卵巢癌顺铂耐药机制的研究进展

卵巢癌是严重威胁妇女健康的恶性肿瘤之一,近几年卵巢癌的发病率有增高的趋势,据报道,美国2007年有22430例卵巢癌新发病例。由于卵巢癌发病隐匿和缺乏完善的早期诊断方法,约70％患者确诊时已为晚期（FIGO分期,Ⅲ期和Ⅳ期）,其死亡率居妇科恶性肿瘤的首位。在细胞减灭术的基础上施以以顺铂为主的联合化疗方案已成为卵巢癌的常规治疗方案。但由于卵巢癌患者对顺铂的原发性（primary drug resistance）和（或）获得性（acquired resistance）多药耐药（multiple drug resistance,MDR）的存在,     

血管内皮生长因子在卵巢癌细胞浸润转移中的作用

目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)在卵巢癌浸润转移中的作用。方法 :阳离子脂质体介导VEGF165质粒转染 2株卵巢癌细胞CaOV 3、COC1,并经逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)、Western免疫印迹检测转染VEGF165质粒前后癌细胞VEGFmRNA及其蛋白表达水平 ;用Boyden小室体外侵袭实验比较VEGF165质粒转染前后以及单克隆抗体作用后 2株癌细胞通过人工重组基底膜的能力强弱变化。结果 :VEGF165质粒转染后 ,2株细胞mRNA和蛋白表达水平均较转染前明显增强 (P <0 .0 5 )。VEGF165质粒转染的癌细胞CaOV 3、COC1穿过人工重组基底膜的相对百分率分别为 4 2 .5± 4 .1、2 6 .8± 2 .4 ,明显高于对照组穿膜细胞相对百分率 (2 4 .7± 1.9、8.6± 1.1) (P <0 .0 5 ) ;而在VEGF单克隆抗体存在时 ,2株癌细胞穿膜细胞相对百分率 (10 .2± 0 .7、5 .4± 0 .3)较处理前均有不同程度的下降 (P <0 .0 5 )。结论 :VEGF参与了卵巢癌转移的侵袭、浸润阶段 ,应用VEGF单克隆抗体可针对性地抑制VEGF介导的卵巢癌侵袭、浸润。     

TGF-β对卵巢癌细胞生长抑制的研究

目的 :检测 14株卵巢癌细胞系中TβRⅡ、Smad4、CDC2 5A和C myc的表达情况 ,并确定这些基因的表达与TGF β去敏感的相关性。 方法 :用MTT法检测TGF β抑制卵巢癌细胞系生长的情况 ,半定量RT PCR方法检测卵巢癌细胞中TβRⅡ、Smad4、CDC2 5A和C myc的mRNA水平。结果 :14株卵巢癌细胞系中均有TβRⅡ表达 ;与正常卵巢组织相比 ,10株卵巢癌细胞系中Smad4表达下降 ,9株中CDC2 5A过度表达 ;在致瘤性细胞系中CDC 2 5AmRNA过度表达者占 88% (8/ 9) ,在非致瘤性细胞系中 ,仅占 2 0 % (1/ 5 ,P <0 .0 5 ) ;所有卵巢癌细胞系中均无C myc过度表达。结论 :卵巢癌细胞系对TGF β去敏感的可能原因是 :诱导生长抑制的转导子Smad4表达下降 ,和 (或 )CDC2 5A过度表达 ,并且这种过度表达与卵巢癌细胞系致瘤性增强相关 ,TGF β去敏感与TβRⅡ缺乏无关。     

HSP27在卵巢癌顺铂耐药细胞系中的作用

目的探讨HSP27在卵巢癌耐药细胞系及敏感细胞系中的表达及其在卵巢癌顺铂耐药中的作用。方法通过 RT-PCR及Western blot检测卵巢癌细胞株OV2008和CI3K中HSP27 mRNA和蛋白的表达水平;将合成的针对HSP27基因的特异性siRNA及正义真核表达质粒pEGFP-C1-HSP27(命为p-HSP27),分别转染CI3K和OV2008细胞。通过RT-PCR及Western blot检测转染前后CI3K及OV2008细胞中HSP27 mRNA和蛋白表达的变化;MTT及流式细胞仪分别测定转染前后CI3K及OV2008细胞对顺铂敏感度的变化。结果(1)HSP27 在CI3K细胞中的mRNA和蛋白表达水平显著高于OV2008细胞,差异有统计学意义(P<0.05);(2)转染siRNA 48 h,CI3K细胞对顺铂的半数抑制浓度(IC50 )明显低于转染空载体和未转染的CI3K细胞(P<0.05);转染正义质粒p-HSP27 48 h,OV2008细胞对顺铂的IC50明显高于转染空载体和未转染的OV2008细胞(P<0.05);(3)转染siRNA及正义质粒 48 h,再用顺铂作用CI3K细胞24 h。转染siRNA的CI3K细胞的凋亡率比转染空载体和未转染的CI3K细胞的凋亡率明显增加,前者明显高于后两者(P<0.05);转染正义质粒的OV2008细胞的凋亡率比转染空载体和未转染的细胞的凋亡率明显下降,前者明显低于后两者(P<0.05)。结论CI3K及OV2008细胞内 HSP27基因表达的强弱可影响其对顺铂的敏感度,提示HSP27可能在卵巢癌顺铂耐药中起重要作用。     

卵巢癌高频转移细胞模型中nm23-H1基因表达的相关性研究

目的筛选高频转移卵巢恶性肿瘤细胞,研究不同转移潜能的细胞和 nm23的相关性。方法通过反复动物接种和体外培养,观察动物肺转移状况,筛选高频转移细胞株,比较原发肿瘤和转移肿瘤的特征,并应用 North-ern-blot 方法测定各类肿瘤细胞 nm23 mRNA 表达水平。结果 8株卵巢恶性肿瘤细胞中4株有较高转移潜能。多次培养接种可筛选出高频转移细胞亚群。测定各类细胞 nm23 mRNA 表达水平与肿瘤转移特性呈负相关。结论由基因分子水平决定的肿瘤转移趋势在不同肿瘤种类及细胞亚群中有明显差异;卵巢癌中 nm23 mRNA 和蛋白的表达与其转移能力的降低有密切关系,可作为判定卵巢癌预后的敏感指标。     

Stathmin在上皮性卵巢癌组织中的表达及意义

背景与目的:Stathmin是一种重要的微管调节蛋白,参与多种肿瘤的发生、发展.本研究旨在验证并探讨Stathmin在上皮性卵巢癌中的表达及意义.方法:利用免疫组化和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测22例卵巢正常上皮组织,16例良性肿瘤和50例上皮性卵巢癌组织中Stathmin的表达.结果:上皮性卵巢癌中Stathmin mRNA的表达明显高于卵巢良性肿瘤(P<0.05)和正常卵巢上皮(PO.05).进一步利用x2检验统计分析得出,Stathmin蛋白与卵巢癌的临床分期、病理分级、淋巴转移相关(P<0.05),而与年龄、病理类型及腹水量无相关性(P>0.05).结论:Stathmin在上皮性卵巢癌中高表达,可能与卵巢癌的发生、发展相关.     

新辅助化疗与单纯手术在局部晚期宫颈癌患者中的疗效对比分析

目的:比较分析术前新辅助化疗和单纯手术治疗IB2期、IIA2期宫颈癌的临床效果。方法:回顾分析2010年5月至2012年12月华中科技大学同济医学院附属同济医院收治的182例IB2期、IIA2期宫颈癌患者的临床资料。根据治疗方式分为2组:新辅助化疗组94例,单纯手术组88例。评价新辅助化疗组的化疗疗效以及比较两组的平均手术时间、平均术中出血量、术后病理、术后辅助治疗及生存情况。结果:新辅助化疗组的有效率为80.9%;其中IB2期有效率为78.2%,IIA2期为84.6%。新辅助化疗组的平均手术时间短于单纯手术组,差异有统计学意义(P=0.020)。两组的平均术中出血量比较,差异无统计学意义(P=0.832)。两组均无阴道切缘阳性病例。两组的宫颈间质浸润深度、宫旁转移、脉管浸润情况比较,差异均无统计学意义(P0.05)。新辅助化疗组无颈管累及病例,单纯手术组有5例颈管累及,差别有统计学意义(P=0.025)。新辅助化疗组和单纯手术组的术后淋巴转移率分别为16.0%、28.4%,术后辅助治疗率分别为61.7%、76.1%,差异均有统计学意义(P分别为0.043,0.036)。新辅助化疗组的1年、3年、5年无瘤生存率分别为93.6%、75.5%、67%,单纯手术组分别为89.8%、75%、61.3%,差异均无统计学意义(P0.05)。新辅助化疗组的1、3、5年总体生存率分别为98.9%、91.5%、80.4%,单纯手术组分别为98.9%、87.4%、70.7%,差异均无统计学意义(P0.05)。结论:新辅助化疗可有效控制肿瘤体积,减少手术时间,降低颈管累及率、淋巴转移率及术后辅助治疗率,但与单纯手术相比,不能改善患者的无瘤生存和总体生存。     

HPV16 E5 peptide vaccine in treatment of cervical cancer in vitro and in vivo

Human papillomavirus （HPV）-induced cervical cancer is the second most common cancer among women worldwide. Despite the encouraging development of the preventive vaccine for HPV, a vaccine for both prevention and therapy or pre-cancerous lesions remains in high priority. Thus far, most of the HPV therapeutic vaccines are focused on HPV E6 and E7 oncogene. However these vaccines could not completely eradicate the lesions. Recently, HPV E5, which is considered as an oncogene, is getting more and more attention. In this study, we predicted the epitopes of HPV16 E5 by bioinformat- ics as candidate peptide, then, evaluated the efficacy and chose an effective one to do the further test. To evaluate the effect of vaccine, rTC-1 （TC-1 cells infected by rAAV-HPV16E5） served as cell tumor model and rTC-1 loading mice as an ectopic tumor model. We prepared vaccine by muscle injection. The vaccine effects were determined by evaluating the function of tumor-specific T cells by cell prolif- eration assay and ELISPOT, calculating the tumor volume in mice and estimating the survival time of mice. Our in vitro and in vivo studies revealed that injection of E5 peptide＋CpG resulted in strong cell-mediated immunity （CMI） and protected mice from tumor growth, meanwhile, prolonged the sur- vival time after tumor cell loading. This study provides new insights into HPV16 E5 as a possible target on the therapeutic strategies about cervical cancer.     

ⅠA～ⅡB期宫颈癌盆腔淋巴结转移高危因素的临床分析

目的对宫颈癌淋巴结转移进行分层分析,为评估患者预后和指导个体化的治疗提供依据。方法对286例ⅠA～ⅡB期宫颈癌住院手术患者的临床病理资料进行回顾性分析,对其淋巴结转移的高危因素采用卡方检验和多元logistic回归分析。结果 286例宫颈癌患者盆腔淋巴结转移率为24.1%。影响淋巴结转移的显著的独立危险因素是肿瘤直径(P=0.001),间质浸润(P=0.006);影响淋巴结转移宫颈癌患者预后的独立影响因素是病理类型(P=0.027),宫旁浸润(P=0.067);无宫旁浸润的宫颈鳞癌患者预后最好。结论在ⅠA～ⅡB期宫颈癌中,其前哨淋巴结转移中闭孔淋巴结是最易受累的区域,其次是髂内淋巴结。结合临床病理因素,研究影响宫颈癌患者淋巴结转移的相关高危因素并进行预后评估,可以为其个体化治疗提供依据。     

腹膜假粘液瘤的临床病理特征及预后

目的 :探讨腹膜假粘液瘤 (pseudomyxomaperitonei,PP)的临床病理特征及预后。方法 :回顾性分析我院 1972年 12月至 1999年 12月间收治的 12例PP的临床及随访资料。采用Kaplan Meier法计算患者的生存率。结果 :患者诊断时的平均年龄为 4 9岁 ,原发病灶为阑尾和卵巢的粘液性肿瘤 ,肠梗阻及多次术后切口和全身感染是患者死亡的主要原因。本组患者的中位生存期为 72个月 ,5年生存率为 6 1% ,10年生存率为 19%。结论 :PP可来源于卵巢和阑尾的粘液性肿瘤 ,病理形态虽为良性或低度恶性 ,但患者 10年生存率低。目前尚无根治PP的方法 ,手术是治疗PP唯一肯定的有效方法 ,阑尾应常规切除