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目的 通过构建慢病毒介导的靶向瘦素基因的小干扰RNA(siRNA),探讨瘦素对A549细胞增殖和凋亡的影响.方法 建立siRNA-a组、siRNA-b组及其各自阴性对照组和空白对照组(A549)5组细胞,分别于荧光显微镜下观察细胞5d和11d的生长情况.噻唑蓝(MTT)比色法测定空白对照组、siRNA-a组及其阴性对照组细胞1~6 d的生长情况,绘制生长曲线,比较各组细胞增殖差异.流式细胞仪分析各组细胞凋亡率,观察瘦素的siRNA对A549细胞凋亡的影响.RT-PCR和Western bloting方法检测各组细胞瘦素mRNA和蛋白表达水平.结果 siRNA-a细胞镜下形态基本正常,5d后荧光效率仍较高,感染稳定,但生长较阴性对照组及空白对照组细胞缓慢.siRNA-b细胞感染48 h后,镜下见细胞肿胀、变形,空泡出现,5d后见多量细胞碎片,凋亡小体形成,呈现凋亡状态,11d后可见细胞碎片,已近完全凋亡.MTT实验siRNA-a组细胞从第3天起生长比其他各组均缓慢(P<0.01).流式细胞仪检测细胞凋亡率结果:siRNA-a组、siRNA-b组细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组.RT-PCR和Western bloting结果 显示干扰组细胞瘦素mRNA和蛋白表达水平较阴性对照组和空白对照组明显下调.结论 慢病毒介导的siRNA能下调肺腺癌A549细胞瘦素基因的表达,从而抑制A549细胞增殖,促进其凋亡.由此可见,瘦素的siRNA有望成为肺腺癌基因治疗的新手段. 相似文献
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本文在中枢神经系统解剖学多媒体计算机辅助教学设计中,提出并采用VISUAL BASIC for Windows(简称VBASIC)解决了模拟教鞭和同步声音讲解,神经冲动传导模拟,高质量图象显示和声音控制等方面的问题。 相似文献
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用辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase简称HRP)追踪神经纤维联系是现代神经学研究的新方法,近年来已被国内外学者广泛应用。可是,还有不少问题有待解决,其中之一是呈色反应的敏感度问题。舒斯云(′78)曾对棕色反应[3,3′—二氨基(四盐酸)联苯胺法,简称DAB法]和蓝色反应[二盐酸联苯胺法,简称BDHC法]的方法作过比较。Mesulam和Rosene(′79),舒斯云(′81)和郑德枢(′81)分别对几种呈色反应方法进行了比较。值得指出的是,过去对HRP各种呈色反应方法的比较绝 相似文献
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目的:分析ABO血型正反不符标本的原因及确认试验结果。方法:应用ABO正反定型和吸收-放散试验及借助其他抗血清和不规则抗体鉴定,检测ABO正反定型不符的标本。结果:街头无偿献血者初检65210人份的血型检测结果显示,28例血型正反定型不相符,经试验确认无偿献血者分别判定为19例错型;7例亚型(Bx1例、A382例、B31例、A32例、cisAB1例);2例为不规则抗体(抗-M1例、抗Ⅰ例)。临床患者输血前正反定型不相符7例(A382例亚型、A31例亚型、冷凝集2例、自身溶血型贫血2例)。结论:当血型正反定型不符时,必须增加抗A、B及抗H等稀有试剂,结合不规则抗体筛选和吸收-放散试验以确定和排除红细胞上的弱抗原或血清中的弱抗体。 相似文献
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肾母细胞瘤是儿童最常见的恶性肿瘤之一, 约占儿童肿瘤的7%。其中10%~17%的肾母细胞瘤与肿瘤易感综合征(cancer predisposition syndrome, CPS)有关, 此类肾母细胞瘤发病更早, 恶性度及双侧发病率更高。目前非易感型综合征的肾母细胞瘤的治疗生存率可达90%以上, 治疗方案包括手术及联合放化疗, 而易感型综合征肾母细胞瘤治愈成功率较低, 为了保留肾单位、改善预后, 其治疗也各不相同。与肾母细胞瘤相关的CPS有WAGR综合征、Denys-Drash综合征和Beckwith-Wiedemann综合征等。目前国内医师缺少对肾母细胞瘤相关的易感综合征预防及诊断的认识, 本文通过回顾相关文献, 对肾母细胞瘤相关的易感综合征的筛查和相应的肾母细胞瘤治疗方法进行综述。 相似文献