怀菊花总黄酮富集纯化工艺优化及其抗炎活性、成分组成研究

目的 优化怀菊花总黄酮富集纯化工艺，并考察其抗炎活性、成分组成。方法 在单因素试验基础上，以乙醇解吸体积分数、乙醇解吸体积、水除杂体积为影响因素，解吸率为评价指标，响应面法优化富集纯化工艺。采用CCK-8法检测总黄酮对ox-LDL诱导HUVECs细胞的增殖作用，ELISA法检测IL-1β、IL-6、TNF-α水平。HPLC法分析总黄酮成分组成。结果 最佳条件为乙醇解吸体积分数80%,乙醇解吸体积2 BV,水除杂体积4 BV,解吸率为84.93%,纯度为52.71%。与ox-LDL组比较，不同剂量(25、50、100μg/mL)总黄酮组HUVECs细胞增殖率升高(P<0.05,P<0.01),IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05,P<0.01)。总黄酮含有木犀草苷、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、香叶木素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素、金合欢素-7-O-葡萄糖苷、芹菜素、香叶木素、金合欢素、异绿原酸A。结论 该方法简便高效，可用于富集纯化具有抗炎活性的怀菊花总黄酮。     

地黄中毛蕊花糖苷对OxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡与自噬的影响北大核心

目的:研究从地黄中提取的毛蕊花糖苷对氧化低密度脂蛋白(OxLDL)诱导下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的保护作用,并进一步探究其对细胞炎症、凋亡与自噬的影响。方法:采用OxLDL(150μg/mL)处理HUVEC细胞建立内皮细胞损伤模型,实验设正常对照组、模型组及毛蕊花糖苷50、100μg/mL组。采用MTT法检测细胞相对存活率;亚硝酸盐显色法及ELISA法检测细胞上清液中NO、eNOS、IL-1β、IL-6、TNF-α含量;Annexin-V-PE/7AAD双染流式技术检测细胞凋亡;Flow Sight成像细胞仪检测自噬蛋白LC3A/B表达及自噬情况;Western Blot法检测细胞凋亡与自噬相关蛋白Bax、Bcl-2、LC3B的表达。结果:与模型组比较,毛蕊花糖苷可提高HUVEC细胞活力,降低炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α分泌及细胞凋亡率,促进细胞分泌NO与eNOS,升高LC3BⅡ/Ⅰ比值及自噬蛋白LC3A/B在细胞中标记的自噬百分率,降低凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2比值(P<0.05或P<0.01)。结论:毛蕊花糖苷可抑制炎症因子,减少细胞凋亡,增加细胞保护性自噬,改善内皮功能障碍。     

泡桐花提取物的雌激素活性筛选及其对OVA致过敏性哮喘小鼠的保护作用

目的:探讨泡桐花提取物雌激素活性及其对卵清白蛋白(OVA)致过敏性哮喘小鼠的保护作用。方法:体外采用MCF-7细胞模型筛选出泡桐花提取物具有雌激素样活性，采用雌激素受体拮抗剂(ICI182,780)、雌激素受体α拮抗剂(MPP)、雌激素受体β拮抗剂(THC)与雌激素膜受体GPR30拮抗剂(G15)干预雌激素活性有效剂量下的MCF-7细胞增殖，探讨其雌激素受体作用途径;采用小鼠子宫增重试验，计算性未成熟小鼠的子宫指数，以ELISA法检测血清雌二醇(E₂)、促卵泡生成素(FSH)与黄体生成素(LH)含量;采用Westren blot法测定小鼠子宫中雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)和雌激素膜受体(GPR30)表达水平，进一步体内验证泡桐花提取物雌激素活性;OVA致过敏性哮喘小鼠模型，分为正常对照组、模型对照组、地塞米松0.5 mg/kg组、泡桐花提取物155、310、620 mg/kg组，每组8只，同时设置雌激素受体拮抗剂ICI182,780组，雾化激发前30 min共同作用小鼠，连续7 d，末次给药24 h后，小鼠脱颈处死，计算免疫器官脾脏和胸腺指数，E...