊髓可塑性有关。（2）NGF、NT-3阳性细胞数在各时相均比正常增多，说明NGF、NT-3在脊髓全横断后呈持续性表达增加。